BAB III BAHAN DAN METODOLOGI
3.1. Alat-alat
1. Spektrofotometer 10 UV Genesys
2. Cuvet quarts volume 10 mm
3. Timbangan analitis kapasitas ± 200 g
4. Labu ukur volume 25 mL
5. Hot plate
6. Pipet tetes
7. Beaker glass 250 mL
3.2. Bahan-bahan
1. n-heksana
2. CPO
3.3. Prosedur Analisa
3.3.1. Persiapan Sampel
Sampel yang diperlukan untuk analisa DOBI dan β-karoten adalah sampel CPO. Sebelum dilakukan analisa sampel maka terlebih dahulu dipersiapkan dengan cara
pemanasan sampel CPO diatas hot plate agar CPO yang menggumpal atau fase padatnya mencair dan homogen sehingga mudah dalam melakukan penimbangan dan
diperoleh hasil yang maksimum. Jika larutan konsentrasi tinggi, cairkan dengan memipet 2 mL larutan ke dalam labu ukur 10 mL dan dilarutkan sampai garis batas.
Ukur absorbansi larutan ini pada panjang gelombang 269 nm dan absorbansi pada 446
30
Universitas Sumatera Utara
nm. Pencairan demikian lebih baik untuk sampel yang memiliki harga DOBI yang tinggi.
3.3.2. Penentuan DOBI dalam CPO 1. Dimasukkan beberapa larutan blanko pelarut organik misalnya n-heksana
dalam masing-masing kuvet 2. Dihidupkan alat spektrofotometer dan dibiarkan stabil
3. Diukur absorbansi pada λ 269 nm dan 446 nm
4. Diambil nilai absorbansi yang terkecil sebagai larutan blanko dan nilai yang terbesar sebagai tempat sampel
5. Ditimbang 0,1 g CPO dalam labu ukur 25 mL 6. Dilarutkan dengan n-heksana, diencerkan sampai garis batas, dihomogenkan
7. Dimasukkan dalam kuvet dan diukur absorbansinya pada λ 446 nm dan 269 nm
3.3.3. Persiapan Alat
A. Pengoperasian spektrofotometer Genesys
1. Dihidupkan CPU dan monitor computer dengan cara menekan tombol “Power”
ON. 2.
Tunggu instalation sampai muncul di layar
Universitas Sumatera Utara
Instalasi Layar Alat Spektrofotometer
Absorbance Jam Operasi
0,000A 446 nm
Tanggal Operasi
Measure Blank
Set Nm
Change Mode
3. Tekan tombol “TEST”
4. Pilih menu program, pilih absorbansi ratio, enter
5. Masukkan angka wavelength WL
1
446nm, enter. 6.
Masukkan angka wavelength WL
2
269 nm, enter. 7.
Pilih sample positioner, enter pilih platform, enter. 8.
Tekan RUN TEST 9.
Masukkan blank, tekan measure blank, muncul measure sample. 10.
Keluarkan blank, masukkan sample, tekan measure sample 11.
Muncul hasil pada layar display hasil ratio menunjukkan nilai DOBI. 12.
Setelah selesai tekan escape 2x, tekan don’t save 1x, tekan basic ΔTC
13. Muncul tulisan pada layar display sbb:
Absorbance Jam
Value outside photometric range -0,1A
446 nm Tanggal
Operasi
Measure Blank
Set Nm
Change Mode
14. Matikan, tekan ONOFF pada alat
Universitas Sumatera Utara
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN