Instrumen Penelitian. Teknik Pengumpulan Data

Variabel moderator, terdiri atas : 1 Kadar Hb ialah banyaknya Hb dalam satuan mg metode pengukuran dengan metode cyanmethemoglobine, reagent ; human, specimen ; darah vena EDTA, alat; microlab – MERCK dengan panjang gelombang : Hg 546 nm 2 Antal lekosit ialah jumlah sel lekosit ml dengan pemeriksaan menggunakan reagent ; larutan TURK, specimen ; darah vena EDTA 3 Hematokrit ialah volume sel darah ml, pengukuranhematokrit menggunakan specimen darah vena EDTA dengan alat tabung wintrobe Variabel kendali ialah : Jenis kelamin, merokok, aktivitas atau gerak, makanan, kesehatan dan obat anti radang

3.4 Instrumen Penelitian.

Instrumen yang digunakan untuk mengukur variabel penelitian ini ialah : 1 Mengukur tingkat kebugaran Nama instrument : V02maks. dengan pengukuran lari 1 mil Status : standart Peralatan : lintasan atletik, stopwatch, bendera start. 2 Mengukur kondisi otot atau kerusakan otot dengan metode thiobarbituric acid reactive substance TBARS Specimen : darah EDTA Centrifuge : Merk : Heraeus Seri : Biofuge 15 Spectrofotometer : Merk : Hach Seri : DR 2000 Column : Sep – Pak L 18. 3 Mengukur kadar Hemoglobin : Specimen : darah vena EDTA Microlab – Merck dengan panjang gelombang Hg 546 nm 4 Mengukur antal lekosit: Reagent : larutan TURK Specimen : darah vena EDTA Pipet lekosit Kamar hitung improved Neubauer Mikroskop 5 Mengukur hematokrit Specimen : darah vena EDTA Tabung Wintrobe

3.5 Teknik Pengumpulan Data

Data diukumpulkan berdasarkan wawancara, pembacaan dokumen dan observasi. 1 Data populasi penelitian diambil berdasarkan daftar NIM mahasiswa FKIP- JPOK- UNS Surakarta semester III Th ajaran 20072008 sebanyak 132 mahasiswa. 2 Pengambilan data VO2maks. Tempat dan peralatan Tempat : lapangan atletik stadion Manahan Surakarta Peralatan : daftar absensi, stop watch, nomor dada, lintasan atletik, bendera. Petugas : peneliti dengan 3 orang: dosen atletik dibantu 3 orang asisten mahasiswa. Petugas terdiri dari: pemberi aba keberangkatan, pengukur waktu, pencatat hasil. Persiapan : pemanasan berupa senam dan peregangan otot Pelaksanaan : Subyek berdiri dibelakang garis start yang telah ditentukan. Pada aba- aba “SIAP” subyek mengambil sikap start berdiri siap untuk lari. Pada aba - aba “YA” subyek berlari menempuh jarak I mil. Waktu yang dicatat adalah mulai dari aba-aba “YA” sampai saat subyek melewati garis finish. Pelaksanaan lari satu mil dilakukan sekaligus 40 orang. Penilaian VO2 maks. dibaca pada daftar stop watch berdasar waktu yang dicapai sesuai protokol ACSM. 3 Aktivitas fisik submaksimal dan waktu pemberian antioksidan vitamin 1 Aktivitas fisik submaksimal waktu pendek berupa lari cepat 800 m. Kelompok I. di beri antioksidan vitamin 1 tablet di lanjutkan lari 2 x 800m 1:3. Waktu mulai start sampai melewati garis finish dicatat. Hasil waktu yang dicapai rerata 3 menit, sehingga ditentukan waktu istirahat sebelum melakukan lari 800 m yang kedua selama 3x3 menit atau 9 menit. Waktu istirahat dilakukan secara aktif berupa jalan ditempat. Setelah istirahat 9 menit dilanjutkan lari 800 m yang kedua. Kelompok II; Tanpa diberi antioksidan vitamin subyek melakukan lari cepat 2 x 800 m 1:3 seperti kelompok I. Antioksidan vitamin diminum esok harinya. 2 Aktivitas fisik submaksimal waktu panjang berupa lari 1500 m. Kelompok III dan kelompok IV lari 1500 m berangkat bersamaan. Kelompok IV sebelum lari minum antioksidan vitamin satu tablet, kelompok III antioksidan vitamin diminum esok hari setelah lari. 4 Pengukuran data kondisi otot. Kondisi otot diukur dengan indikator tingkat kerusakan otot yaitu berdasarkan kadar MALONDIALDEHID MDA plasma secara laboratories. Metode yang dipakai adalah metode “Thiobarbituric Acid – Reactive Substances”TBARS Prinsip kerja “TBARS” : 1 mol MDA + 2 mol TBA thiobarbituric acid -------kromogen yang dapat diukur pada 532 nm. Langkah kerja pemeriksaan MDA sebagai berikut: 1. Ambil darah vena EDTA 1ml.masukkan kedalam sample cup 2. Dicentrifuge dengan kecepatan 1500-2000 rpm selama 15-20 menit 3. Ambil dengan pipet 0, 75 ml H3PO4 4. Ambil 0, 25 ml TBA campurkan dengan 0,75 ml H3PO4. 5. Larutan no.4 dicampur dengan 0, 05 ml plasma 6. Larutan no.5 ditambah H2O 0, 45 ml 7. Larutan no.6 masukkan dalam waterbath selama 60 menit pada temperatur 100 derajat Celcius. 8. Dinginkan dalam es bath. 9. Masukkan kedalam columna C 18.larutan methanol 5ml. 10. Larutan no.9 tambahkan H2O 5 ml. 11. Ambil sampel darah dari no.8 masukkan ke columna. 12. Tambahkan H2O sebanyak 4ml ke no.11. 13. Tambahkan methanol 4ml ke no.12 lalu hasilnya ditampung. 14. Letakkan pada alat spectrophotometer pada 532 nm. Perhitungan jumlah MDA ialah: Sampel – 0, 0000667 MDA = -------------------------- x 5 0, 0451250 5 Pemeriksaan kadar hemoglobin - Metode: Cyanmethemoglobin - Reagent: human - Specimen: darah vena EDTA - Alat : Mikrolab – Merck Panjang gelombang: Hg 546 nm Cara Kerja: Darah EDTA pada vial dicampur terlebih dahulu. - Disiapkan 5ml reagent Hb.pada tabung. - Dipipet darah EDTA sebanyak 20ul menggunakan pipet Hb. - Dimasukkan kedalam tabung yang berisi 5ml reagen Hb lalu dicampur. - Dibaca setelah didiamkan selama 3 menit dalam suhu kamar. - Pembacaan pada microlab-merck dengan panjang gelombang 546 nm. dengan terlebih dahulu di blank menggunakan reagen Hb. 6 Pemeriksaan antal lekosit AL - Reagent : larutan TURK - Specimen : darah vena EDTA - Alat : pipet lekosit kamar hitung improved neubauer mikroskop Cara Kerja: - Darah EDTA dicampur dahulu sebelum dipipet - Dipipet darah EDTA sampai batas 0,5 dilanjutkan dengan memipet larutan TURK sampai batas 11 tertera pada pipet lekosit - Dicampur dengan membolak balikkan pipet kemudian dibuang 3-4 tetes - Setelah itu diteteskan kedalam kamar hitung Improved Neubauer - Dibaca dibawah mikroskop dengan perbesaran 10 x pada kamar hitung. 7 Pemeriksaan hematokrit - Specimen : darah vena EDTA - Alat : tabung Wintrobe Cara Kerja : - Darah EDTA dimasukkan dengan memakai spuit ke tabung Wintrobe sampai batas 10 - Dicentrifuge dengan kecepatan 1500-2000 rpm selama 15-20 menit - Dibaca pada tabung Wintrobe sebagai berikut: Tinggi darah. --------------------- x 100 Tinggi buffycoat 3.6 Teknik Pengolahan dan Analisis Data 3.6.1 Berdasar Hipotesis Statistik