Baharuddin Afandi : Pengaruh Co
2
Karbondioksida Murni Terhadap Pertumbuhan Mikroorganisme Pada Produk Minuman Fanta Di PT. Coca-Cola Bottling Indonesia Unit Medan, 2009.
mikroorganisme yang bersifat enteropatogenik danatau toksigenik yang berbahaya bagi kesehatan.
Bakteri koliform dapat dibedakan atas dua grup yaitu 1 koliform fekal, misalnya Eschericia coli E.coli dan 2 koliform non fekal, misalnya Enterobacter
aerogenes. E.coli merupakan bakteri yang berasal dari kotoran hewan maupun manusia,
sedangkan enterobactera erogenes biasanya ditemukan pada kotoran hewan maupun tanam-tanaman yang telah mati.
Untuk mengetahui jumlah koliform didalam contoh biasanya digunakan metode MPN Most Probeble Number dengan cara fermentasi tabung ganda. Metode
ini lebih baik bila dibandingkan dengan hitungan cawan karena lebih sensitif dan dapat mendeteksi koliform dan jumlah yang sangat rendah didalam contoh. Metode
lain yang dapat digunakan adalah metode Milipore Membrane Filter, filter yang dapat mendeteksi dan menghitung koliform dalam jumlah kecil didalam contoh.
2.6.1 Metode membran filter
Sebanyak 25-100 ml contoh disaring melalui membran filter steril dengan pori-pori 0,22-0,45 mikron dan diameter sekitar 5 cm. Kemudian membran filter tersebut
diletakan diatas agar cawa, dan inkubasi pada suhu 35 C atau 37
C selama 18-24 jam.
Jumlah koliform tifikal baik fekal maupun non fekal dihitung dcan dinyatakan dalam jumlah koliform per 100 ml contoh. Endo agar dapat digunakan untuk
membedakan koloni bakteri yang memfermentasi laktosa dengan yang tidak memfermentasi laktosa, karena medium ini mengandung 1 laktosa, sebagai satu-
Baharuddin Afandi : Pengaruh Co
2
Karbondioksida Murni Terhadap Pertumbuhan Mikroorganisme Pada Produk Minuman Fanta Di PT. Coca-Cola Bottling Indonesia Unit Medan, 2009.
satunya sumber karbohidrat. Koloni yang memfermantasi laktosa, termasuk koliform, membentuk bagian merah pada bagian atas koloni dan sekelilingnya. Bakteri yang
tidak memfermentasi laktosa, misalnya salmonela dan shigella, akan membentuk koloni yang tidak berwarna baik pada Agar.
Metode membran filter ini mempunyai kebaikan, antara lain: 1.
Dapat digunakan untuk mengetahui jumlah mikroorganisme didalam sampel yang sedikit.
2. Penyebaran bakteri dibatasi sesempit mungkin dan pada suatu waktu dapat
digunakan untuk campuran bakteri sampai 500 jenis. 3.
Setiap waktu dapat dilakukan pemisahan organisme dari bahan media. 4.
Memberikan perhitungan yang langsung dari penentuan jumlah. 5.
Lebih cepat dan lebih baik didalam membedakan jenis-jenis bakteri. 6.
Memberikan catatan hasil yang permanen didalam cawan petri yang diawetkan.
Kejelekan sistem ini antara lain ialah membran yang sudah dipakai tidak dapat digunakan untuk menyaring air yang mengandung lumpur atau sedimen karena dapat
menyumbat penyaring.
2.6.2 Metode hitung cawan Total Count
Yang dimaksud dengan Total Count yaitu perhitungan jumlah tidak berdasarkan jenis, tetapi secara kasar terhadap golongan atau kelompok besar mikroorganisme umum
seperti bakteri, fungi, mikro algae ataupun terhadap kelompok bakteri tertentu.
Baharuddin Afandi : Pengaruh Co
2
Karbondioksida Murni Terhadap Pertumbuhan Mikroorganisme Pada Produk Minuman Fanta Di PT. Coca-Cola Bottling Indonesia Unit Medan, 2009.
Jumlah koliform didalam contoh dapat dihitung dengan metode hitungan cawan menggunakan agar VRB Violet Red Bile atau agar DL Dexoycholate
Lactose. Inkubasi cawan yang mengandung agar VRB atau agar DL harus dilakukan pada suhu 35
C atau 37 C selama 24 jam.Fardiaz,1993
BAB 3
METODOLOGI
3.1. Metodologi
