Uji Aktivitas Ekstrak Etanol Daun Jambu Bol (Syzygium malaccense L. Merr & Perry) Sebagai Antikolesterol Menggunakan Tikus Jantan

Lampiran 1. Hasil identifikasi tanaman jambu bol (Syzygiun malaccense L. Merr & Perry)

Lampiran 2. Bagan kerjapenelitian

Serbuk simplisia

Daun Jambu Bol

Simplisia

dicuci, ditiriskan, dipotong menjadi bagian kecil dan ditimbang sebagai berat basah

dikeringkan dalam lemari pengering

ditimbang berat kering dihaluskan

diekstraksi secara maserasi

Pemeriksaan alkaloida Pemeriksaan glikosida Pemeriksaan flavonoida Pemeriksaan tanin Pemeriksaan saponin Pemeriksaan Steroida/ triterpenoida

Karakterisasi simplisia Skrining Fitokimia Uji Antikolesterol Ekstrak

Penetapan kadar air

Penetapan kadar sari larut dalam

air Penetapan kadar

sari larut dalam etanol Penetapan kadar

abu total Penetapan kadar

abu tidak larut asam

Kontrol CMC Na 0,5% EEDJB 100 mg/kg bb EEDJB 200 mg/kg bb EEDJB 300 mg/kg bb EEDJB 400 mg/kg bb Pembanding simvastatin

Lampiran 3. Bagan pembuatan ekstrak etanol daun jambu bol

Dimasukkan ke dalam wadah

Ditambahkan penyari, biarkan selama 5 hari Disaring

Direndam kembali dengan penyari, biarkan selama 2 hari

Disaring

Diuapkan menggunakan

rotavapor (suhu 40oC)

Di uapkan di atas waterbath (suhu 40oC) Disaring

Berat serbuk 900 gram

Ampas Maserat

Maserat Ampas

Lampiran 4. Bagan pengerjaan uji aktivitas antikolesterol pada tikus

diukur kadar kolesterol total awal dengan cholesterol test

dicatat kadar kolesterol awal

diinduksi dengan lemak kambing, minyakjelantah dan kuning telur 1% bb selama 14 hari

Tikus dipuasakan

18 jam

Diukur kadar kolesterolnya

Tikus dibagi menjadi 6 kelompok, tiap kelompok

terdiri dari 5 ekor tikus

− Kelompok kontrol diberi Na CMC 0,5%

− Kelompok uji EEDJB 100, 200, 300, dan 400 mg/kg bb

− Kelompok pembanding

Simvastatin 0,9 mg/kg bb

Diberikan sediaan uji selama 21 hari

Dicek kadar kolesterol total pada

hari ke-7, 14, dan 21

Lampiran 5. Gambar tanaman dan daunjambu bol ((Syzygiun malaccense L. Merr & Perry)

Lampiran 7. Gambar sediaan penginduksi

Lemak kambing

Kuning telur bebek

Lampiran 8. Gambar alat

Wadah strips

Strip kolesterol

Chip cholesterol test

Cholesterol test EasyTouch®GCU

Oral sonde dan spuit

Lampiran 10. Perhitungan hasil karakterisasi serbuk simplisia dan ekstrak etanol daun jambu bol

1. Penetapan kadar air

% Kadar air= volume air (ml )

berat sampel (gram )

x

100

%

No

Berat sampel Volume awal Volume akhir Simplisia Ekstrak Simplisia Ekstrak Simplisia Ekstrak

1 5,0500 g 5,0500 g 1,2 2,4 1,6 2,6

2 5,0500 g 5,0000 g 1,6 2,6 2,0 2,8

3 5,0300 g 5,0000 g 2,0 2,8 2,4 3,0

Kadar air simplisia

%Kadar air = 1,6 − 1,2 ml

5,0500 g x100% = 7,92%

% Kadar air = 2,0 – 1,6ml

5,0500 g x 100 % = 7,92%

% Kadar air = 2,4 – 2,0 ml

5,0300 g x 100 % = 7,95%

% Kadar air rata-rata = 7,92 % + 7,92 % + 7,95 %

3 = 7,93 %

Kadar air ekstrak

Kadar air = 2,6 – 2,4 ml

5,0500 g x100% = 3,96%

% Kadar air = 2,6 – 2,6 ml

5,0000 g x 100 % = 4%

% Kadar air = 3,0 – 2,8 ml

5,0000 g x 100 % = 4 %

% Kadar air rata-rata = 3,96 % + 4,0 % + 4,0 %

3 = 3,98 %

2. Penetapan kadar sari larut air

% kadar sari yang larut dalam air =berat sari air

berat sampel

x

100

20 x 100 %

No

Berat sampel Berat sari

Simplisia Ekstrak Simplisia Ekstrak 1 5,0000 g 5,0500 g 0,1300 g 0,4000 g 2 5,0000 g 5,0000 g 0,1200 g 0,3500 g 3 5,0500 g 5,0500 g 0,1500 g 0,3500 g Kadar sari simplisia

% Kadar sari larut dalam air = 0,1300 g

5,0000 gx 100

20

x

100 % = 13,0 %

% Kadar sari larut dalam air =0,1200 g

5,0000 g x 100

20

x

100 % = 12,0 %

% Kadar sari larut dalam air = 0,1500 g

5,0500 g x 100

20

x

100 % = 14,85 %

% Kadar sari larut dalam air rata-rata=13,0 % + 12,0 %+ 14,85 %

3 = 13,28 %

Kadar sari ekstrak

Kadar sari larut dalam air = 0,4000 g

5,0500 gx 100

20

x

100 % = 39,60 %

Kadar sari larut dalam air = 0,3500 g

5,0000 g x 100

20

x

100 % = 35 %

Kadar sari larut dalam air = 0,3500 g

5,0500 g x 100

20

x

100 % = 34,65 %

% Kadar sari larut dalam air rata-rata=39,60 % + 35 %+ 34,65 %

3 = 36,41 %

3. Penetapan kadar sari larut etanol

% kadar sari yang larut dalam etanol

=

berat sari air

berat sampel x 100

20 x100 %

No

Berat sampel Berat sari

Simplisia Ekstrak Simplisia Ekstrak

1 5,0500 g 5,0000 g 0,1500 g 0,5000 g

2 5,0000 g 5,0500 g 0,1500 g 0,5500 g

3 5,0000 g 5,0000 g 0,1700 g 0,5500 g

Kadar sari simplisia

Kadar sari larut dalam etanol = 0,1050 g

5,0500 g x 100

20 x100 % = 14,85 %

Kadar sari larut dalam etanol =0,1500 g

5,0000 g x 100

20 x100 % = 15 %

Kadar sari larut dalam etanol = 0,1700 g

5,0000 g x 100

20 x100 % = 17 %

% Kadar sari larut dalam etanol rata-rata=14,85% + 15% + 17%

3 = 15,61%

Kadar sari ekstrak

Kadar sari larut dalam etanol = 0,5000 g

5,0000 g x 100

20 x100 % = 50 %

Kadar sari larut dalam etanol =0,5500 g

5,0500 g x 100

20 x100 % = 54 %

Kadar sari larut dalam etanol = 0,5500 g

5,0000 g x 100

20 x100 % = 55 %

% Kadar sari larut dalam etanol rata-rata=50% + 45% + 55%

3 = 53%

4. Penetapan kadar abu total

% kadar abu total = berat abu (g)

berat sampel (g)x 100 %

No

Berat sampel Berat abu

Simplisia Ekstrak Simplisia Ekstrak

1 2,0002 g 2,0000 g 0,2000 g 0,0400 g

2 2,0004 g 2,0003 g 0,1500 g 0,0450 g

3 2,0006 g 2,0002 g 0,2500 g 0,0550 g

Kadar abu total simplisia % Kadar abutotal = 0,2000

2,0000x 100 % = 10 %

% Kadar abutotal = 0,1500

2,0000x 100 % = 7,5 %

% Kadar abu total = 0,2500

2,0000 x 100 % = 12,5 %

% Kadar abu total rata-rata = 10% + 7,5% + 12,5%

3 = 10 %

Kadar abu total ekstrak

% Kadar abutotal = 0,0400

2,0000x 100 % = 2 %

% Kadar abutotal = 0,0450

2,0003x 100 % = 2,24 %

% Kadar abu total = 0,0550

2,0002 x 100 % = 2,74 %

% Kadar abu total rata-rata = 2 + 2,24% + 2,74%

3 = 2,32 %

5. Penetapan kadar abu yang tidak larut asam

% Kadar abu tidak larut asam = berat abu tidak larut asam

berat sampel x 100 %

No

Berat sampel Berat sari

Simplisia Ekstrak Simplisia Ekstrak

1 2,0000 g 2,0000 g 0,0100 g 0,0065 g

2 2,0000 g 2,0000 g 0,0100 g 0,0041 g

3 2,0000 g 2,0000 g 0,0100 g 0,0045 g

Kadar abu simplisia

% Kadar abu tidak larut asam = 0,0100

2,0000x 100 % = 0,5 %

% Kadar abu tidak larut asam = 0,0100

2,0000x 100 % = 0,5 %

% Kadar abu tidak larut asam = 0,0100

2,0000x 100 % = 0,5 %

% Kadar abu tidak larut asam rata-rata = 0,5% + 0,5% + 0,5%

3 = 0,5 %

Kadar abu ekstrak

% Kadar abu tidak larut asam = 0,0023

2,0000x 100 % = 0,11 %

% Kadar abu tidak larut asam = 0,0022

2,0000x 100 % = 0,11 %

% Kadar abu tidak larut asam = 0,0025

2,0000x 100 % = 0,12 %

% Kadar abu tidak larut asam rata-rata = 0,11% + 0,11% + 0,12%

3 = 0,11 %

Mencit 20 g

Tikus 200 g

Marmot 400 g

Kelinci 1,5 kg

Kera 4 kg

Anjing 12 kg

Manusia 70 kg Mencit

20 g 1,0 7,0 12,25 27,8 64,1 124,3 387,9

Tikus

200 g 0,14 1,0 1,74 3,0 9,2 17,8 56,0

Marmot

400 g 0,008 0,57 1,0 2,25 5,2 10,2 31,5

Kelinci

1,5 kg 0,04 0,25 0,44 1,0 2,4 4,5 14,2

Kera

4 kg 0,016 0,11 0,19 0,42 1,0 1,9 6,1

Anjing

12 kg 0,008 0,06 0,10 0,22 0,52 1,0 3,1 Manusia

70 kg 0,0026 0,018 0,031 0,07 0,16 0,32 1,0

Contoh perhitungan dosis simvastatin yang diberikan pada tikus

- Syarat volume maksimum larutan sediaan uji yang diberikan pada tikus dengan berat 200 g secara oral adalah 2 ml

a. Berat 20 tablet adalah 2543 mg, berat rata-rata pertablet adalah 127,15g Dosis simvastatin yang digunakan adalah 10 mg

Konversi dosis manusia (70 kg) ke dosis hewan (tikus) dikali 0,018 Dosis tikus dengan berat 200 g adalah (10 mg x 0,018 = 0,18 mg)

Dosis simvastatin yang diberikan adalah

1000

200 x 0,18 mg = 0,9 mg/kg bb

b. Maka serbuk simvastatin yang digunakan adalah

=

0,9 mg

kg bb

10 mg x 127,15 mg= 11,44

c. Volume suspensi simvastatinyang diberikan untuk tikus

Pembuatan suspensi simvastatin : ambil 11,44 mg serbuk simvastatin dilarutkan dalam 10 ml suspensi CMC Na 0,5%

Berat badan tikus = 200 g

Volume larutan yang diberi = 200

1000 x 10 ml= 2 ml

Contoh perhitungan dosis ekstrak etanol daun jambu bol yang akan diberikan pada tikus hiperkolesterolemia.

- Dosis suspensi ekstrak etanol daun jambu bol yang akan dibuat adalah 100 mg/kg bb, 200 mg/kg bb, 300 mg/kg bb, 400 mg/kg bb.

a. Cara pembuatan suspensi ekstrak etanol daun jambu bol :

Timbang 100 mg, 200 mg, 300 mg, 400 mg ekstrak etanol daun jambu bol, masing-masing dilarutkan dalam 10 ml suspensi CMC Na 0,5%

b. Volume suspensi ekstrak etanol daun jambu bol yang akan diberikan pada tikus dengan berat badan 200 g.

− Volume suspensi EEDJB 100 mg/kg bb yang diberikan adalah

200

1000 x 10 ml = 2 ml

− Volume suspensi EEDJB 200 mg/kg bb yang diberikan adalah

200

1000 x 10 ml = 2 ml

− Volume suspensi EEDJB 300 mg/kg bb yang diberikan adalah

200

1000 x 10 ml = 2 ml

− Volume suspensi EEDJB 400 mg/kg bb yang diberikan adalah

200

1. Perhitungan rendemen simplisia dan ekstrak % rendemen = Berat kering

berat basah x 100%

Simplisia

Berat basah Berat simplisia Persentase (%)

9100 g 3200 g 35,15

Ekstrak

Berat ekstrak Berat simplisia Persentase (%)

194,45 g 3200 g 6,07

2. Perhitungan dosis

Ekstrak etanol daun jambu bol pada dosis 200 mg/kg bb yang diberikan pada tikus sudah menurunkan kadar kolesterol tikus jadi jika diberikan pada manusia adalah : Konversi dosis tikus (200 g) ke dosis manusia (70kg) dikalikan 56,0

Dosis EEDJB 200 mg/kg bb = 200 mg

1000 g x 200 9 = 40 mg

Dosis ke manusia (70kg)= 40 mg x 56,0 = 2240 mg = 2,24 g ekstrak - Simplisia kering

2,24 g X =

194,45 g 3200 g

Simplisia kering = 36,8629 g - Daun segar

36,8629 g X =

3200 g 9100 g

Berat daun segar = 104,82901 g/hari atau 0.1048 kg/hari

1. Kontrol Na CMC 0,5% No BB

(g) Kadar kolesterol awal (mg/dl) Kadar hiperkolesterol

setelah 14 hari (mg/dl)

Kadar kolesterol setelah perlakuan (mg/dl)

Hari ke-

7 14 21

1 154,9 142 240 210 202 193

2 170,1 110 217 198 190 183

3 155,3 131 232 208 198 193

4 160,0 128 215 198 180 177

5 161,1 131 210 195 195 183

Rata-rata SD

128,4 222,8 201,8 193 185,8

11,59 12,64 6,72 8,49 7,01

2. EEDJB 100 mg/kg bb No BB

(g) Kadar kolesterol awal (mg/dl) Kadar hiperkolesterol

setelah 14 hari (mg/dl)

Kadar kolesterol setelah perlakuan (mg/dl)

Hari ke-

7 14 21

1 176,2 110 240 155 148 136

2 158,2 104 217 153 143 138

3 170 117 232 181 170 166

4 155,3 120 215 185 178 162

5 161,0 110 223 177 162 153

Rata-rata SD

112,2 225,4 170,2 160,2 151,1

6,34 10,50 15,07 14,66 13,63

3. EEDJB 200 mg/kg bb No BB

(g) Kadar kolesterol awal (mg/dl) Kadar hiperkolesterol

setelah 14 hari (mg/dl)

Kadar kolesterol setelah perlakuan (mg/dl)

Hari ke-

7 14 21

1 156,0 103 255 140 133 124

2 170,1 104 242 143 141 120

3 166,8 122 260 185 169 138

4 160,2 131 242 187 168 155

5 158.5 118 232 158 150 139

Rata-rata SD

155,6 246,2 162,6 152,2 135,2

4. EEDJB 300 mg/kg bb No BB

(g) Kadar kolesterol awal (mg/dl) Kadar hiperkolesterol

setelah 14 hari (mg/dl)

Kadar kolesterol setelah perlakuan (mg/dl)

Hari ke-

7 14 21

1 160,5 128 263 165 149 130

2 156,3 120 260 154 136 130

3 154,3 128 255 168 154 132

4 165,0 121 240 167 155 134

5 171,2 130 223 158 141 128

Rata-rata SD

125,4 248,2 162,4 147 130,8

4,56 16,63 6,11 8,28 2,28

5. EEDJB 400 mg/kg bb No BB

(g) Kadar kolesterol awal (mg/dl) Kadar hiperkolesterol

setelah 14 hari (mg/dl)

Kadar kolesterol setelah perlakuan (mg/dl)

Hari ke-

7 14 21

1 153,5 120 261 156 149 124

2 160,0 110 250 160 136 115

3 156,1 122 255 160 154 127

4 160,1 120 232 155 147 131

5 157,4 132 236 158 144 130

Rata-rata SD

120,8 246,8 157,8 146 125,4

7,82 12,40 4,56 6,67 6,42

6. Simvastatin 0,9 mg/kg bb No BB

(g) Kadar kolesterol awal (mg/dl) Kadar hiperkolesterol

setelah 14 hari (mg/dl)

Kadar kolesterol setelah perlakuan (mg/dl)

Hari ke-

7 14 21

1 170,0 104 223 128 117 110

2 154,5 132 218 153 148 130

3 157,1 140 225 168 168 140

4 162,3 122 210 162 141 128

5 165,0 110 235 157 146 120

Rata-rata SD

222,2 153,6 144 125,6

14,93 9,20 11,37 18,26 11,26

Lampiran 15. Data pengukuran rata-rata kadar kolesterol tikus setelah perlakuan

N o

Perlakuan Kadar kolestero l awal (mg/dl)

Kadar hiperkolester ol setelah 14 hari (mg/dl)

Kadar Kolesterol Setelah Perlakuan (mg/dl)

7 14 21

1 Kontrol Na CMC 0,5%

128± 11,59

222,8± 12,64 201,8 ± 6,72

193± 8,49 185,8±7,01 2 EEDJB

100 mg/kg bb

112,2± 6,34

225,4± 10,50 170,2 ± 15,07 160,2±17,7 4 151,1±13,6 3 3 EEDJB20

0 mg/kg bb

115,6± 12,01

240,2± 13,20 162,6 ± 22,43 152,2± 16,05 135,2± 13,88 4 EEDJB30

0 mg/kg bb

125,4± 4,56

248,2± 16,63 162,4 ± 6,11

147± 8,28 130,8±2,28 5 EEDJB40

0 mg/kg bb

120,8± 7,82

246,8± 12,40 159,4 ± 4,56

146± 6,67 125,4± 6,42 6 Simvastati

n 0,9

mg/kg bb

121,6± 14,93

222,2± 9,20 153,6 ± 11,37

144± 18,26 128,6±11,3 9

Lampiran 16. Data Berat Badan Tikus 1. Setelah pemberian induksi hiperkolesterol

No Perlakuan Data berat tikus (g)

Hari ke-

1 2 3 4 5 6 7

1 Kontrol Na

CMC 0,5 % 152,0 152,0 153,1 153,4 154,1 154,5 154,5 2 EEDJB 100

mg/kg bb 151,4 151,8 152,0 152,0 154,3 153,8 154,8 3 EEDJB 200

mg/kg bb 150,0 150,6 151,3 153,0 153,0 154,1 155,0 4 EEDJB 300

mg/kg bb 155,1 155,5 155,8 155,8 160,1 158,7 158,8 5 EEDJB 400

mg/kg bb 150,6 150,6 151,3 151,6 152,0 152,0 152,8 6 Simvastatin

0,9 mg/kg bb 150,0 150,8 150,2 152.0 152,3 152,3 153,0

No Perlakuan Data berat tikus (g)

Hari ke-

8 9 10 11 12 13 14

1 Kontrol Na CMC 0,5 %

154,8 155,0 155,0 155,3 155,1 155,7 160,1 2 EEDJB 100

mg/kg bb

155,1 155,4 155,1 155,8 160,1 161,5 162,8 3 EEDJB 200

mg/kg bb

155,4 155,4 155.9 160,3 160,1 160,5 161,5 4 EEDKS 300

mg/kg bb

153,0 153,3 153,6 153,4 154,0 154,0 154,1 5 EEDJB 400

mg/kg bb

152,8 153,1 153,5 153,7 154,0 154,4 154,9 6 Simvastatin

0,9 mg/kg bb

Lampiran 16. (lanjutan)

2. Setelah pemberian suspensi ekstrak etanol daun jambu bol

No Perlakuan Data berat tikus (g)

Hari ke-

1 2 3 4 5 6 7

1 Kontrol Na CMC 0,5 %

160,1 160,4 160,4 160,8 161,1 161,3 161,5 2 EEDJB 100

mg/kg bb

162,8 163,1 163,7 164,5 164,8 165,1 165,5 3 EEDJB 200

mg/kg bb

161,5 160,9 160,9 160,5 159,6 159,8 160,8 4 EEDJB 300

mg/kg bb

154,9 155,2 155,8 156,0 156,8 156,8 157,8 5 EEDJB 400

mg/kg bb

154,9 155,1 155,1 155,5 155,8 156,3 156,3 6 Simvastatin

0,9 mg/kg bb

155,1 155,4 156,1 156,1 156,8 156,5 160,1

No Perlakuan Data berat tikus (g)

Hari ke-

8 9 10 11 12 13 14

1 Kontrol Na CMC 0,5 %

161,8 162,0 162,0 162,8 163,0 163,4 163,4 2 EEDJB 100

mg/kg bb

165,8 166,1 167,0 167.8 168,5 169,0 169,7 3 EEDJB 200

mg/kg bb

159,0 159,8 160,1 160,5 160,9 161,1 161,5 4 EEDJB 300

mg/kg bb

158,9 159,1 159,1 159,3 159,8 160,1 159,5 5 EEDJB 400

mg/kg bb

156,5 156,8 157,1 157,4 157,4 157,7 157,0 6 Simvastatin

0,9 mg/bb

Lampiran 16 (lanjutan)

No Perlakuan

Data berat tikus (g) Hari ke-

15 16 17 18 19 20 21

1 Kontrol Na CMC 0,5 %

163,8 164,5 164,5 164,8 165,2 165,2 165,8 2 EEDJB 100

mg/kg bb

170,0 170,4 170,8 171,4 171,9 171,8 172,0 3 EEDJB 200

mg/kg bb

161,7 161,7 162,5 162,1 162,8 163,2 163,,0 4 EEDJB 300

mg/kg bb

159,5 159,9 160,1 160,1 160,4 159,8 159,8 5 EEDJB 400

mg/kg bb

157,0 157,4 157,8 158,0 158,0 158,2 158,1 6 Simvastatin

0,9 mg/kg bb

Lampiran 17. Hasil uji analisis statistik kadar kolesterol tikus Sum of

Squares df

Mean

Square F Sig. kadar setelah 7 hari

perlakuan (mg/dL)

Between

Groups 7595.867 5 1519.173 8.644 .000 Within

Groups 4218.000 24 175.750 Total 11813.867 29

kadar setelah 14 hari perlakuan (mg/dL)

Between

Groups 9526.167 5 1905.233 11.238 .000 Within

Groups 4068.800 24 169.533 Total 13594.967 29

kadar setelah 21 hari perlakuan (mg/dL)

Between

Groups 13734.167 5 2746.833 27.143 .000 Within

Groups 2428.800 24 101.200 Total 16162.967 29

Lampiran 17. (Lanjutan)

kadar setelah 7 hari perlakuan (mg/dL) Tukey HSD

Kelompok Perlakuan N

Subset for alpha = 0.05

1 2

simvastatin 5 153.60

EEDJB 400 mg/kg bb 5 157.80

EEDJB 300 mg/kg bb 5 162.40

EEDJB 200 mg/kg bb 5 162.60

EEDJB 100 mg/kg bb 5 170.20

kontrol CMC 0,5% 5 201.80

Sig. .382 1.000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

kadar setelah 14 hari perlakuan (mg/dL)

Tukey HSD

Kelompok perlakuan N

Subset for alpha = 0.05

1 2

simvastatin 5 144.00

EEDJB 400 mg/kg bb 5 146.00

EEDJB 300 mg/kg bb 5 147.00

EEDJB 200 mg/kg bb 5 152.20

EEDJB 100 mg/kg bb 5 160.20

Kontrol CMC 0,5% 5 193.00

Sig. .375 1.000

Lampiran 17. (Lanjutan)

kadar setelah 21 hari perlakuan (mg/dL) Tukey HSD

Kelompok Perlakuan N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3

EEDJB 400 mg/kg bb 5 125.40

simvastatin 5 125.60

EEDJB 300 mg/kg bb 5 130.80

EEDJB 200 mg/kg bb 5 133.20 133.20

EEDJB 100 mg/kg bb 5 151.00

kontrol CMC O,5% 5 185.80

Sig. .820 .092 1.000

DAFTAR PUSTAKA

Anonim. (2012). Profil Lipid (Kadar lemak darah). Tanggal akses 22 desember

2015.

Anonim. (2014). Manfaat Jambu Bol Untuk Kesehatan.Tanggal akses 22 desember

Adam, J.M.F. (2009). Dislipidemia. Dalam Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam.

Edisi Kelima. Jilid III. Editor Aru Sudoyo, Bambang Setiyohadi, Idrus Alwi, Marcellus Simadibrata, Siti Setiati.Jakarta: Interna Publishing. Halaman 1984-1992.

Adib M. (2010). Memahami dan mencegah kolesterol. Yogyakarta: Kota Buku Indonesia.

Afifah, B. S., Elin, Y.S., Ririn, S., Redya, H., dan Suci, N. V. (2013). Efek Antikolesterol Ekstrak Etanol Daun Cerme (Phyllanthus acidus (L.) Skeels) Pada Tikus Wistar Betina. Kartika Jurnal Ilmiah Farmasi. 1(1):6 Ali, R.A., dan Hariadi. (2005). Hubungan Obesitas dengan Beberapa Faktor

Resiko Penyakit Jntung Koroner (PJK) di Laboratorium Klinik Prodia Makassar Tahun 2005. Diakses: 31 Agustus 2015. Jurnal koroner.pdf.

Anderson, P.O., James, E.K., dan William, G.T. (2002). Handbook of Clinical Drug Data. Edisi 10. Amerika Serikat: McGraw-Hill Companies, Inc. Halaman 375-376.

Arifin, H., Rasyid R., dan Lucida H. (2009). Pengembangan Tumbuhan Jambu Bol (Eugenia malaccensis L.). Hasil Penelitian Tahun I Hibah Unggulan Strategis Nasional Tahun Anggaran 2009. Padang : Universitas Andalas. Halaman 1-3

Botham KM, dan Mayes PA. (2006).Lipid yang Penting Secara fsiologis.In: Murray RK, Graner DK, Rodwell VW, editors. Biokimia Harper. 27th ed. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC. Halaman 128

Brunton, L.L., John, S.L., dan Keith, L.P. (2010). Goodman & Gilman Manual Farmakologi dan Terapi. Penerjemah Elin Yulinah Sukandar. Jakarta: EGC. Halaman 575.

Depkes RI. (1985). Cara Pembuatan Simplisia. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 10.

Depkes RI. (1995). Materia Medika Indonesia. Jilid VI. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 297-326, 333-340.

Depkes RI. (2000). Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 10-11.

Ditjen POM. (1995). Materia Medika Indonesia. Jilid VI. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 300-306, 321, 325, 333-337.

Ditjen POM. (2000). Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 17, 31-32.

Farnsworth, N.R. (1966). Biological and Phytochemical Screening of Plants. J. Pharm. Sci. 55(3): 264.

Galton, D. and Krone, W. ,( 1991). Hiperlipidaemia in Practice, Gower Medical Publishing, London. Halaman 25.

Harborne, J.B. (1987). Metode Fitokimia. Penerjemah: Kosasih Padmawinata dan Iwang Soediro. Edisi II. Bandung: Penerbit ITB. Halaman 152.

Idris, W. I., Usmar., dan Burhanudin, T. (2011). Uji Efek Hipokolesterolemik Sari Buah Terong Belanda (Cyphomandra betacea Sendt.) Pada Tikus Putih (Rattus norvegicus). Majalah Farmasi dan Farmakologi. 15(2) : 107-108 Isa, E.P. (2008). Ekstraksi dan identifikasi senyawa terpenoid pada tumbuhan

meniran (Phyllanthus niruri Linnn) dengan metode kromatografi lapis tipis. Skripsi Jurusan Pendidikan Kimia. Gorontalo: UNG. Halaman 9-10. Juhaeni, (2002). Pemanfaatan Herba Seledri (Apium graveolens L.) untuk

Menurunkan Kolesterol dan Lipid dalam Darah Tikus yang DiberiDiet Tinggi Kolesterol dana Lemak.Makara Sains. 6(2): 65-69.

Katzung, B. G., (1989). Farmakologi Dasar dan Klinik, Edisi 3, Penerbit BukuKedokteran EGC, Jakarta. Halaman 37-41.

Kelompok Kerja Ilmiah Phyto Medica. (1993). Penapisan Farmakologi, Pengujian Fitokimia dan Pengujian Klinik. Yayasan Pengembangan Obat Bahan Alam Phyto Medica. Jakarta. Halaman 37-39.

Ketaren, S. (1996). Pengantar Teknologi Minyak dan Lemak Pangan. Jakarta: Penerbit Universitas Indonesia. Halaman 9-10.

Liscum, L. (2002). Cholesterol Biosynthesis. Dalam buku Biochemistry of Lipids, Lipoproteins, and Membrans. Edisi ke-4. Editor: D.E Vance dan J.E Vance. Washington DC: Elsevier Science B.V. Halaman 411.

Moffat, A.C., David O.M., dan Brian, W. (2005). Clarke’s Analysis of Drug and Poisons. Edisi 3. London: Pharmaceutical Press. Electronic Version.

Morton, J.F. (1987). Malay Apple in Fruits of Warm Climates. Creative Resource System Inc. Winterville, N.C. pp. 378-381

Murray, R.K, D.K Granner, P.A. Mayes and V.W.Rodwell. (1970). Biokima Harper, edisi ke-24, Diterjemahkan oleh A.Hartono. Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta. 239-249

Murray, R.K., Daryl, K. G dan Victor, W.R. (2006). Biokimia Harper. Edisi ke 25. Jakarta: EGC. Halaman 239-240.

Pamungkas, R.A., Singgih, S.S.R., dan Samsu, W. (2013). Pengaruh Level Etanol dan Lama Maserasi Kuning Telur Puyuh Terhadap Kolesterol Total, HDL, dan LDL. Jurnal Ilmiah Peternakan. 1(3): 1136-1142.

Randox Laboratories. (2007). Lipid Profile. United Kingdom: Randox Laboratories Ltd. Halaman 6.

Rusilanti, Dr, M.Si. (2014). Kolesterol Tinggi Bukan untuk Ditakuti. Jakarta: FMedia. Halaman 36.

Satyanarayana, U. (2005). Biochemistry. Edisi kedua. New Delhi: Uppala Author-Publisher Interlinks. Halaman 319.

Supratman, U. (2008). Elusidasi Struktur Senyawa Organik. Bandung: Jurusan Kimia FMIPA, Universitas Padjajaran Bandung.

Suyatna, F., dan Tony, H. (2007). Farmakologi dan Terapi. Editor: Sulistia Ganiswara, Rianto Setiabudy Nafrialdi. Edisi Kelima. Jakarta : Penerbit Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Halaman 373.

Suyono, S. (1996). Hiperlipidemia. Dalam Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam. Jilid I. Edisi Ketiga. Editor: H.M. Sjaifoellah Noer. Jakarta: Fakultas Kedokteran UI. Halaman 718.

Terao J, Yoshichika K dan Kaeko M. (2008). Vegetable flavonoids and cardiovascular disease. Asia Pac J Clin Nutr. 17: 291-293.

Umarudin., R. Susanti., dan Ari, Y. (2012). Efektivitas Ekstrak Tanin Seledri Terhadap Profil Hiperkolesterolemi Lipid Tikus Putih. Unnes Journal of Life Science. 1 (2) : 79.

Verheij, E.W.M. dan Coronel, R.E. (1991). Buah-buahan yang dapat dimakan. Terjemahan dari Plant Resources of South-East Asia 2 : Edible Fruits and Nuts oleh Daniminihardja, S ; Sutarno, H; Utami, N.W. ; dan Hoesen, D.S.H. PT. Gramedia Pustaka Utama. Halaman 376-379.

Voight, R. (1995). Buku Pelajaran Teknologi Farmasi. Edisi ke-5. Yogyakarta: Media Press. Halaman 564, 568, 570, 574-577.

Yosmar, R., Helmi, A., dan Risha, M. (2014). Pengaruh Ekstrak Etanol Rambut Jagung (Zea mays L) Terhadap Kadar Kolesterol Mencit Putih Jantan Hiperkolesterol. Prosiding Seminar Nasional dan Workshop “Perkembangan Terkini Sains Farmasi dan Klinik IV”. Halaman 5-9.

Williams, H. (2005). Dislipidemia-Terapi Obat. Penerjemah Diana Lyrawati. (2008). Ringkasan. Halaman 1-6.

World Health Organization. (1998). Quality Control Methods For Medicinal Plant Material. Switzerland: WHO. Halaman 35.s

BAB III

METODE PENELITIAN

Metode penelitian digunakan dalam penelitian ini adalah metode eksperimental, meleputi pengumpulan tumbuhan dan pengolahan sampel, pembuatan simplisia, pembuatan ekstrak etanol daun jambu bol, penyiapan hewan percobaan, perlakuan pada hewan percobaan, pengujian efek antikolesterol ekstrak etanol daun jambu bol pada tikus putih jantan dengan penginduksi kuning telur, minyak jelantah dan lemak kambing. Data hasil penelitian dianalisis dengan menggunakan program SPSS (Statistical Product and Service Solution).

3.1Alat-alat yang digunakan

Alat-alat yang digunakan dalam penelitian adalah alat penampung, alat pengukur kadar kolesterol dan strip kolesterol (EasyTouch®GCU), alat-alat gelas laboratorium, aluminium foil, blender (Philip), cawan penguap, kertas saring, krus porselen, labu alas bulat, labu bersumbat, lemari pengering, mortir dan stamfer, neraca listrik (Mettler Toledo), neraca hewan (GW-1500), oral sonde, penangas air, pendingin, rotary evaporator (Heidolph WB 2000), spuit 1 ml, tabung penerima 5 ml berskala 0,05 ml, tabung penyambung.

3.2Bahan-bahan yang digunakan

Bahan yang digunakan adalah daun dari tumbuhan jambu bol (Syzygium malaccense L. Merr & Perry). Bahan-bahan kimia berkualitas pro analisis yaitu akuades, amil alkohol, asam asetat anhidrida, asam klorida pekat, asam nitrat pekat, asam sulfat pekat, benzen, besi (III) klorida, bismuth (III) nitrat,

isopropanol, kloroform, metanol, n-heksan, natrium hidroksida, raksa (II) klorida, serbuk magnesium (Mg), timbal (II) asetat, kristal kloral hidrat, toluen. Bahan-bahan berkualitas teknis, etanol 80% , kloroform, CMC Na (Natrium Carboxy Methyl Cellulose) dan air suling.

3.3 Penyiapan Bahan Tumbuhan 3.3.1 Pengumpulan bahan tumbuhan

Pengumpulan bahan tumbuhan dilakukan secara purposive yaitu tanpa membandingkan dengan bahan tumbuhan yang sama dari daerah lain. Bahan diambil dari pohon yang tumbuh di Emplasmen, PTPN 3 Kebun Pulau Mandi, Kec.Buntu Pane Kab.Asahan. Daun yang diambil adalah helai daun yang masih segar, berwarna hijau, dalam keadaan baik dengan usia dewasa, tidak terlalu tua dan tidak terlalu muda.

3.3.2 Identifikasi tumbuhan

Identifikasi tumbuhan dilakukan di Laboratorium Herbarium Bogoriense, Bidang Botani Pusat Penelitian Biologi-LIPI Bogor.

3.3.3 Pengolahan bahan tumbuhan

Bahan tumbuhan yang digunakan adalah daun dari tumbuhan jambu bol. Daun dibersihkan dari kotoran, dicuci, ditiriskan kemudian ditimbang sebagai berat basah. Selanjutnya dikeringkan dalam lemari pengering pada temperatur ± 40°C sampai kering (ditandai bila diremas rapuh), kemudian ditimbang sebagai berat kering. Simplisia yang telah kering diblender menjadi serbuk lalu disimpan dalam kantong plastik untuk mencegah pengaruh lembab dan pengotoran lain.

3.4 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Jambu Bol

Pembuatan ekstrak etanol daun jambu bol dilakukan dengan cara maserasi menggunakan etanol 80% (Depkes, RI., 1979).

Cara kerja :

Sebanyak 900 g serbuk ssimplisia daun jambu bol dimasukan ke dalam wadah berkaca berwarna gelap, kemudian dituangi dengan 8,5 L etanol 80%. Ditutup dan dibiarkan selama 5 hari terlindung dari cahaya sambil sering diaduk, diserkai dan diperas. Ampas dicuci dengan 2,5 L etanol 80%, dipindahkan ke dalam bejana tertentu, dibiarkan di tempat sejuk, terlindung dari cahaya selama 2 hari, selanjutnya dienap tuangkan. Maserat etanol yang diperoleh diuapkan denagn menggunakan rotary evaporator pada temperature ± 40oC sampai diperoleh ekstrak kental kemudian dikeringkan menggunakan freeze dryer.

3.5 Pemeriksaan karakteristik 3.5.1 Penetapan kadar air

Penetapan kadar air dilakukan dengan metode Azeotropi (destilasi toluen). Alat terdiri dari labu alas bulat 500 ml, pendingin, tabung penyambung, tabung penerima 5 ml berskala 0,05 ml, alat penampung dan pemanas listrik.

3.5.1.1Penjenuhan toluen

Sebanyak 200 ml toluen dan 2 ml air suling dimasukkan ke dalam labu alas bulat, dipasang alat penampung dan pendingin, kemudian didestilasi selama 2 jam. Destilasi dihentikan dan dibiarkan dingin selama 30 menit, kemudian volume air dalam tabung penerima dibaca dengan ketelitian 0,05 ml.

3.5.1.2Penetapan kadar air simplisia

ke dalam labu yang berisi toluen yang telah dijenuhkan, kemudian labu dipanaskan hati-hati selama 15 menit, setelah toluen mendidih, kecepatan tetesan diatur 2 tetes untuk tiap detik sampai sebagian besar air terdestilasi, kemudian kecepatan destilasi dinaikkan sampai 4 tetes tiap detik, setelah semua air terdestilasi, bagian dalam pendingin dibilas dengan toluen. Destilasi dilanjutkan selama 5 menit, kemudian tabung penerima dibiarkan mendingin pada suhu kamar,setelah air dan toluen memisah sempurna, volume air dibaca dengan ketelitian 0,05 ml. Selisih kedua volume air yang dibaca sesuai dengan kandungan air yang terdapat dalam bahan yang diperiksa. Kadar air dihitung dalam persen (WHO, 1998).

3.5.2 Penetapan kadar sari yang larut dalam air

Sebanyak 5 gram serbuk simplisia dimaserasi selama 24 jam dengan 100 ml air-kloroform (2,5 ml kloroform dalam air suling sampai 1 liter) dalam labu bersumbat, dikocok sesekali selama 6 jam pertama, kemudian dibiarkan selama 18 jam, kemudian disaring. Sejumlah 20 ml filtrat pertama diuapkan sampai kering dalam cawan penguap yang berdasar rata yang telah dipanaskan dan ditara. Sisa dipanaskan pada suhu 105ºC sampai bobot tetap. Kadar dalam persen sari yang larut dalam air dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes, RI., 1995).

3.5.3 Penetapan kadar sari yang larut dalam etanol

Sebanyak 5 gram serbuk simplisia dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml etanol 96% dalam labu bersumbat sambil dikocok sesekali selama 6 jam pertama, kemudian dibiarkan selama 18 jam,kemudian disaring cepat untuk menghindari penguapan etanol. Sejumlah 20 ml filtrat diuapkan sampai kering dalam cawan penguap yang berdasar rata yang telah dipanaskan dan ditara. Sisa dipanaskan

pada suhu 105 ºC sampai bobot tetap. Kadar dalam persen sari yang larut dalam etanol 96% dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes, RI., 1995). 3.5.4 Penetapan kadar abu total

Sebanyak 2 gram serbuk yang telah digerus dan ditimbang seksama dimasukkan dalam krus porselin yang telah dipijar dan ditara, kemudian diratakan. Krus dipijar perlahan-lahan sampai arang habis, pemijaran dilakukan pada suhu 600 ºC selama 3 jam kemudian didinginkan dan ditimbang sampai diperoleh bobot tetap. Kadar abu dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes, RI., 1995).

3.5.5 Penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam

Abu yang diperoleh dalam penetapan kadar abu total dididihkan dalam 25 ml asam klorida encer selama 5 menit, bagian yang tidak larut dalam asam dikumpulkan, disaring melalui kertas saring bebas abu, dicuci dengan air panas, lalu dipijar sampai bobot tetap, kemudian didinginkan dan ditimbang. Kadar abu yang tidak larut dalam asam dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes, RI., 1995).

3.6 Skrining fitokimia 3.6.1 Pemeriksaan alkaloida

Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 0,5 g, ditambahkan 1 ml asam klorida 2 N dan 9 ml air suling, dipanaskan diatas penangas air selama 2 menit, didinginkan dan disaring, filtrat dipakai untuk uji alkaloida. Diambil 3 tabung reaksi, lalu ke dalam masing-masing tabung reaksi dimasukkan 0,5 ml filtrat. Pada tabung I :ditambahkan 2 tetes pereaksi Mayer

Pada tabung II :ditambahkan 2 tetes pereaksi Dragendorff Pada tabung III :ditambahkan 2 tetes pereaksi Bourchardat

Alkaloid disebut positif jika terjadi endapan atau kekeruhan pada dua atau tiga dari percobaan di atas (Depkes, RI., 1995).

3.6.2 Pemeriksaan flavonoida

Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 10 g, ditambahkan 10 ml air panas, dididihkan selama 5 menit dan disaring dalam keadaan panas, ke dalam 5 ml filtrat ditambahkan 0,1 g serbuk magnesium dan 1 ml asam klorida pekat dan 2 ml amil alkohol, dikocok dan dibiarkan memisah. Flavonoid positif jika terjadi warna merah atau kuning atau jingga pada lapisan amil alkohol (Farnsworth, 1966). 3.6.3 Pemeriksaan glikosida

Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 3 g, lalu disari dengan 30 ml campuran dari 7 bagian etanol 96% dengan 3 bagian air suling (7:3) dan 10 ml asam klorida 2 N,kemudian direfluks selama 10 menit, didinginkan, lalu disaring. Diambil 20 ml filtrat ditambahkan 25 ml air suling dan 25 ml timbal (II) asetat 0,4 M dikocok, didiamkan 5 menit lalu disaring. Filtrat disari dengan 20 ml campuran isopropanol dan kloroform (2:3), perlakuan ini diulangi sebanyak 3 kali. Sari organik dikumpulkan dan ditambahkan Na2SO4 anhidrat, disaring, kemudian diuapkan pada temperatur tidak lebih dari 50ºC, sisanya dilarutkan dalam 2 ml metanol. Sari air digunakan untuk percobaan berikut, 0,1 larutan percobaan dimasukkan dalam tabung reaksi, kemudian diuapkan di atas penangas air. Pada sisa ditambahkan 2 ml air dan 5 tetes larutan pereaksi Molisch, lalu ditambahkan dengan perlahan-lahan 2 ml asam sulfat pekat melalui dinding tabung, terbentuk cincin ungu pada batas kedua cairan, menunjukkan adanya ikatan gula (glikon) atau glikosida (Depkes, RI., 1995).

Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 0,5 g dan dimasukkan ke dalam tabung reaksi, lalu ditambahkan 10 ml air panas, didinginkan kemudian dikocok kuat-kuat selama 10 detik. Jika terbentuk busa setinggi 1 sampai 10 cm yang stabil tidak kurang dari 10 menit dan tidak hilang dengan penambahan 1 tetes asam klorida 2 N menunjukkan adanya saponin (Depkes, RI., 1995).

3.6.5 Pemeriksaan tanin

Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 0,5 g, disari dengan 10 ml air suling lalu disaring, filtratnya diencerkan dengan air sampai tidak berwarna. Larutan diambil sebanyak 2 ml dan ditambahkan 1-2 tetes pereaksi besi (III) klorida 1%. Jika terjadi warna biru atau hijau kehitaman menunjukkan adanya tanin (Farnsworth, 1966).

3.6.6 Pemeriksaan steroida/triterpenoida

Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 1 g serbuk simplisia dimaserasi dengan 20 ml n-heksan selama 2 jam, lalu disaring. Filtrat diuapkan dalam cawan penguap. Pada sisa ditambahkan beberapa tetes pereaksi Liebermann-Burchard. Timbulnya warna biru atau biru hijau menunjukkan adanya steroida, sedangkan warna merah, merah muda atau ungu meunjukkan adanya triterpenoida (Harborne, 1987).

3.7 Penyiapan Bahan

Penyiapan bahan – bahan meliputi pembuatan suspensi CMC Na 0,5% sebagai kontrol, pembuatan suspensi simvastatin sebagai pembanding dan pembuatan suspensi ekstrak etanol daun jambu bol dosis 100, 200, 300 dan 400 mg/kg bb sebagai bahan uji.

Sebanyak 0,5g CMC Na ditaburkan kedalam lumpang berisi air suling panas sebanyak 20 ml, ditutup dan dibiarkan selama 30 menit hingga diperoleh massa yang transparan, digerus lalu diencerkan dengan air suling hingga 100 ml (Anief, 1995).

3.7.2 Pembuatan suspensi ekstrak etanol daun jambu bol

Dosis ektrak etanol daun jambu bol ditentukan berdasarkan orientasi pada hewan percobaan, yaitu dosis 100, 200, 300 dan 400 mg/kg bb. Berdasarkan hasil orientasi, dipilih variansi dosis yang akan digunakan sebanyak empat dosis yaitu dosis 100, 200, 300 dan 400mg/kg bb.

Cara kerja :

Ekstrak etanol daun jambu bol masing-masing sebanyak 100, 200, 300, dan 400 mg dimasukkan ke dalam lumpang yang berisi sedikit suspensi CMC Na 0,5% digerus homogen lalu dicukupkan dengan suspensi CMC Na 0,5% hingga 10 ml.

3.7.3 Pembuatan suspensi simvastatin

Sebanyak 11 mg simvastatin digerus dalam lumpang, lalu tambahkan suspensi CMC Na 0,5 % sedikit demi sedikit sambil terus digerus hingga homogen lalu dicukupkan dengan suspensi CMC Na 0,5% hingga 10 ml.

3.8 Hewan Percobaan

Hewan percobaan yang digunakan dalam penelitian adalah tikus putih jantan dengan berat badan 150-200 g. Sebelum perlakuan, hewan percobaan dikondisikan terlebih dahulu selama 2 minggu dalam kandang yang baik untuk menyesuaikan lingkungannya dan diberikan pakan standar pelet.

Hewan yang digunakan pada penelitian ini adalah tikus putih jantan yang sehat dan dewasa sebanyak 40 ekor yang terlebih dahulu diadaptasikan dengan lingkungannya. Tikus diberi pakan standar, minum yang cukup dan kadang dibersihkan 3 kali dalam seminggu selama 14 hari, selanjutnya diukur kadar kolesterol awal dan dibuat hiperkolesterolemia dengan cara memberi lemak kambing, kuning telur bebek dan minyak jelantah dosis 1% bb selama 14 hari berturut-turut secara oral lalu diukur kadar kolesterolnya.

3.9.2 Pembuatan Pakan tinggi kolesterol

Pakan tinggi kolesterol yang digunakan adalah kuning telur bebek, ditambah dengan lemak kambing dan minyak jelantah. Kuning telur sebanyak 30 ml dicampur ke dalam minyak jelantah sebanyak 50 ml lalu diaduk kemudian ditambahkan 20 ml lemak kambing yang dipanaskan hingga semua lemaknya mencair. Diaduk hingga merata lalu diberikan secepatnya supaya campuran tersebut tidak menggumpal. Pakan tinggi kolesterol dibuat setiap hari (KKI, 1993).

3.9.3 Pengujian efek penurunan kadar kolesterol

Pengujian efek penururunan kadar kolesterol terhadap tikus yang dibuat hiperkolesterolemia diberi bahan obat ekstrak etanol daun jambu bol dosis 100, 200, 300 dan 400 mg/kg bb.

3.9.4 Pemberian bahan obat terhadap tikus yang hiperkolesterolemia

Tikus dibagi menjadi 6 kelompok dan setiap kelompok terdiri dari 5 hewan uji yaitu kelompok 1 (control) diberi CMC Na 0,5%. Kelompok II, III, IV, V dan VI (bahan uji) diberi ekstrak etanol daun jambu bol dosis 100, 200, 300 dan 400 mh/kg bb. Lalu setiap kelompok tikus ditentukan kadar kolesterol darahnya pada hari ke-7, ke-14, dan ke-21.

Tikus dipuasakan terlebih dahulu selama 18 jam. Ekornya dibersihkan dengan etanol 70%, dipotong dengan menggunakan gunting bedah. Darah yang keluar disentuhkan pada cholesterol strip test yang telah terpasang pada

cholesterol meter.Angka yang tampil pada layar alat dicatat sebagai kadar kolesterol darah (mg/dl).

3.9 Analisis Data

Data hasil pengamatan dianalisis secara statistik dengan metode ANAVA (analisis variansi), dilanjutkan dengan uji Duncan untuk melihat perbedaan nyata antar kelompok perlakuan. Analisis statistik ini menggunakan program SPSS

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1Hasil Identifikasi Sampel

Hasil identifikasi tumbuhan dilakukan di Pusat Penelitian Biologi, Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI) Bogor menunjukkan bahwa tumbuhan yang digunakan adalah daun jambu bol (Syzygiun malaccense L. Merr & Perry) suku

Myrtaceae. Hasil identifikasi dapat dilihat pada Lampiran 1 halaman 47.

4.2Hasil Ekstraksi Serbuk Daun Jambu Bol

Pembuatan ekstrak dilakukan dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol 96%. Hasil maserasi dari 900 g serbuk simplisia diperoleh ekstrak kental 113,7 g dan setelah di freeze dryer diperoleh sebanyak 109,5 g.

4.3 Hasil Karakterisasi Simplisia Daun Jambu Bol

Hasil karakterisasi simplisia dan ekstrakdapat dilihat pada Tabel 4.1 dan perhitungan dapat dilihat pada Lampiran 10 halaman 57– 62.

Tabel 4.1 Hasil karakterisasi simplisia

Parameter Hasil Pemeriksaan (%)

Simplisia Ekstrak

Kadar air 7,93 3,98

Kadar sari larut air 13,28 36,41

Kadar sari larut etanol 15,61 53

Kadar abu total 10 2,32

Kadar abu tidak larut asam 0,5 0,1

Berdasarkan tabel 4.1 menunjukkan kadar air simplisia daun jambu bol sebesar 7,93% memenuhi persyaratan umum yaitu di bawah 10% dan kadar air

ekstrak jambu bol 3,98% . Kadar air yanglebih besar dari10% dapat menjadi mediapertumbuhan kapang dan jasad renik lainnya (Depkes, RI., 1985).Penetapan kadar air dilakukan untuk memberikan batasan minimal atau rentang tentang besarnya kandungan airdalam sampel karena tingginya kandungan air menyebabkan ketidakstabilan sediaan obat, bakteri dan jamur cepat tumbuh dan bahan aktif yang terkandung didalamnya dapat terurai.

Hasil penetapan kadar sari larut air simplisia dan ekstrak daun jambu boladalah 13,28 dan 36,41,kadar sari larut etanol simplisia serta ekstrak daun jambu bol adalah 15,61 dan 53. Penetapan kadari sari yang larut dalam air menyatakan jumlah zat yang tersari larut dalam air yaitu glikosida, gula, gom, protein, enzim, zat warna dan asam organik. Penetapan kadar sari yang larut dalam etanol menyatakan jumlah zat yang tersari dalam pelarut etanol seperti glikosida, antrakinon, steroid, flavonoid, klorofil, saponin, tanin dan dalam jumlah sedikit yang larut yaitu lemak (Depkes, RI., 1995).

Penetapan kadar abu total dan kadar abu tidak larut asam bertujuanuntuk memberikan jaminan bahwa simplisia tidak mengandung logam berat tertentu melebihi nilai yang ditetapkan karena dapat berbahaya (toksik) bagi kesehatan dan mengetahui kandungan mineral internal yang terdapat di dalam simplisia yang diteliti serta senyawa organik yang tersisa selama pembakaran.Abu total terbagi dua yang pertama abu fisiologis adalah abu yang berasal dari jaringan tumbuhan itu sendiri dan abu non fisiologis adalah sisa setelah pembakaran yang berasal dari bahan-bahan dari luar yang terdapat pada permukaan simplisia. Kadar abu tidak larut asam untuk menentukan jumlah silika, khususnya pasir yang ada pada simplisia dengan cara melarutkan abu total dalam asam klorida (WHO,

10%dan 2,31% serta hasil penetapan kadar abu tidak larut asam simplisia dan ektrak daun jambu bol sebesar 0,5% dan 0,1%.

4.4Hasil SkriningFitokimiaSimplisia danEkstrak Etanol Daun Jambu Bol Skrining fitokimia terhadapsimplisiadan ekstrak etanoldaun jambu bol dilakukan untuk mendapatkan informasi golongan senyawa metabolit sekunder yang terdapat di dalam simplisia dan ekstrak etanol daun jambu bol.Skrining fitokimia yang dilakukan terhadap simplisia daun jambu bolmeliputi pemeriksaan alkaloid, flavonoid, saponin, tanin, steroid/triterpenoid dan glikosida. Hasil skrining fitokimiasimplisia dan ekstrak etanol daun jambu boldapat dilihat pada Tabel 4.2 berikut.

Tabel 4.2 Hasil skrining fitokimia ekstrak etanol daun jambu bol

No Metabolit sekunder Simplisia Ekstrak

1 Alkaloid + +

2 Flavonoid + +

3 Saponin + +

4 Tanin + +

5 Steroid/triterpenoid + +

6 Glikosida - -

Keterangan: (+) = mengandung golongan senyawa metabolit sekunder (-) = tidak mengandung golongan senyawa metabolit sekunder Hasil skrining menunjukkan bahwa simplisia dan ekstrak etanol daun jambu bol mengandung senyawa golongan alkaloid, flavonoid, saponin, tanindan steroid/triterpenoid.

4.5 Uji Aktivitas Antikolesterol Ekstrak Etanol Daun Jambu Bol (EEDJB) Pada penelitian ini dosis ekstrak etanol daun jambu bol yaitu 100,200,300,400 mg/kg bb, serta sebagai pembanding simvastatin dosis 0,9 mg/kg bb. Tahap awal yang dilakukan ialah mengukur kadar kolesterol awal tikus,

kemudian tikusdibuat menjadi hiperkolesterolemia dengan cara diinduksi kuning telur, minyak jelantah dan lemak kambing selama 14 hari, selanjutnya diukur kadar hiperkolesterolemia. Pengujianaktivitas antikolesterol dilakukan selama 21 hari untuk setiap kelompok uji.Diukur kadar kolesterolnya pada hari ke 7, 14, dan 21. Sebelum diukur kadar kolesterolnya tikus dipuasakan selam 18 jam.

4.5.1 Pengukuran kadar kolesterol awal dan setelah hiperkolesterolemia Kolesterol total darah adalah jumlah kolesterol didalam darah dengan kadar kolesterol darah yang baik adalah <200 mg/dL (Idris, dkk, 2011). Kadar kolesterol total serum darah tikus putih jantan setelah diinduksi pakan tinggi lemak dapat dilihat bahwa semua tikus pada semua kelompok mengalami peningkatan kadar kolesterol.Kadar kolesterol pada semua hewan percobaan setelah induksi pakan tinggi lemak memenuhi persyaratan kadar kolesterol hiperkolesterolemia.Hal ini dikarenakan semua hewan percobaan diberi perlakuan yang sama yaitu diberikan induksi pakan tinggi lemak

Berdasarkantabel 4.3 dapat dilihat rata-rata kadar awal kolesterol total tikus sebelum diinduksi hiperkolesterol dansetelah mengalami hiperkolesterolemia pada hari ke 14. Data selengkapnya dapat dilihat pada Lampiran 15 halaman 69.

Tabel 4.3 Hasil pengukuran rata-rata kadar kolesterol awal dan setelah hiperkolesterolemia

No Kelompok

Rata-rata kadar awal kolesterol total ± SD

total setelah hiperkolesterolemia ±

SD 1 Kontrol Na CMC 0,5% 128±11,59 222,8±12,64 2 EEDJB 100 mg/kg bb 112,2±6,34 225,4±10,50 3 EEDJB200 mg/kg bb 115,6±12,01 240,2±13,20

4 EEDJB300 mg/kg bb 125,4±4,56 248,2±16,63

5 EEDJB400 mg/kg bb 120,8±7,82 246,8±12,40

Gambar 4.1 Grafik kadar kolesterol awal dan kadar hiperkolesterol

Berdasarkan Gambar 4.1 dapat dilihat bahwa terjadi perbedaan yang nyata kadar kolesterol total awal tikus dengan tikus yang telah hiperkolesterol. Pada awal perlakuan semua kelompok belum mendapat perlakuan diet tinggi lemak. Terjadi peningkatan yang signifikan terhadap kadar kolesterol total tikus setelah diberikan induksi kuning telur, minyak jelantah dan lemak kambing selam 14 hari yaitu ≥200 mg/dL. Pemilihan kuning telur bebek sebagai penginduksi karena kandungan gizi telur antara lain : air 73,7 %, protein 13,3 %, lemak 14,5%, karbohidrat 0,7% dan lemak pada putih telur hampir tidak ada. Hampir semua lemak di dalam telur terdapat pada kuning telur, yaitu mencapai 32%, sedangkan pada putih telur kandungan lemaknya sangat sedikit, maka pengamatan lemak dan kolesterol lebih efektif dilakukan pada kuning telur (Toha, 2014).Lemak kambing memiliki kadar kolesterol 130 mg per 100 gram (Rusilanti, 2014).

Induksi pakan tinggi lemak juga dilakukandengan pemberian minyak jelantah. Minyak jelantah merupakan minyak yang telah dipergunakan berkali-kali dengan suhu pemanasan yang tinggi. Pemanasan minyak di atas suhu 1000C

128.4 112.2

155.6

125.4 120.8 121.6 222.8 225.4

246.2 248.2 246.8 222.2 0 50 100 150 200 250 300 k ad ar k ol es te rol mg/ d l Kelompok perlakuan

kadar kolesterol awal

menyebabkan asam lemak tidak jenuh teroksidasi menjadi asam lemak jenuh. Proses penggorengan pada suhu tinggi akan mengakibatkan kerusakan minyak goreng, hal itu akan merusak ikatan rangkap pada asam lemak tidak jenuh menjadi asam lemak jenuh dan asam lemak cis menjadi asam lemak trans. Hal tersebut berisiko membuat kolesterol darah semakin meningkat(Ketaren, 1996) .

Berdasarkan hasil tabel 4.3 dapat dilihat bahwa diperoleh kadar kolsterol tikus yang cukup beragam tiap kelompok dengan standar deviasi yangberagam pula. Hal ini kemungkinan disebabkan perbedaan kondisi fisik dan fisiologis tiap individu tikus selama penelitian. Penurunan kadar kolesterol tiap perlakuan diamati langsung tiap minggu dan penurunan kadar kolesterol diamati dengan perbandingan terhadap kontrol pembanding yaitu simvastatin.

Tikus yang telah hiperkolesterolemia selanjutnya dibagi menjadi 6kelompok dan tiap kelompok terdiri dari 5 ekor tikus yaitu :

Kelompok I : Tikus diberikan suspensi 0,5% Na CMC dosis 1% bb Kelompok II : Tikus diberikan suspensi EEDJB dosis 100 mg/kg bb Kelompok III : Tikus diberikan suspensi EEDJB dosis 200 mg/kg bb Kelompok IV : Tikus diberikan suspensi EEDJB dosis 300 mg/kg bb Kelompok V : Tikus diberikan suspensi EEDJB dosis 400 mg/kg bb Kelompok VI :Tikus diberikan suspensi simvastatin dosis 0,9 mg/kg bb

Pemberian suspensi dilakukan selama 21 hari secara oral, kemudian dicek penurunan kadar kolesterol total menggunakan alat pengukur kadar kolesterol (EasyTouch®GCU) pada hari ke-7, 14 dan 21. Data pengukuran selengkapnya dapat dilihat pada Lampiran 14-15 halaman 67-70.

4.5.2 Pengukuran kadar kolesterol setelah 7 hari perlakuan

Hasil pengukuran kadar kolesterol setelah 7 hari perlakuan dapat dilihat pada Tabel 4.4.

Tabel 4.4 Data hasil uji analisis statistik ANOVA setelah 7 hari perlakuan Sum of Squares df Mean Square F Sig. Between

Groups 7595.867 5 1519.173 8.644 .000

Within Groups 4218.000 24 175.750 Total 11813.867 29

Uji analisis statistik ANOVA pada Tabel 4.4 menunjukkan bahwa nilai signifikan (P value) adalah 0.00 yang artinyanilai P value < 0.05, maka dapat disimpulkanterdapat perbedaan yang signifikan terhadap penurunan kadar kolesterol darah setelah 7 hari perlakuan.

Hasil analisis statistik Tukey terhadap kadar kolesterol total tikus setelah 7 hari perlakuan dapat dilihat Tabel 4.5.

Tabel 4.5 Data hasil uji Tukey setelah 7 hari perlakuan

Kelompok Perlakuan N

Subset for alpha = 0.05

1 2

Simvastatin _{5 153.60}

EEDJB 400 mg/kg bb _{5 157.80}

EEDJB 300 mg/kg bb _{5 162.40}

EEDJB 200 mg/kg bb _{5 162.60}

EEDJB 100 mg/kg bb 5 170.20

Kontrol CMC 0,5% _{5 201.80}

Sig. _{.382 1.000}

Berdasarkan Tabel 4.5dilakukan uji statistik secara one way ANOVA dilanjutkan dengan Post HockTukey HSD didapatkan bahwa EEDJB dosis 100, 200, 300 dan 400 mg/kg bb dan simvastatin pada hari ke 7 perlakuan terdapat

pada kolom yang sama. Hal ini berarti secara statistik aktivitas penurunan kolesterol dari EEDJB dengan dosis 100, 200, 300, 400 mg/kg bb dan simvastatin tidak memberikan perbedaan yang signifikan (P > 0,05) danEEDJBdosis 100,200,300,400 mg/kg bbdan simvastatin lebih baik dalam menurunkan kadar kolesterol dibandingkan kelompok kontrol negatif yang terdapat pada kolom yang berbeda.

4.5.3 Pengukuran kadar kolesterol setelah 14 hari perlakuan

Pengukuran kadar kolesterol setelah 14 hari perlakuan dapat dilihat pada Tabel 4.6.

Tabel 4.6 Data hasil uji analisis statistik ANOVA setelah 14 hari perlakuan Sum of Squares df Mean Square F Sig. Between Groups

8596.267 5 1905.233 11.238 .000 Within Groups

3965.600 24 169.533

Total _{12561.867 29}

Uji analisis statistik ANOVA pada Tabel 4.6 menunjukkan bahwa nilai signifikan (P value) adalah 0.00 yang artinyanilai P value < 0.05, maka dapat disimpulkan terdapat perbedaan yang signifikan terhadap penurunan kadar kolesterol darah setelah 14 hari perlakuan.

Berdasarkan Tabel 4.7dilakukan uji statistik secara one way ANOVA dilanjutkan dengan Post HockTukey HSD didapatkan bahwa EEDJB dosis 100, 200, 300 dan 400 mg/kg bb dan simvastatin pada hari ke 14 perlakuan terdapat pada kolom yang sama. Hal ini berarti secara statistikaktivitas penurunan kolesterol dari EEDJB dengan dosis 100, 200, 300, 400 mg/kg bb dan simvastatin

hari ke 7 perlakuan di mana pada hari ke 14 perlakuanEEDJB dosis 100,200,300,400 mg/kg bbdan simvastatin juga lebih baik dalam menurunkan kadar kolesterol dibandingkan kelompok kontrol negatif CMC 0,5 % yang terdapat pada kolom yang berbeda.

Hasil analisis statistik Tukey terhadap kadar kolesterol total tikus setelah 14 hari perlakuan dapat dilihat Tabel 4.7.

Tabel 4.7 Data hasil uji Tukey setelah 14 hari perlakuan

4.5.4 Pengukuran kadar kolesterol setelah 21 hari perlakuan

Pengukuran kadar kolesterol setelah 21 hari perlakuan dapat dilihat pada Tabel 4.8.

Tabel 4.8 Data hasil uji analisis statistik ANOVA setelah 21 hari perlakuan Sum of

Squares df

Mean

Square F Sig.

Between Groups 13575.500 5 2715.100 27.097 .000 Within Groups 2404.800 24 100.200

Total 15980.300 29

Uji analisis statistik ANOVA pada Tabel 4.8 menunjukkan bahwa nilaisignifikan (P value) adalah 0.00 yang artinyanilai P value < 0.05, maka dapat

Kelompok perlakuan N

Subset for alpha = 0.05

1 2

Simvastatin _{5 144.00}

EEDJB 400 mg/kg bb _{5 146.00}

EEDJB 300 mg/kg bb _{5 147.00}

EEDJB 200 mg/kg bb _{5 152.20}

EEDJB 100 mg/kg bb _{5 160.20}

Kontrol CMC 0,5% _{5 193.00}

disimpulkan terdapat perbedaan yang signifikan terhadap penurunan kadar kolesterol darah setelah 21 hari perlakuan.

Berdasarkan hasil analisis statistik Tukey terhadap kadar kolesterol total tikus setelah 21 hari perlakuan dapat dilihat Tabel 4.9.

Tabel 4.9 Data hasil uji Tukey setelah 21 hari perlakuan Kelompok Perlakuan N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3

EEDJB 400 mg/kg bb 5 125.40

Simvastatin 5 125.60

EEDJB 300 mg/kg bb 5 130.80

EEDJB 200 mg/kg bb 5 135.20 135.20

EEDJB 100 mg/kg bb 5 151.00

Kontrol CMC 0,5% 5 185.80

Sig. .638 .165 1.000

Berdasarkan Tabel 4.9dilakukan uji statistik secara one way ANOVA dilanjutkan dengan Post HockTukey HSD didapatkan bahwa EEDJB dosis 200, 300 dan 400 mg/kg bb dan simvastatin pada hari ke 21 perlakuan terdapat pada kolom yang sama. Hal ini berarti secara statistic aktivitas penurunan kolesterol dari EEDJB dengan dosis 200, 300, 400 mg/kg bb dan simvastatin tidak memberikan perbedaan yang signifikan (P>0,05). Pada dosis 100 mg/kg bb yang terdapat pada kolom berbeda menunjukan penurunan kolesterol juga tetapi tidak lebih dari dosis yang lainsehingga dapat disimpulkan bhawa EEDJB dosis 200,300,400 mg/kg bbdan simvastatin lebih baik dalam menurunkan kadar kolesterol dibandingkan dengan dosis 100 mg/kg bb dan kelompok kontrol negatif. Dan dalampenurunan kolesterol yang paling signifikan adalah pada EEDJB dosis 400 mg/kg bb penurunan kolesterol yang lebih baik dibanding

Hasil analisa menunjukan bahwa faktor perlakuan dosis memberikan pengaruh yang signifikan (p<0,05) terhadap kadar kolesterol total darah tikus putih jantan. Faktor waktu pengukuran (lamanya pemberian sediaan) juga memperlihatkan hasil yang signifikan (p< 0,05) terhadap kadar kolesterol total darah tikus putih jantan.

Grafik perbedaan penurunan kadar kolesterol tikusmulai dari hari ke-7 setelah pemberian suspensi hingga hari ke-21 setelah pemberian dapat dilihat pada gambar 4.2.

Gambar 4.2 Grafik perbedaan penurunan kadar kolesterol tikus

Berdasarkan Gambar 4.2 dapat dilihat perubahan penurunan kadar kolesterol mulai dari hari ke-7 setelah pemberian suspensi hingga hari ke-21 setelah pemberian. Data pengukuran kadar kolesterol dapat dilihat pada Lampiran 14halaman 67-68. EEDJB dosis 100 mg/kg bb,200 mg/kg bb, 300 mg/kg bb, dan 400 mg/kg bb dan simvastatin dosis 0,9 mg/kg bb dibandingkan dengan pemberian suspensi Na CMC 0,5% selama 21 hari menunjukkan perbedaan,

201.8

170.2

162.6 _{158 157.8 153.6} 193 160.2 152.2 ₁₄₁ 146 144 185.8 151.1 135.2

128 125.4 125.6

0 50 100 150 200 250 k ad ar k ol es te rol mg/ d l Kelompok perlakuan hari_7 hari_14 hari_21

berarti EEDJB mempunyai aktivitas menurunkan kolesterol total secara nyata.Hal ini dikarenakan EEDJBmengandung senyawa metabolit sekunder golongan alkaloid, flavonoid, terpenoid/steroid, tanin dan saponin (Arifin, dkk., 2009).

Golongan senyawa flavonoid, saponin dan tanin yang terdapat dalam daun jambu boldapat menurunkan atau mengurangi kadar kolesterol. Flavonoid mengurangi sintesis kolesterol dengan cara menghambat aktivitas enzim Acyl-CoA Cholesterol Acyl Transferase (ACAT) pada sel HepG2 yang berperan dalam penurunan esterifikasi kolesterol pada usus dan hati serta menghambat aktivitas enzim 3-hidroksi-3-metil-glutaril-CoA yang menyebabkan penghambatan sintesis kolesterol. Saponin dapat berikatan dengan asam empedu dan kolesterol (dari makanan) membentuk misel yang juga tidak dapat diserap oleh usus sedangkan tanin di dalam tubuh akan berikatan dengan protein tubuh dan akan melapisi dinding usus sehingga penyerapan lemak terhambat (Metwally, 2009 dan Terao, 2008).

Pada penelitian ini digunakan simvastatin sebagai pembanding. Dosis oral efektif simvastatin pada manusia adalah 5-40 mg perhari untuk satu kali pemakaian. Dosis simvastatin yang digunakan dalam penelitian ini adalah 10 mg sehingga berat serbuk simvastatin yangditimbang dandigunakan untuk tikus yaitu 11,44 mg/kg bb, dapat dilihat pada Lampiran 12, halaman 64. Simvastatin merupakan senyawa ester-naftyl dari asam butirat yang mempunyai mekanisme kerja menghambat HMG-CoAreduktase yang mempunyai fungsi sebagai katalis dalam pembentukan kolesterol. HMG-CoA reduktase bertanggung jawab terhadap penurunan sintesis kolesterol.

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan

Berdasarkan penelitian yang dilakukan dapat disimpulkan bahwa :

a. Hasil skrining fitokimia menunjukkan bahwa simplisia daun jambu bol mengandung senyawa golongan alkaloid, flavonoid, saponin, tanin dan steroid/triterpenoid dan hasil karakterisasi simplisia diperoleh kadar air sebesar 7,93%, kadar sari larut air 13,28%, kadar sari larut etanol 15,61% , kadar abu total 10% dan kadar abu tidak larut asam 0,5%.

b. Ekstrak etanol daun jambu bol (EEDJB) mempunyai efek menurunkan kadar kolesterol darah tikus yang mengalami hiperkolesterolemia yaitu pada dosis 100, 200, 300 dan 400 mg/kg bb dan dosis ekstrak etanol daun jambu bol (EEDJB) yang sudah menunjukan efektif sebagai antikolesterol yaitu pada dosis200, 300, dan 400 mg/kg bb.

c. Ekstrak etanol daun jambu bolmenunjukkan efek penurunan kadar kolesterol yang hampir sama dengan simvastatin.

5.2 Saran

− Disarankan untuk penelitian selanjutnya mengukur trigliserida, LDL serta kadar HDL pada tikus hiperlipidemia.

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Uraian Tumbuhan

Uraian tumbuhan meliputi sejarah tumbuhan, sistematika tumbuhan, nama daerah, morfologi tumbuhan, dan manfaat tumbuhan.

2.1.1 Sejarah Tumbuhan

Jambu bol (Syzygium malaccense (L.) Merr & Perry) sudah dikenal luas di dunia dengan nama “Maly Rose” atau “Malay Apple”. Jambu bol termasuk family Myrtaceace dan genus Syzygium. Jambu bol diperkirakan berasal dari Malaysia, umumnya dibudidayakan mulai dari Jawa, Filipina, Vietnam dan juga Bangladesh dan India Selatan ( Morton, 1987).

2.1.2 Sistematika Tumbuhan

Sistematika dari tumbuhan pepaya adalah sebagai berikut Klasifikasi jambu bol adalah sebagai berikut:

Kingdom : Plantae

Divisi : Spermatophyta Sub divisi : Angiospermae Kelas : Dicotyledoneae Bangsa : Myrtales Suku : Myrtaceae Marga : Syzygium

2.1.3 Nama Daerah

Nama daerah jambu bol adalah jambu ripu (Aceh), dharsana (Madura), jambu bol (sunda, batak, lampung), Myambu bol (Bali), jambu jambak (minang kabau), jambu boa (Jambi) dan maufa (Nias) (Arifin, dkk., 2009).

2.1.4 Morfologi Tumbuhan

Jambu bol merupakan pohon yang tingginya 5-20 m, diameter 20-45 cm, kanopi berbentuk bulat telur melebar. Daun berbentuk lonjong menjorong, agak tebal, berwarna merah ketika flush. Perbungaan pada bagian ranting yang tidak berdaun, pendek dan menggerombol. Daun mahkota 4 helai, berbentuk lonjong sampai bundar telur, panjang 2 cm berwarna merah gelap. Buah merupakan buah buni, berbentuk menjorong, berdiameter 5-8 cm, daging buah berwarna putih. Tiap buah hanya mempunyai satu biji (Verheij dan coronel, 1991).

2.1.5 Manfaat Tumbuhan

Jambu bol banyak manfaat bagi kesehatan tubuh. Hal ini disebabkan karena kandungan gizi yang terdapat di dalamnya. Jambu bol dipercaya dapat mengatasi sembelit, diabetes, sakit kepala, batuk dan radang selaput lender pada saluran napas. Sedangkan biji, kulit kayu dan daunnya memiliki sifat antibiotik dan memiliki efek terhadap tekana darah dan pernapasan. Pada akar tanaman jambu bol memiliki manfaat untuk mengobati gatal-gatal (Anonim, 2014).

2.2 Ekstraksi

Ekstraksi adalah kegiatan penarikan kandungan kimia yang dapat larut

sehingga terpisah dari bahan yang tidak dapat larut dengan pelarut cair (Ditjen POM, 2000).

Hasil dari ekstraksi disebut dengan ekstrak yaitu sediaan kental yang diperoleh dengan mengekstraksi zat aktif dari simplisia nabati atau simplisia hewani menggunakan pelarut yang sesuai, kemudian semua atau hampir semua pelarut diuapkan dan massa atau serbuk yang tersisa diperlakukan sedemikian sehingga memenuhi baku yang telah ditetapkan (Ditjen POM , 1995).

Berdasarkan sifatnya ekstrak dibagi menjadi: a. Ekstrak encer (extractum tenue)

Ekstrak encer merupakan sediaan yang memiliki konsisten madu, dapat dituang, tetapi pada saat ini sudah tidak dipakai lagi (Voight, 1995).

b. Ekstrak kental (extractum spisscum)

Ekstrak kental merupakan sediaan yang liat dalam keadaan dingin dan tidak dapat dituang serta kandungan airnya berjumlah sampai 30% (Voight, 1995).

c. Ekstrak kering (extractum siccum)

Ekstrak kering merupakan sediaaan berbentuk serbuk yang dibuat dari ekstrak tumbuhan yang diperoleh dari penguapan bahan pelarut dan pengeringan (Voight, 1995).

d. Ekstrak cair (extractum fluidum)

Ekstrak cair merupakan cairan yang mengandung simplisia nabati dalam etanol sebagai bahan pelarut dan pengawet (Ditjen POM , 1995).

Ekstraksi dengan menggunakan pelarut terdiri dari 2 cara, yaitu: 1. Cara dingin

Ekstraksi menggunakan pelarut dengan cara dingin terdiri dari: a. Maserasi

dan ditutup rapat. Simpan ditempat terlindung dari cahaya langsung selama 5 hari sambil sering dikocok. Kemudian disaring, diperas dan ampasnya dicuci dengan cairan penyari. Hasil ekstraksi disimpan ditempat sejuk selama beberapa hari, lalu cairannya dituang dan disaring (Voight, 1995).

b. Perkolasi

Perkolasi yang berarti penetesan yang dilakukan dalam wadah silindris atau kerucut (perkolator). Perkolasi dapat dilakukan dengan cara mengalirkan cairan penyari secara lambat ke dalam serbuk simplisia yang telah dibasahi. Kemudian tunggu sampai larutan ekstrak mulai menetes, lalu jalan keluar ditutup dan baru dibuka kembali jika cairan penyari berada 1-2 cm diatas simplisia (Voight, 1995).

2. Cara panas

Ekstraksi menggunakan pelarut dengan cara panas terdiri dari: a. Refluks

Refluks adalah ekstraksi dengan pelarut pada temperatur titik didihnya, selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang relatif konstan dengan adanya pendingin balik (kondensor) (Ditjen POM, 2000).

b. Sokletasi

Bahan yang diekstraksi berada dalam kantung ekstraksi didalam sebuah alat soklet yang bekerja kontinu, yang diletakkan diantara labu suling dan suatu pendinginan aliran balik (kondensor) dan dihubungkan melalui pipet (sippon). Labu yang berisi bahan pelarut akan terkondensasi dan menetes ke atas bahan yang terekstraksi dan menarik keluar bahan yang diekstraksi. Kemudian hasil ekstraksi akan ditampung didalam labu (Voight, 1995).

c. Digesti

Digesti merupakan proses ekstrasi simplisia dengan cara merendam serbuk simplisia dengan pelarut pada suhu 40-50 oC sambildilakukan dalam selang waktu tertentu. Selanjutnya cairan disaring bila perlu diuapkan untuk memperoleh ekstrak kental (Voight, 1995).

d. Infundasi

Infundasi adalah proses penyarian dengan menggunakan pelarut air pada temperatur 90oC selama 15 menit (Depkes, RI., 2000).

e. Dekoktasi

Dekoktasi adalah proses penyarian dengan menggunakan pelarut air pada temperatur 90oC selama 30 menit (Depkes, RI., 2000).

2.3 Simvastatin

Menurut Moffat, dkk. (2005), sifat fisiko kimia simvastatin adalah sebagai berikut.

Rumus struktur :

Nama kimia : 2,2-Dimethylbutanoic acid (1S,3R,7S,8S,8aR) 1,2,3,7,8,8a hexahydro–3,7–dimethyl–8-[2-[(2R,4R)-tetrahydro–4–hydroxy– 6–oxo–2H-pyran–2–yl]ethyl]-1–naphthalenyl ester

Rumus kimia : C25H38O5 Berat molekul : 418,6

Pemerian : Serbuk kristal putih

Kelarutan : Tidak larut dalam air, n-heksan, dan asam klorida; larut dalam kloroform, dimetil sulfoksida, metanol, etanol, polietilen glikol, NaOH, dan propilen glikol.

Simvastatin merupakan golongan obat inhibitor 3-hidroksi-3-metilglutaril koenzim A (HMG-CoA) reduktase, yang mengkatalisis biosintesis kolesterol pada tahap awal. Inhibisi proses ini menyebabkan kadar kolesterol menurun dengan cepat sekitar 15-40%. Simvastatin memiliki efek yang baik terhadap profil lipid secara keseluruhan. Simvastatin menurunkan kadar LDL yang berkaitan dengan resiko kardiovaskuler (Williams, 2005). Selain itu, simvastatin juga dapat menurunkan kadar trigliserida sebesar 10–30%, LDL sebesar 30-60% dan meningkatan HDL sebesar 2-15% (Anderson, dkk., 2002).

2.4 Profil Lipid

Profil lipid merupakan pengukuran kadar lemak (lipid) dalam darah, yang pada umumnya diperiksa setelah subyek berpuasa 10-12 jam (tidak makan atau minum, kecuali air putih) (Anonim, 2012). Profil lipid terdiri dari:

1. Kolesterol Total. Merupakan jumlah total kandungan kolesterol dalam darah. Kolesterol dibutuhkan tubuh untuk mempertahankan kesehatan sel-sel tetapi level

yang terlalu tinggi akan meningkatkan risiko sakit jantung. Idealnya total kolesterol harus < 200 mg/dl (< 5,2 mmol/l). Faktor genetik juga berperan sebagai penentu kadar kolesterol, selain dari makanan yang dimakan.

2. Low density lipoprotein (LDL). Banyaknya LDL dalam darah menyebabkan akumulasi endapan lemak (plak) dalam arteri (proses aterosklerosis), sehingga aliran darah menyempit. Plak ini kadang-kadang bisa pecah dan menimbulkan masalah besar untuk jantung dan pembuluh darah. LDL ini adalah target utama dari berbagai obat penurun kolesterol. Target yang ingin dicapai:

a. < 70 mg/dl untuk individu yang sudah memiliki penyakit kardiovaskular atau pasien yang berisiko sangat tinggi untuk terkena (misalnya: sindrom metabolik)

b. 100 mg/dl untuk pasien yang beresiko tinggi (misalnya: pasien dengan beberapa faktor resiko sekaligus)

c. < 130 mg/dl untuk individu yang berisiko rendah terkena PJK

3. High density lipoprotein (HDL). Disebut juga kolesterol “baik” karena membantu membawa kolesterol dari aliran darah menuju ke hati untuk dimetabolisme. Idealnya level HDL harus diatas 40 mg/dl. Umumnya wanita memiliki level yang lebih tinggi daripada pria. Olahraga dapat membantu meningkatkan kadar HDL.

4. Trigliserida. Level trigliserida yang tinggi biasanya pada pasien yang gemuk atau pasien diabetes. Makanan tinggi karbohidrat (gula sederhana) atau alkohol dapat menaikkan trigliserida secara bermakna. Idealnya level trigliserida harus < 150 mg/dl (1,7 mmol/L). American Heart Association (AHA) merekomendasikan bahwa level trigliserida untuk kesehatan jantung “optimal” adalah 100 mg/dl (1,1

Gambar 2.2 Struktur trigliserida

2.5Lipid Plasma

Lipid plasma terdiri dari trigliserida (16%), fosfolipid (30%), kolesterol (14%), dan ester kolesteril (36%), serta sedikit asam lemak rantai-panjang tak-teresterifikasi (asam lemak bebas, FFA) (14%) (Murray, dkk., 2006). Lipid plasma tersebut diangkut dari sirkulasi kedalam hati dan otot dalam bentuk lipoprotein.

2.5.1 Lipoprotein

Lipid plasma yang utama yaitu kolesterol, trigliserida, fosfolipid dan asam lemak bebas tidak larut dalam cairan plasma (Suyatna dan Tony., 2007). Agar lipid plasma dapat diangkut dalam cairan sirkulasi, maka perlu dibuat bentuk yang terlarut. Untuk itu dibutuhkan suatu zat pelarut yaitu suatu protein yang dikenal dengan nama apolipoprotein atau apoprotein. Setiap lipoprotein terdiri atas kolesterol (bebas atau ester), trigliserida, fosfolipid, dan apoprotein. Lipoprotein berbentuk sferik dan mempunyai inti trigliserida dan kolesterol ester yang dikelilingi oleh fosfolipid dan sedikit kolesterol bebas. Apolipoprotein ditemukan pada permukaan lipoprotein

Gambar 2.4 Struktur lipoprotein (Randox Laboratories, 2007)

Setiap lipoprotein berbeda dalam ukuran, densitas, komposisi lemak dan komposisi apolipoprotein. Karakteristik lipoprotein plasma dapat dilihat pada Tabel 2.1.

Tabel 2.1 Karakteristik lipoprotein plasma

Kelas Lipoprotein Densitas (g/ml) Diameter (nm) Kandungan Lipid Utama Lokasi Sintesis

Kilomikron < 0,94 75-1200

Trigliserida dan kolesterol dari

makanan

Usus

VLDL 0,94-1,006 30-80

Trigliserida “endogen” atau

hepatic

Hati

IDL 1,006-1,019 25-35 Kolesterol ester dan

trigliserida “endogen”

Produk katabolisme

VLDL

LDL 1,019-1,063 18-25 Kolesterol ester

Produk katabolisme

VLDL

HDL 1,063-1,21 5-12 Fosfolipid, kolesterol

ester

Usus, hati, dan plasma

Sumber: Brunton, dkk. (2010).

Menggunakan ultrasentrifugasi, pada manusia dapat dibedakan lima jenis lipoprotein yaitu kilomikron, very low density lipoprotein (VLDL),

intermediate-1. Kilomikron

Lipoprotein dengan berat molekul terbesar ini lebih dari 80% komponennya terdiri dari trigliserida dan kurang dari 5% kolesterol ester. Kilomikron membawa trigliserida dari makanan ke jaringan lemak dan otot rangka, juga membawa kolesterol makanan ke hati. Trigliserida dari kilomikron akan mengalami hidrolisis oleh lipoprotein lipase (LPL), sehingga diameter lipoprotein ini mengecil.

2. Lipoprotein Densitas Sangat Rendah (VLDL, very low density lipoprotein) Lipoprotein ini terdiri dari 60% trigliserida (endogen) dan 10-15% kolesterol. VLDL disekresi oleh hati untuk mengangkut trigliserida ke jaringan perifer. Trigliserida VLDL dihidrolisis oleh lipoprotein lipase menghasilkan asam lemak bebas untuk disimpan dalam jaringan adiposa dan bahan oksidasi di jantung dan otot skelet. Sebagian VLDL remnant akan diubah menjadi LDL, sehingga dapat terjadi peningkatan kadar LDL serum mengikuti penurunan hipertrigliserida.

3. Lipoprotein Densitas Sedang (IDL, intermediate density lipoprotein)

IDL ini kurang mengandung trigliserida (30%), lebih banyak kolesterol (20%) dan relatif lebih banyak mengandung apoprotein B dan E. IDL adalah zat perantara yang terjadi sewaktu VLDL dikatabolisme menjadi LDL, tidak terdapat dalam kadar yang besar kecuali bila terjadi hambatan konversi lebih lanjut.

4. Lipoprotein Densitas Rendah (LDL, low density lipoprotein)

LDL merupakan lipoprotein pengangkut kolesterol terbesar pada manusia (70% total). Partikel LDL mengandung trigliserida sebanyak 10% dan kolesterol 50%. Jalur utama katabolisme LDL berlangsung lewat receptor-mediated endocytosis di hati dan sel lain. Ester kolesterol dari inti LDL dihidrolisis menghasilkan kolesterol bebas untuk sintesis sel membran dan hormon steroid.

Selain lewat proses endositosis, sel juga mendapat kolesterol dari sintesis de novo lewat enzim HMG Co-A reduktase. Produksi enzim ini dan reseptor LDL diatur lewat transkripsi genetik berdasarkan tinggi rendahnya kadar kolesterol dalam sel (Suyatna dan Tony, 2007).

5. Lipoprotein densitas tinggi (HDL, high density lipoprotein)

HDL merupakan molekul lipoprotein paling kecil dengan diameter 5-12 nm. HDL dibagi menjadi HDL2 (densitas 1,063-1,125 g/ml) dan HDL3 (1,125-1,21 g/ml). HDL mengandung 50% protein, 30% fosfolipid, dan 20% kolesterol. HDL terikat pada Apo AI, AII, C, dan Apo E. HDL berperan sebagai lipoprotein protektif yang menurunkan resiko penyakit jantung koroner (Suyatna, 2007). 2.5.2 Apolipoprotein

Apolipoprotein adalah protein yang membantu melarutkan inti lipid dan regulasi plasma lipid dan transportasi lipoprotein, apolipoprotein terdapat pada permukaan lipoprotein. Apolipoprotein atau apoprotein terletak dibagian luar partikel lipoprotein dan mempunyai 2 fungsi yaitu: pertama, mengikatkan lipoprotein kepada reseptor sel, dan kedua, mengaktifkan atau menghambat enzim-enzim plasma yang terlibat dalam penghancuran, pembentukan dan pengangkutan lipid. Yang berperan dalam aterosklerosis adalah Apo AI pada HDL yang bersifat anti aterogenik dan Apo B pada LDL yang bersifat aterogenik (Suyono, 1996).Ada banyak macam apolipoprotein, tetapi beberapa jenis apolipoprotein utama yang terdapat pada tiap lipoprotein tampak pada Tabel 2.2.

Apo AI HDL, Kilomikron

Hati, Usus Kofaktor LCAT; protein struktural

pada HDL; ligan reseptor HDL

Apo AII HDL, Kilomikron

Hati Protein struktural pada HDL; ligan

reseptor HDL

Apo AIV HDL, Kilomikron

Usus Memfasilitasi transfer apolipoprotein

lain antara HDL dan kilomikron

Apo B100 VLDL, IDL, LDL

Hati Protein struktural dari VLDL, IDL,

LDL; ligan reseptor LDL

Apo B48 Kilomikron Usus Protein struktural pada kilomikron

Apo CI Kilomikron, VLDL, HDL

Hati Kofaktor LCAT; memodulasi

pengikatan reseptor remnant

Apo CII Kilomikron, VLDL, HDL

Hati Aktifator LPL (Lipoprotein Lipase)

Apo CIII Kilomikron, VLDL, HDL

Hati Menghambat LPL (Lipoprotein

Lipase); memodulasi pengikatan reseptor remnant

Apo E2-E4 Kilomikron, VLDL, HDL

Hati, otak, kulit, gonad, limpa

Ligan untuk reseptor LDL dan reseptor yang mengikat remnant; transpor balik kolesterol (HDL dengan ApoE)

Sumber: Suyono, (1996). 2.5.3 Kolesterol

Kolesterol terdapat di jaringan dan plasma sebagai kolesterol bebas atau dalam bentuk simpanan, yang berikatan dengan asam lemak rantai-panjang sebagai kolesterol ester. Didalam plasma, kedua bentuk tersebut diangkut dalam lipoprotein. Kolesterol adalah lipid amfipatik dan merupakan komponen struktural esensial pada membran dan lapisan luar lipoprotein plasma. Senyawa ini disintesis di banyak jaringan dari asetil-KoA dan merupakan prekursor semua steroid lain di tubuh, termasuk kortikosteroid, hormon seks, asam empedu, dan vitamin D (Murray, dkk., 2006).

halus (15%), kulit, korteks adrenal, kelenjar kelamin, dan lain-lain. (Satyanarayana, 2005).

Biosintesis kolesterol dapat dibagi menjadi 5 tahap sebagai berikut. 1. Sintesis mevalonat dari asetil-KoA

2. Pembentukan unit isoprenoid dari mevalonat

3. Kondensasi enam unit isoprenoid untuk membentuk skualen 4. Siklisasi skualen menghasilkan steroid induk, lanosterol

5. Pembentukan kolesterol dari lanosterol (Murray, dkk., 2006). Jalur biosintesi kolesterol dapat dilihat pada Gambar 2.4

Gambar 2.4 Jalur Biosintesis Kolesterol (Liscum, 2002).

Berdasarkan produk tipikal metabolisme hewan, kolesterol terdapat dalam makanan yang berasal dari hewan, misalnya kuning telur, daging, hati, dan otak. Lipoprotein berdensitas rendah (LDL) plasma adalah kendaran yang membawa

dari jaringan oleh lipoprotein berdensitas tinggi (HDL) plasma dan diangkut ke hati, tempat senyawa ini dieliminasi dari tubuh tanpa diubah atau setelah diubah menjadi asam empedu dalam proses yang dikenal sebagai transpor kolesterol terbalik (Murray, dkk., 2006)

2.6 Kadar Lipid Serum Normal

Klasifikasi kolesterol, kolesterol LDL, kolesterol HDL, dan trigliserida menurut NCEP ATP III (National Cholesterol Education Program Adult Treatment Panel III) 2001 terdapat pada Tabel 2.3.

Tabel 2.3 Kadar lipid serum normal

Kolesterol total

< 200 Optimal

200-239 Diinginkan

≥ 240 Tinggi

Kolesterol LDL

< 100 Optimal

100-129 Mendekati optimal

130-159 Diinginkan

160-189 Tinggi

≥ 190 Sangat tinggi

Kolesterol HDL

< 40 Rendah

≥ 60 Tinggi

Trigliserida

< 150 Optimal

150-199 Diinginkan

200-499 Tinggi

≥ 500 Sangat tinggi

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Kolesterol merupakan salah satu lemak plasma yang dibutuhkan oleh tubuh dan termasuk komponen membran sel serta bahan awal untuk pembentukan asam empedu dan hormon steroid. Senyawa ini diperoleh tubuh dari kolesterol yang terdapat dalam makanan dan dari biosintesis dalam tubuh, terutama di hati. Sumber pembentukkan kolesterol adalah asetil-KoA yang dapat berasal dari senyawa karbohidrat (glukosa) dan lemak, terutama asam lemak jenuh (Murray, dkk., 1970)

Secara normal, kolesterol diproduksi oleh tubuh, tetapi karena pola makan yang berubah dengan kandungan lemak tinggi, dapat menyebabkan kolesterol akan berada dalam jumlah berlebihan pada darah. Kelebihan kolesterol inilah yang dapat memicu aterosklerosis yang selanjutnya berpotensi menimbulkan penyakit jantung koroner (PJK) (Galton dan Krone., 1991; Katzung, 1989)

Berdasakan data WHO pada tahun 1998, sekitar dua belas juta orang meninggal di dunia akibat penyakit jantung koroner dan 16% diantaranya terjadi di negara-negara berkembang termasuk Indonesia. Penyakit jantung koroner sangat erat hubungannya dengan aterosklerosis dan faktor resiko utamanya adalah abnormalitas lipid darah terutama kolesterol (Juhaeni, 2002).

Beberapa upaya yang dilakukan untuk menurunkan kadar kolesterol antara lain dengan perubahan gaya hidup secara dini, seperti berolahraga secara teratur, mengurangi asupan makanan berlemak dan pengobatan dengan obat-obatan yang

2.3 Simvastatin ... 10

2.4 Propil Lipid ... 11

2.5 Lipid Plasma ... 13

2.5.1 Lipoprotein ... 13

2.5.2 Apolipoprotein ... 16

2.5.3 Kolesterol ... 17

2.6 Kadar Lipid Serum ... 19

BAB III METODE PENELITIAN ... 20

3.1 Alat-alat ... 20

3.2 Bahan-bahan ... 20

3.3 Penyiapan bahan tumbuhan ... 21

3.3.1 Pengumpulan bahan ... 21

3.3.2 Identifikasi tumbuhan ... 21

3.3.3 Pengolahan bahan tumbuhan ... 21

3.4 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Jambu Bol ... 22

3.5 Pemeriksaan Karakteristik ... 22

3.5.1 Penetapan kadar air ... 22

3.5.2 Penetapan kadar sari yang larut dalam air ... 23

3.5.3 Penetapan kadar sari yang larut dalam etanol ... 23

3.5.4 Penetapan kadar abu total ... 24

3.5.5 Penetapan kadar abu yang tidak larut asam ... 24

3.6 Skrining Fitokimia ... 24

3.6.1 Pemeriksaan alkaloid ... 24

3.6.3 Pemeriksaan glikosida ... 25

3.6.4 Pemeriksaan saponin ... 26

3.6.5 Pemeriksaan tannin ... 26

3.6.6 Pemeriksaan steroid/triterpenoid ... 26

3.7 Penyiapan Bahan ... 26

3.7.1 Pembuatan CMC Na 0,5% ... 27

3.7.2 Pembuatan suspensi ekstrak etanol daun jambu bol ... 27

3.7.3 Pembuatan suspensi simvastatin ... 27

3.8 Hewan Percobaan ... 27

3.9 Pengujian Farmakologi ... 28

3.9.1 Penyiapan hewan hiperkolesterolemia ... 28

3.9.2 Pembuatan pakan tinggi kolesterol ... 28

3.9.3 Pengujian efek penurunan kadar kolesterol ... 28

3.9.4 Pemberian bahan obat terhadap tikus yang hiperkolesterol ... 29

3.9.5 Pengambilan darah dan Pengukuran kadar kolesterol darah tikus ... 29

3.9 Analisis Data ... 29

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 30

4.1 Hasil Identifikasi Sampel ... 30

4.2 Hasil Ekstraksi Serbuk Daun Jambu Bol ... 30

4.3 Hasil Karakterisasi Simplisia Daun Jambu Bol (EEDJB) .... . 30

4.4 Hasil Skrining Fitokimia Simplisia dan Ekstrak Etanol Daun Jambu Bol ... 32

4.5 Uji Aktivitas Antikolesterol Ekstrak Etanol Daun jambu Bol (EEDJB) ... 32

4.5.1 Pengukuran kadar kolesterol awal dan setelah

hiperkolesterolemia ... 33

4.5.2 Pengukuran kadar kolesterol setelah 7 hari perlakuan . 36

4.5.3 Pengukuran kadar kolesterol setelah 14 hari perlakuan 37

4.5.4 Pengukuran kadar kolesterol setelah 21 hari perlakuan 38

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 42

5.1 Kesimpulan ... 42

5.2 Saran ... 42

DAFTAR PUSTAKA ... 43

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

1.1 Kerangka pikir penelitian ... 5

2.1 Struktur Simvastatin ... 10

2.2 Struktur trigliserida ... 13

2.3 Struktur Lipoprotein ... 14

2.4 Jalur Biosintesis Kolesterol ... 18

4.1 Grafik kadar kolesterol awal dan kadar hiperkolesterol ... 34

4.2 Grafik perbedaan penurunan kadar kolesterol tikuss ... 40

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

2.1 Karakteristik Lipoprotein Plasma ……… 14

2.2 Jenis-jenis Apolipoprotein ………... 16

2.3 Kadar lipid serum normal ………. 19 4.1 Hasil Karakterisasi Simplisia dan Ekstrak Etanol Daun

Jambu Bol ... 30 4.2 Hasil Skrining fitokimia ekstrak etanol daun jambu bol ... 32 4.3 Hasil pengukuran rata-rata kadar kolesterol awal dan

setelah hiperkolesterolemia ... 33 4.4 Data hasil uji analisis statistik ANOVA setelah 7 hari perlakuan ... 36 4.5 Data hasil uji Tukey setelah 7 hari perlakuan ... 36 4.6 Data hasil uji analisis statistik ANOVA setelah 14 hari perlakuan . 37 4.7 Data hasil uji Tukey setelah 14 hari perlakuan ... 38 4.8 Data hasil uji analisis statistik ANOVA setelah 21 hari perlakuan . 38 4.9 Data hasil uji Tukey setelah 21 hari perlakuan ... 39

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1. Hasil identifikasi tanaman daun jambu bol (Syzygium

malaccense L. Merr & Perry) ... 47

2. Bagan kerja penelitian ... 48

3. Bagan pembuatan ekstrak etanol daun jambu bol ... 49

4. Bagan pengerjaan uji aktivitas antikolesterol pada tikus ... 50

5. Gambar tanaman jambu bol (Syzygium malaccense L. Merr & Perry) dan daun jambu bol ... 51

6. Gambar simplisia serbuk daun jambu bol ... 52

7. Gambar sedian penginduksi ... 53

8. Gambar alat... 54

9. Rekomendasi persetujuan etik penelitian kesehatan ... 56

10. Perhitungan hasil karakterisasi serbuk simplisia dan ekstrak etanol daun jambu bol ... 57

11. Tabel konversi dosis hewan dengan manusia ... 63

12. Contoh perhitungan dosis ... 64

13. Contoh perhitungan dosis yang dikonversikan ke manusia ... 66

14. Data pengukuran kadar kolesterol darah tikus ... 67

15. Data pengukuran rata-rata kadar kolesterol tikus setelah perlakuan ... 69

16. Data Berat Badan Tikus ... 70