40
3.5.3.8. Kadar Amilosa
3.5.3.8.1. Pembuatan Kurva Standar Amilosa
Amilosa murni sebanyak 40 mg dimasukkan ke dalam tabung reaksi. Selanjutnya ditambahkan 1 ml etanol dan 9 ml larutan NaOH 1 N. Kemudian dipananskan
dalam air mendidih selama 10 menit sampai terbentuk gel. Setelah didinginkan, gel yang didapatkan dimasukkan ke dalam labu takar 100 ml.
Sebanyak 1, 2, 3, 4, dan 5 ml larutan stok diambil menggunakan pipet dan dipindahkan ke dalam masing-masing labu takar 100 ml. Pada masing-masing
labu ditambahkan 0,2, 0,4, 0,6, 0,8, dan 1,0 ml larutan asam asetat 1 N. Setelah itu ditambahkan larutan iod sebanyak 2 ml dimasukkan ke dalam masing-masing
labu, lalu ditambahkan aquades hingga tanda tera 100 ml. Larutan didiamkan selama
20 menit,
selanjutnya diukur
absorbansinya menggunakan
spektrifotometer dengan panjang gelombang 625 nm. Kurva standar merupakan hubungan antara kadar amilosa dan absorbansi.
3.5.3.8.2. Analisis Sampel
Sampel pati dimasukkan ke dalam labu takar 100 ml sebanyak 100 mg. Selanjutnya ditambahkan 1 ml etanol 95 dan 9 ml larutan NaOH 1 N. Labu
takar dipanaskan selama 10 menit. Setelah didinginkan, larutan berupa gel pati tersebut ditambahkan air destilata sampai tanda tera dan dihomogenkan. Larutan
gel pati sebanyak 5 ml dipindahkan ke dalam labu takar 100 ml. Selanjutnya ditambahkan larutan asam asetat 1 N dan 2 ml larutan iod, lalu ditambahkan
aquades sampai 100 ml dan dikocok hingga homogen. Setelah larutan didiamkan
41
selama 20 menit, diukur absorbansi menggunakan spektrofotometer dengan panjang gelombang 625 nm. Hasil absorbansi dimasukkan dalam kurva standar
untuk memperoleh χ. Kadar amilosa dapat dihitung menggunakan rumus :
Ka a a i sa χ
a sa
100 Keterangan :
χ k s asi a i sa Fp = faktor pengenceran
3.5.3.9. Kadar Amilopektin
Pengujian kadar amilopektin dilakukan dengan menggunakan metode perhitungan
by difference. Perhitungan ini dilakukan dengan mengurangi kadar pati sampel dengan kadar amilosa sampel. Kadar amilopektin dapat dihitung menggunakan
rumus : Ka a a i k i ka a a i ka a a i sa
Kategori