Persiapan Sampel Persiapan Alat

BAB III BAHAN DAN METODOLOGI

3.1. Alat-alat

1. Spektrofotometer 10 UV Genesys 2. Cuvet quarts volume 10 mm 3. Timbangan analitis kapasitas ± 200 g 4. Labu ukur volume 25 mL 5. Hot plate 6. Pipet tetes 7. Beaker glass 250 mL

3.2. Bahan-bahan

1. n-heksana 2. CPO

3.3. Prosedur Analisa

3.3.1. Persiapan Sampel

Sampel yang diperlukan untuk analisa DOBI dan β-karoten adalah sampel CPO. Sebelum dilakukan analisa sampel maka terlebih dahulu dipersiapkan dengan cara pemanasan sampel CPO diatas hot plate agar CPO yang menggumpal atau fase padatnya mencair dan homogen sehingga mudah dalam melakukan penimbangan dan diperoleh hasil yang maksimum. Jika larutan konsentrasi tinggi, cairkan dengan memipet 2 mL larutan ke dalam labu ukur 10 mL dan dilarutkan sampai garis batas. Ukur absorbansi larutan ini pada panjang gelombang 269 nm dan absorbansi pada 446 30 Universitas Sumatera Utara nm. Pencairan demikian lebih baik untuk sampel yang memiliki harga DOBI yang tinggi. 3.3.2. Penentuan DOBI dalam CPO 1. Dimasukkan beberapa larutan blanko pelarut organik misalnya n-heksana dalam masing-masing kuvet 2. Dihidupkan alat spektrofotometer dan dibiarkan stabil

3. Diukur absorbansi pada λ 269 nm dan 446 nm

4. Diambil nilai absorbansi yang terkecil sebagai larutan blanko dan nilai yang terbesar sebagai tempat sampel 5. Ditimbang 0,1 g CPO dalam labu ukur 25 mL 6. Dilarutkan dengan n-heksana, diencerkan sampai garis batas, dihomogenkan

7. Dimasukkan dalam kuvet dan diukur absorbansinya pada λ 446 nm dan 269 nm

3.3.3. Persiapan Alat

A. Pengoperasian spektrofotometer Genesys 1. Dihidupkan CPU dan monitor computer dengan cara menekan tombol “Power” ON. 2. Tunggu instalation sampai muncul di layar Universitas Sumatera Utara Instalasi Layar Alat Spektrofotometer Absorbance Jam Operasi 0,000A 446 nm Tanggal Operasi Measure Blank Set Nm Change Mode 3. Tekan tombol “TEST” 4. Pilih menu program, pilih absorbansi ratio, enter 5. Masukkan angka wavelength WL 1 446nm, enter. 6. Masukkan angka wavelength WL 2 269 nm, enter. 7. Pilih sample positioner, enter pilih platform, enter. 8. Tekan RUN TEST 9. Masukkan blank, tekan measure blank, muncul measure sample. 10. Keluarkan blank, masukkan sample, tekan measure sample 11. Muncul hasil pada layar display hasil ratio menunjukkan nilai DOBI. 12. Setelah selesai tekan escape 2x, tekan don’t save 1x, tekan basic ΔTC 13. Muncul tulisan pada layar display sbb: Absorbance Jam Value outside photometric range -0,1A 446 nm Tanggal Operasi Measure Blank Set Nm Change Mode 14. Matikan, tekan ONOFF pada alat Universitas Sumatera Utara

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN