Gambar 9. Hasil pemeriksaan kedua dengan uji Milk Ring Test MRT kiri atas dengan dua hasil positif dan dua hasil negatif kanan atas dengan mengunakan
pembanding kontrol negati susu komersil gambar bawah.
5.5. Hasil Pemeriksaan Bakteriologik Susu
Selain pemeriksaan serologik untuk kasus Brucellosis, spesimen susu yang diperoleh juga dilakukan pemeriksaan terhadap keberadaan bakteri Brucella sp.
dan kemungkinan adanya bakteri patogen yang ada di dalamnya. Pemeriksaan ini dilakukan berdasarkan kunjungan ke lapangan dan hasil wawancara dengan
pengurus koperasi dan beberapa peternak. Mereka menyatakan bahwa kualitas mikrobiologik susu mereka masih rendah, terutama dalam hal jumlah mikroba
yang terkandung didalamnya. Pemeriksaan ini bertujuan untuk mengetahui ada tidaknya bakteri Gram negatif patogen dalam susu. Hasil pemeriksaan
memperlihatkan bahwa sampling susu selain telihat adanya bakteri Brucella sp. dalam susu juga mengandung E. coli.
Keberadaan E. coli
dalam susu dapat mengakibatkan dua hal. Pertama, menggambarkan pemahaman peternak tentang kesehatan lingkungan sapi yang
kurang baik, cara pemerahan yang tidak higienis, dan cara membawa susu ke koperasi. Kedua, menunjukkan adanya resiko kemungkinan untuk menderita
penyakit diare yang diakibatkan oleh E. coli, baik untuk manusianya yang akan mengkonsumsi susu bila tidak dimasak sempurna maupun terhadap pedet yang
diberikan susu terkontaminasi tersebut. Pedet yang mengalami diare akibat E. coli dapat mengalami kematian dan hal ini akan menyebabkan kerugian bagi peternak
Naim dan Hidayat 2007. Kualitas susu sangat dipengaruhi oleh kondisi sanitasi lingkungan kandang
sapi, cara perawatan sapi, kondisi sapi, cara pemerahan dan cara pengelolaan susu mulai dari diperah sampai dibawa ke koperasi. Kualitas meliputi cita rasa dan
aroma susu, kandungan bakteri, sifat fisik dan kimiawi. Sapi perah yang sehat dengan ambing yang sehat akan memproduksi susu dengan kandungan mikroba
sedikit. Sapi perah atau ambing yang sakit akan mengakibatkan susu mengandung mikroba dalam jumlah yang banyak.
Pemahaman peternak tentang produk yang higenis belum memadai. Faktor yang sangat berpengaruh terhadap jumlah mikroba yang teramati ketika
pengambilan spesimen susu untuk pemeriksaan adalah cara membawa susu ke koperasi yang tidak tepat. Hal ini bisa dilihat pada gambar 6, berbagai cara dan
alat pembawa yang digunakan, terlihat beberapa peternak membawa susunya dengan tempat seadanya, tidak pada tempat yang sesuai seperti milk can.
Peternakan membawanya dengan ember bahkan tidak tertutup, adanya yang membawanya seperti bekas tempat cat, ada yang membawa dengan milk can,
tetapi tidak tertutup, bahkan adanya yang menutupnya dengan plastik bekas, ada yang sudah berkarat. Kondisi yang tidak tertutup ini teramati ketika turun hujan
maupun tidak turun hujan. Cara pemerahan yang tidak higienis dapat dilihat pada gambar 10, terlihat
peternak memerah terkadang sambil memegang sapu untuk memukul lalat atau serangga. Tangan peternak yang memerah tersebut akan terkontaminasi dengan
gagang sapu yang kotor, karena diletakan di lantai yang terlihat basah dengan air bercampur kotoran sapi. Kemudian ia memerah kembali, tangan yang kotor
tersebut akan mengkontaminasi ambing dan susu sapi yang diperoleh setelah pemerahan. Sehingga merugikan karena mengkontaminasi semua susu sapi yang
diperoleh dari kandang tersebut.
Gambar 10. Cara pemerahan yang kurang higienis oleh peternak dan persiapan sapi sebelum diperah
.
Gambar 11. Biakan bakteri pada media agar Brucella sp. warna putih menujukkan bakteri yang diduga Brucella sp. bawah dan warna kuning merupakan
bakeri kotaminan yang juga berasal dari Gram negatif
. Berdasarkan hasil positif uji MRT dilakukan uji kembali untuk
mempertegas yaitu dengan pembiakan pada media agar. Bakteri Brucella sp. yang ada pada spesimen sering dalam jumlah yang sangat kecil, sehingga
membutuhkan teknik pemupukan tertentu yaitu dengan menambah jumlah media pupukan agar peluang mengisolasi Brucella sp. lebih besar, misalnya, dengan
menggunakan selective bi-phasic medium, satu atau lebih selective media agar plate
media padat dan broth media cair. Biasanya separuh dari spesimen cukup untuk awal pemupukan, separuhnya lagi disimpan dalam tempat beku -20
˚C sebagai cadangan bila terjadi kontamonsi yang berlebihan. Daya hidup sel
Brucella dapat dijaga dalam jaringan yang belum diproses pada temperature beku
Anonimus 2004.
5.6. Hasil Identifikasi Bakteri dengan Pewarnaan Gram
