NO
2
O
2
N N
N
NO
2
NO
2
O
2
N NH
N
NO
2
1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyn
Gambar 2.5
Reaksi antara DPPH dengan atom H dari antioksidan
2.6.1 Pelarut
Metode ini dapat bekerja dengan baik dengan metanol atau etanol, karena tidak ada di antara kedua pelarut tersebut yang mengganggu reaksi.
Penggunaan pelarut lain, seperti ekstrak dalam air atau aseton, memberikan hasil yang lebih rendah dibandingkan dengan metanol atau etanol Molyneux,
2003.
2.6.2 Pengukuran panjang gelombang
Panjang gelombang maksimum yang dapat digunakan untuk pengukuran dengan metode DPPH cukup beragam mulai dari 515 nm, 516 nm,
518 nm dan 520 nm. Namun, dalam prakteknya, panjang gelombang yang digunakan ialah yang memberikan puncak maksimum Molyneux, 2003.
2.6.3 Waktu pengukuran
Waktu pengukuran menurut literatur yang direkomendasikan adalah selama 60 menit, tetapi dalam beberapa penelitian waktu yang digunakan
sangat bervariasi yaitu 5 menit, 10 menit, 20 menit, 30 menit Molyneux, 2003 dan 60 menit Rosidah et.al., 2008. Waktu reaksi yang tepat adalah ketika
+ RH + R
+
Universitas Sumatera Utara
BAB III METODE PENELITIAN
Metode penelitian ini akan dilakukan secara eksperimental. Penelitian meliputi pengumpulan bahan tumbuhan, karakterisasi simplisia, skrining
fitokimia, pembuatan ekstrak selada air serta pengujian aktivitas antioksidan dengan metode DPPH menggunakan spektrofotometer visibel. Penelitian
dilakukan di Laboratorium Farmakognosi dan Laboratorium Penelitian, Fakultas Farmasi, Universitas Sumatera Utara.
3.1 Alat dan Bahan 3.1.1 Alat
Alat-alat yang digunakan terdiri dari: alat-alat gelas laboratorium, seperangkat alat penetapan kadar air, spektrofotometer UVVis Hitachi U-
2900, rotary evaporator Stuart, oven Dynamica, mikroskop Olympus, krus porselin, tanur Nabertherm, neraca analitis Vibra, penangas air,
desikator, neraca kasar Ohaus, kaca objek , gelas penutup, lemari pengering, pisau dan krus tang.
3.1.2 Bahan
Bahan yang digunakan dalam penelitian adalah herba selada air, kertas saring dan air suling. Bahan-bahan kimia yang lainnya adalah berkualitas pro
analisis produksi Sigma: 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl DPPH; produksi E- Merck: metanol, toluen, raksa II klorida, kalium iodida, bismuthIII nitrat,
asam nitrat pekat, besi III klorida, asam klorida pekat, asam sulfat pekat,
Universitas Sumatera Utara
