27
BAB III METODE PENELITIAN
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian ini mengikuti rancangan penelitian eksperimental pola acak.
B. Variabel Penelitian
1. Variabel bebas dalam penelitian ini adalah konsentrasi timbal Pb yang
disemprotkan pada daun murbei yang akan difermentasi, kadar seri larutan baku PbNO
3 2
dan lamanya fermentasi daun murbei yang digunakan sebagai pangan cacing.
2. Variabel tergantung dalam penelitian ini adalah absorbansi serta kadar
timbal Pb yang diperoleh. 3.
Variabel pengacau terkendali dalam penelitian ini adalah: a. Lokasi pengambilan sampel daun murbei yang didapatkan sepanjang
jalan Godean km. 6,5. b. Cara pemberian larutan Pb terhadap daun murbei yang akan
difermentasi, dilakukan dengan cara disemprotkan pada daun murbei yang akan digunakan sebagai pangan cacing.
c. Operator alat Spektrofotometer Serapan Atom. d. Kemurnian pelarut, digunakan pelarut yang memiliki grade pro
analysis.
C. Definisi Operasional
1. Bahan pakan cacing tanah adalah daun murbei yang diperoleh dari satu
pohon yang sama yang terletak di jalan Godean km 6,5 dan telah diberi perlakuan dengan disemprot dengan cairan timbal Pb dan difermentasi
dengan cairan pemfermentasi EM-4. 2.
Cemaran logam berat yang ingin diteliti adalah cemaran logam berat timbal Pb pada pangan cacing Lumbricus rubellus yang berupa daun murbei,
yang diukur dengan spektrofotometri serapan atom SSA dan dinyatakan dalam µgmL.
D. Bahan Penelitian
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini antara lain PbNO
3 2
p.a E.Merck, kalium bikomat teknis, asam nitrat HNO
3
65 p.a E.Merck, asam sulfat H
2
SO
4
92-95 p.a E.Merck, aquabides, cairan pemfermentasi EM-4 produksi PT. Songgolangit Persada Jakarta, sampel berupa daun murbei
yang diambil dari satu pohon yang sama yang terletak di jalan Godean km 6,5, daun yang sudah difermentasi, serta air hasil fermentasi.
E. Alat Penelitian
Seperangkat alat Spektrofotometri Serapan Atom AAS merek Perkin Elmer 3110, oven merek Memmert, neraca analitik Ohaus Carat Series PAJ
1003 max 60120 g, min 0,001g, d = 0,010,1 mg, hotplate merk LabTech
®
, pompa vakum, corong Buchner, kertas saring Whatman
®
Filter Paper Circle, 5893 Blue Ribbon ashless,
ϕ90mm SchleircherSchuell, Dassel, Germany, seperangkat alat gelas merk Pyrex
®
Erlenmeyer, labu hisap, beker glass, pengaduk, gelas ukur, labu ukur, pipet tetes, termometer, corong.
F. Tata Cara Penelitian
1. Pembuatan Asam Pencuci
Asam pencuci yang digunakan adalah campuran kalium bikromat 1 dalam 500 mL asam sulfat p.a AOAC, 2007.
2. Pencucian Wadah dan Preparasi Peralatan
Peralatan dan wadah yang akan digunakan untuk analisis dibilas dengan asam pencuci selama kurang lebih 15 menit, kemudian didiamkan pada lemari
asam selama 24 jam lalu dibilas dengan aquabides. Setelah kering, peralatan dan wadah preparasi dimasukkan dalam kantong plastik dan disimpan dalam ruang
bebas debu Edward, 2013.
3. Pembuatan Pelarut Asam Nitrat HNO
3
1 M
Diambil 34,879 mL ≈ 35 mL larutan asam nitrat HNO3 65 p.a kemudian dimasukkan ke dalam labu ukur 500 mL dan dilarutkan dengan
aquabides sampai tanda.