UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
dibebaskan diukur dengan spektrofotometer UV-Vis dengan panjang gelombang 400 nm.
b Larutan uji tanpa enzim
Masing-masing seri larutan uji dipipet 60 µL ditambahkan dengan 440 µL dapar fosfat pH 7,0 dan ditambahkan 250 µL p-
nitrofenol α-D-glukopiranosida, lalu campuran reaksi dipra- inkubasi selama 5 menit pada suhu ruangan. Kemudian
ditambahkan 250 µL dapar fosfat pH 7,0. Selanjutnya diinkubasi selama 15 menit pada suhu ruangan. Reaksi dihentikan dengan
penambahan 1000 µL larutan natrium karbonat 2 M. Jumlah p- nitrofenol yang dibebaskan diukur dengan spektrofotometer UV-
Vis dengan panjang gelombang 400 nm.
3.8.6 Pembuatan Larutan Standar
1 Larutan induk standar
Akarbose ditimbang sebanyak 500 mg dan dilarutkan dalam DMSO hingga 5 mL.
2 Larutan standar seri
Seri larutan standar dibuat dalam empat konsentrasi berbeda. Dari larutan induk standar dipipet sebanyak 10 µL, 30 µL, 50 µL, dan
70µL dan 90 µL, kemudian ditambah dengan DMSO sebanyak 1000 µL. Sehingga didapat konsentrasi seri larutan 10 ppm, 30 ppm, 50
ppm, 70 ppm dan 90 ppm.
3 Larutan standar
a Larutan standar dengan enzim
Masing-masing seri larutan uji dipipet sebanyak 60 µL ditambahkan dengan 440 µL dapar fosfat pH 7,0 dan ditambahkan
p- nitrofenol α-D-glukopiranosida, lalu campuran tersebut dipra-
inkubasi selama 5 menit pada suhu ruangan. Kemudian
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
ditambahkan 250 µL larutan enzim. Selanjutnya diinkubasi selama 15 menit pada suhu ruangan. Reaksi dihentikan dengan
penambahan 1000 µL larutan natrium karbonat 2 M. Jumlah p- nitrofenol yang dibebaskan diukur dengan spektrofotometer UV-
Vis dengan panjang gelombang 400 nm.
b Larutan standar tanpa enzim
Masing-masing seri larutan uji dipipet sebanyak 60 µL ditambahkan dengan 440 µL dapar fosfat pH 7,0 dan ditambahkan
p- nitrofenol α-D-glukopiranosida, lalu campuran tersebut dipra-
inkubasi selama 5 menit pada suhu ruangan. Kemudian ditambahkan 250 µL dapar fosfat pH 7,0. Selanjutnya diinkubasi
selama 15 menit pada suhu ruangan. Reaksi dihentikan dengan penambahan 1000 µL larutan natrium karbonat 2 M. Jumlah p-
nitrofenol yang dibebaskan diukur dengan spektrofotometer UV- Vis dengan panjang gelombang 400 nm.
3.8.7 Larutan Kontrol
Larutan DMSO dipipet sebanyak 60 µL ditambahkan dengan 440 µL dapar fosfat pH 7,0 dan ditambahkan250 µL p-
nitrofenol α-D- glukopiranosida, lalu campuran tersebut dipra-inkubasi selama 5
menit pada suhu ruangan. Kemudian ditambahkan 250 µL larutan enzim. Selanjutnya diinkubasi selama 15 menit pada suhu ruangan.
Reaksi dihentikan dengan penambahan 1000 µL larutan natrium karbonat 2 M. Jumlah p-nitrofenol yang dibebaskan diukur dengan
spektrofotometer UV-Vis dengan panjang gelombang 400 nm.
3.8.8 Larutan Blangko
Larutan DMSO dipipet sebanyak 60 µL ditambahkan dengan 440 µL dapar fosfat pH 7,0 dan ditambahkan250 µL p-
nitrofenol α-D- glukopiranosida, lalu campuran tersebut dipra-inkubasi selama 5
menit pada suhu ruangan. Kemudian ditambahkan 250 µL dapar fosfat
