3.6.3. Pemeriksaan sampel darah
Pasien sebelumnya dipuasakan sekitar 12 jam, kemudian darah diambil menggunakan venoject dari vena mediana cubiti tanpa stasis vena yang
berlebihan. Tempat punksi harus dibersihkan terlebih dahulu dengan alkohol 70 dan dibiarkan kering. Kemudian punksi dilakukan dengan
menggunakan spuit disposibel sebanyak 3 ml, dimasukkan ke dalam tabung tanpa antikoagulan untuk pemeriksaan. Sampel darah dibiarkan
membeku selama 20 menit dalam suhu ruangan, kemudian disentrifugasi dengan kecepatan 3000 rpm selama 20 menit, serum dipisahkan dan
dimasukkan ke dalam aliquotmikro tube kemudian disimpan dalam freezer pada suhu -20
c sampai terkumpul sejumlah sampel tertentu dan serentak dilakukan pemeriksaan profil lipid.
Pemeriksaan Profil lipid.
Pemeriksaan ini dilakukan dengan metoda enzimatik kolorimetrik dengan Automatic Cobass 6000 C 501. Bahan sampel adalah serum.
Prinsip pemeriksaan masing-masing sebagai berikut : 1. Pemeriksaan Trigliserida
Menggunakan alat Cobas 6000 C 501 Analyzer dengan metode enzimatik kolorimetrik, dengan reaksi :
Trigliserida
lipoprotein lipase
Gliserol + Asam lemak
Universitas Sumatera Utara
Gliserol + ATP
Gliserolkinase
Gliserol-3-pospat + ADP Gliserol-3-pospat + O
2 Gliserol pospat oxidase
Dihidroksiaseton pospat + H
2
O
2
2H
2
O
2
+ 4-aminophenazon + 4-kloropenol
Peroxidase
quinoneimine dye +
4H
2
O Absorbsi warna merah quinoneimine dye diukur pada panjang gelombang
512 nm. 2. Pemeriksaan Cholesterol total
Menggunakan alat Cobas 6000 C 501 analyzer dengan metode enzimatik kolorimetrik, dengan reaksi :
Cholesterol ester + H
2
O
cholesterol esterase
kolesterol + asam lemak Cholesterol + O
2 cholesterol oksidase
cholest- 4- ene-3-one + 4 H
2
O
2
2 H
2
O
2
+ 4-Amino Antipyrine
peroksidase
quinoneimine dye + 4 H
2
O Absorbs warna merah diukur pada panjang gelombang 520 nm
3. Pemeriksaan HDL-C Menggunakan alat Cobas 6000 C 501 analyzer dengan metode
enzimatik kolorimetrik, dengan reaksi : HDL-C ester + H
2
O
detergent cholesterol esterase
kolesterol + Asam lemak bebas HDL-C + O
2 Cholesterol oxidase
∆4-cholestenone + H
2
O
2
2H
2
O
2
+ 4-aminoantipyrine + HSDA + H
+
+ H
2
O
Peroxidase
Purple blue pigment
+ 5H
2
O Absorbsi warna Purple blue pigment diukur pada panjang gelombang 583
nm.
Universitas Sumatera Utara
4. Pemeriksaan LDL-C Menggunakan alat Cobas 6000 C 501 analyzer dengan metode
enzimatik kolorimetrik, dengan reaksi : LDL-C ester + H
2
O
detergent cholesterol esterase
kolesterol + Asam lemak bebas LDL-C + O
2 Cholesterol oxidase
∆4-cholestenone + H
2
O
2
2H
2
O
2
+ 4-aminoantipyrine + HSDA + H
+
+ H
2
O
Peroxidase
Purple blue pigment
+ 5H
2
O Absorbsi warna Purple blue pigment diukur pada panjang gelombang 583
nm.
3.7. Pemantapan mutu
Kategori