BAB III METODE PENELITIAN
Metode yang digunakan dalam penelitian adalah metode eksperimental. Penelitian eksperimen eksperimental bertujuan untuk mengetahui pengaruh
variabel bebas terhadap variabel terikat dalam kondisi yang terkontrol ketat. Penelitian ini meliputi pengumpulan dan penyiapan bahan, pemeriksaan
karakteristik, skrining fitokimia, pembuatan ekstrak etanol dan pengujian efek inotropik dan kronotropik menggunakan alat Langendroff. Data hasil penelitian
dianalisis menggunakan
analisis variansi ANOVA dengan tingkat
kepercayaan 95.
3.1 Alat dan Bahan 3.1.1 Alat
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian terdiri dari alat-alat gelas, alat bedah, alat Lagendorff, rotari evaporator, blender, seperangkat alat
destilasi penetapan kadar air, tanur, oven, mikroskop, neraca analitis, penangas air, desikator, timbangan, objek gelas, gelas penutup, beaker gelas, cawan
porselin, cawan petri, lemari pengering, freeze dryer, dan spuit.
3.1.2 Bahan
Bahan tumbuhan yang digunakan pada penelitian ini adalah daun afrika Vernonia amygdalina Del. Bahan kimia yang digunakan adalah etanol 96
teknis, metanol teknis, pereaksi; Bouchardat; Dragendorff; Mayer; besi III klorida 4,5 bv; Molish; timbal II asetat 0,4 M; asam sulfat 6 N; asam
Universitas Sumatera Utara
klorida 2 N; Lieberman-Burchard; toluen; kloroform; kloralhidrat; asam klorida; DMSO; NaCl 0,9; larutan fisiologi Krebs-Henseleit NaCl 6,9 g;
KCl 0,35 g; NaHCO
3
, 2,1 g; MgSO
4
.7H
2
O 0,29 g; KH
2
SO
4
0,16 g; CaCl
2
0,28 g; glukosa 1 g; pH 7,4; Karbogen campuran 95 O
2
+ 5 CO
2
; benang cut gut; indikator pH; Digoxin injeksi; Heparin injeksi; Ketamin injeksi;
dan akuades.
3.2 Penyiapan Bahan Tumbuhan
Penyiapan bahan tumbuhan meliputi pengumpulan, identifikasi dan pembuatan simplisia daun Afrika.
3.2.1 Pengambilan Bahan Tumbuhan
Sampel yang digunakan adalah daun Afrika Vernonia amygdalina Del. yang masih segar dan tua. Pengambilan sampel dilakukan secara purposif tanpa
membandingkan dengan tumbuhan yang sama dari daerah lain. Sampel diambil dari Taman Tanaman Obat yang berada di Fakultas Farmasi Universitas
Sumatera Utara, Pintu 4 Jl. Tridharma Universitas Sumatera Utara.
3.2.2 Identifikasi Tumbuhan
Identifikasi tumbuhan dilakukan di Herbarium Bogoriense, Bidang Botani Pusat Penelitian Biologi-LIPI Bogor.
3.2.3 Pembuatan Simplisia
Bahan baku daun Afrika tua yang masih segar dikumpulkan, dicuci bersih di bawah air mengalir, ditiriskan, dan ditimbang berat basahnya. Daun
Afrika selanjutnya dikeringkan di lemari pengering hingga kering, kemudian
Universitas Sumatera Utara
diblender sampai diperoleh serbuk simplisia, ditimbang berat keringnya dan disimpan dalam wadah plastik yang tertutup rapat.
3.3 Pembuatan Pereaksi 3.3.1 Pereaksi Bouchardat