Pemeriksaan alkaloid Pemeriksaan flavonoid

23 xanthorrhiza Roxb.. Golongan senyawa kimia yang diperiksa meliputi senyawa alkaloid, flavonoid, glikosida, tanin, saponin dan steroidtriterpenoid.

3.4.6.1 Pemeriksaan alkaloid

Ektrak rimpang temulawak sebanyak 0,5 g yang telah dihaluskan kemudian di tambahkan 1 mL asam klorida 2N dan 9 mL air suling, dipanaskan di atas penangas air selama 2 menit, didinginkan dan disaring. Filtrat dipakai untuk percobaan adalah sebagai berikut: a. Filtrat sebanyak 3 tetes di tambahkan 2 tetes pereaksi Meyer, akan terbentuk endapan berwarna putih atau kuning jika mengandung alkaloida. b. Filtrat sebanyak 3 tetes ditambahkan 2 tetes pereaksi Bourchardat, akan terbentuk endapan berwarna coklat sampai hitam jika mengandung alkaloida. c. Filtrat sebanyak 3 tetes ditambahkan 2 tetes pereaksi Dragendorff, akan terbentuk endapan berwarna merah sampai coklat jika mengandung alkaloida. Jika reaksi 1 dan 2 hanya terjadi kekeruhan dilanjutkan pemeriksaan berikut: filtrat sebanyak 8 mL ditambahkan 2 mL ammonia pekat dan dikocok dengan 5 mL campuran eter-kloroform 3:1 dan dibiarkan memisah, diambil lapisan eter-kloroform, ditambahkan sedikit natrium sulfat anhidrat, disaring dan diuapkan filtrat di dalam gelas arloji di atas penangas air, dilarutkan residunya dengan sedikit asam klorida 2N. Alkaloid positif jika terjadi endapan atau kekeruhan paling banyak dua dari tiga percobaan di atas Depkes RI, 1989.

3.4.6.2 Pemeriksaan flavonoid

Ekstrak rimpang temulawak sebanyak kurang lebih 500 mg dimasukkan ke dalam labu Erlenmeyer ditambahkan 10 mL metanol, direfluks selama 10 menit, disaring panas melalui kertas saring. Filtrat diencerkan dengan 10 mL air, setelah dingin ditambahkan 5 mL eter minyak tanah, dikocok hati-hati dan Universitas Sumatera Utara 24 didiamkan. Lapisan metanol diambil, lalu diuapkan pada suhu 40 o C, sisanya dilarutkan dalam 5 mL etil asetat, lalu disaring. Filtratnya digunakan untuk uji flavonoid sebagai berikut: a. Filtrat sebanyak 1 mL diuapkan sampai kering, sisanya dilarutkan dalam 2 mL etanol 96 lalu ditambahkan 0,5 g serbuk Zn dan 2 ml asam klorida 2N, didiamkan selama 1 menit. Ditambahkan 10 tetes asam klorida pekat. Jika dalam waktu 2-5 menit terjadi warna merah intensif menunjukkan bahwa adanya flavonoida glikosida-3-flavonol b. Filtrat sebanyak 1 mL diuapkan sampai kering, sisanya dilarutkan dalam 1mL etanol 96, lalu ditambahkan 0,1 g serbuk magnesium dan 10 tetes asam klorida pekat. Jika terlihat warna merah jingga sampai merah ungu menunjukkan adanya flavonoid Depkes RI, 1989. 3.4.6.3 Pemeriksaan glikosida Ekstrak rimpang temulawak sebanyak 3 g dicampurkan dengan 30 mL campuran 7 bagian etanol 96 dan 3 bagian air, ditambahkan 10 mL asam sulfat 2N, lalu direfluks selama 10 menit, didinginkan dan disaring. Filtrat sebanyak 20 mL tambahkan 25 mL air dan 25 mL larutan timbal II asetat 0,4 M, dikocok dan didiamkan selama 5 menit lalu disaring. Filtrat disari 3 kali, tiap kali dengan 20 mL campuran 3 bagian kloroform dan 2 bagian isopropanol, pada kumpulan sari ditambahkan natrium sulfat anhidrat pekat lalu disaring dan diuapkan pada suhu tidak lebih dari 50 o C. Sisa dilarutkan dengan 2 mL metanol pekat. Larutan sisa digunakan untuk percobaan berikut: Larutan sebanyak 5 tetes dimasukkan dalam tabung reaksi, lalu ditambahkan 2 mL air dan 5 tetes pereaksi Molisch, kemudian ditambahkan dengan hati-hati 2 mL asam sulfat pekat hingga terbentuk cincin berwarna ungu Universitas Sumatera Utara 25 pada batas cairan, menunjukkan adanya ikatan gula Depkes RI, 1989.

3.4.6.4 Pemeriksaan tanin