Dilakukan pengukuran keluhan menopause somatik-vegetatif, psikologis dan urogenital yang sesuai dengan Menopause Rating Scale yang diisi sendiri oleh
Subjek penelitian dengan didampingi oleh peneliti atau dibantu oleh PPDS Obgyn.
Adapun pengukuran untuk gejala menopause dengan memakai Menopause Rating Scale. MRS terdiri dari 11 item yang menilai gejala menopause, dengan nilai
skor untuk dibagi menjadi beberapa derajat. Skor Total
- Tidak ada, sedikit : 0-4 - Ringan
: 5-8 - Sedang
: 9-16 - Berat
: ≥ 17
4.6.2. Pemeriksaan Fisik
Pemeriksaan ini meliputi pengukuran tekanan darah, berat badan dan tinggi badan
4.6.3. Pemeriksaan Laboratorium - Dilakukan pengambilan sampel darah terhadap peserta penelitian yang bersedia
mengikuti penelitian yang memenuhi kriteria inklusi. - Darah diambil menggunakan spuit sebanyak 3 cc pada vena mediana cubiti dan
dimasukkan kedalam tabung. Kemudian dilakukan setrifuse untuk memisahkan antara serum dan plasma.
- Serum diambil dengan menggunakan pipet, dimasukkan kedalam tabung yang telah disediakan. Pemeriksaan sampel menggunakan alat spektrofotometri.
- Pemeriksaan darah dilakukan di Laboratorium Terpadu USU
Universitas Sumatera Utara
- Cara kerja : • 5 – 10 чl GPx positif kontrol dimasukkan ke dalam well kosong dan
tambahkan Assay Buffer sampai didapat volume akhir 50 чl. • 50 чl Assay Buffer dimasukkan kedalam well kosong, ini sebagai Reagent
Control RC. • Ambil 20 чl serum dan masukkan kedalam well kosong, kemudian tambahkan
Assay Buffer sampai didapat volume akhir 50 чl. • Reaction Mix : untuk tiap well siapkan 40 чl reaction mix yang terdiri dari : 33
чl Assay Buffer 3 чl larutan 40nM NADPH
2 чl larutan GR 2 чl larutan GSH
• Tambahkan 40 чl reaction mix pada tiap sampel. Positif kontrol dan reagent control RC, campur, inkubasi selama 15 menit.
• Tambahkan 10 чl Cumene Hydroperoxidase,campur. • Ukur pada panjang gelombang 340 nm pada waktu pertama T1 untuk
mendapatkan absorbansi pertama A1. • Inkubasi pada suhu 25
Perhitungan : C selama 5 menit, ukur lagi pada waktu kedua T2
untuk mendapatkan Absorbansi kedua A2. Hindari dari cahaya.
Δ A
340nm
= sampel A1-sampel A2 – RC A1-RC A2
Universitas Sumatera Utara
Gunakan standard curve untuk mencari jumlah NADPH yang diperoleh B dengan menasukkan nilai Δ A
340nm
GPx ke dalam persamaan garis regresi yang
diperoleh dari standard curve.
activity
T2-T1 x V = B x sampel dilusi
Dimana : B = jumlah NADPH yang menurun antara T1 dan T2 nmol
T1 = waktu pertama menit T2 = waktu kedua menit
V = volume sampel yang ditambahkan kedalam well ml
4.7. Etika Penelitian
