25
3.6.2 Penentuan Waktu Kerja Nitrit Baku
Dipipet 4 mL LIB II nitrit dan dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 mL, ditambahkan 2,5 mL pereaksi asam sulfanilat dan dikocok, setelah 5 menit,
ditambahkan 2,5 mL pereaksi N-1-naftil etilendiamin dihidroklorida dan dicukupkan dengan air suling sampai garis tanda kemudian dihomogenkan, diukur
serapan pada panjang gelombang 540 nm setiap menit selama 60 menit dengan blanko air suling C = 0,8 μgmL. Waktu kerja selanjutnya digunakan untuk
penentuan kadar nitrit dan nitrat dalam sampel.
3.6.3 Penentuan Kurva Kalibrasi Nitrit Baku
Dari LIB II dengan konsentrasi 10 μgmL, dipipet masing-masing
sebanyak 1 mL, 2 mL, 3 mL, 4 mL, dan 5 mL 0,2 μgmL, 0,4 μgmL; 0,6 μgmL;
0,8 μgmL; 1,0 μgmL. Masing-masing dimasukkan ke dalam labu tentukur 50
mL, kemudian ditambahkan 2,5 mL pereaksi asam sulfanilat dan dikocok. Setelah 5 menit, ditambahkan 2,5 mL pereaksi N-1-naftil etilendiamin dihidroklorida
dan dicukupkan dengan air suling sampai garis tanda kemudian dihomogenkan. Diukur serapan pada menit ke-12 pada panjang gelombang 540 nm. Kurva
kalibrasi selanjutnya digunakan untuk penentuan kadar nitrit dan nitrat dalam sampel.
3.6.4 Penentuan Kadar Nitrit dalam Brokoli Brassica oleracea L.
Masing-masing sampel yang telah dihomogenkan diambil sebanyak 10 g lalu dihaluskan dan dimasukkan ke dalam beaker glass 100 mL. Kemudian
ditambah air suling panas ± 80ºC sampai volume 50 mL. Diaduk hingga homogen dengan batang pengaduk dan dipanaskan diatas penangas air selama 15
menit sambil diaduk. Didinginkan pada suhu kamar dan dipindahkan secara
Universitas Sumatera Utara
26 kuantitatif ke dalam labu tentukur 50 mL. Ditambahkan air suling sampai garis
tanda, dihomogenkan dan disaring, filtrat pertama sekitar 10 mL dibuang. Dipipet 25 mL filtrat dan dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 mL, ditambahkan 2,5 mL
pereaksi asam sulfanilat dan dikocok. Setelah 5 menit, ditambahkan 2,5 mL pereaksi N-1-naftil etilendiamin dihidroklorida dan dicukupkan dengan air
suling sampai garis tanda kemudian dihomogenkan. Diukur serapan pada menit ke-12 dan panjang gelombang 540 nm. Kadar nitrit dalam sampel dapat dihitung
dengan persamaan regresi Y = aX+b Hess, 2000. Rumus perhitungan kadar nitrit:
K = Keterangan: Y = Absorban
K = Kadar nitrit dalam sampel μgg
X = Kadar nitrit dalam larutan sampel sesudah pengenceran V = volume larutan sampel sebelum pengenceran mL
Fp = Faktor pengenceran
3.6.5 Penentuan Kadar Nitrat dalam Brokoli Brassica oleracea. L.
Kategori