3.2.2.1 Kapang
Sebanyak 0.25 mL0.25 g sampel diambil dan dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang telah berisi 2.5 mL medium Malt Extract Broth. Inkubasi selama 48 jam pada suhu ruang menggunakan
shaker incubator 150 rpm.
3.2.2.2 Bakteri
Sebanyak 0.25 mL0.25 g sampel diambil dan dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang telah berisi 2.5 mL medium Nutrient Broth. Inkubasi selama 24 jam pada suhu ruang menggunakan shaker
incubator 150 rpm.
3.2.3 Isolasi Mikroba Penghasil Enzim Penggumpal Susu
3.2.3.1 Kapang
Masing-masing 0.1 mL suspensi dari medium pengayaan mikroba diambil secara aseptis lalu masukkan ke dalam larutan tabung reaksi yang berisi 0.9 mL larutan pengencer lalu dihomogenkan.
Larutan tersebut merupakan pengenceran 10
-1
. Untuk pengenceran berikutnya, ambil sebanyak 0.1 ml larutan dari pengenceran 10
-1
dan masukkan ke dalam tabung reaksi berisi 0.9 mL larutan pengencer kemudian dihomogenkan. Larutan tersebut merupakan pengenceran 10
-2
. Langkah tersebut dilakukan hingga pengenceran 10
-5
. Selanjutnya, sebanyak masing-masing 0.01 mL suspensi diambil dari pengenceran 10
-4
dan10
-5
secara aseptis lalu dimasukkan ke dalam medium skim milk agar yang telah dibekukan pada cawan petri. Inkubasi terbalik dilakukan selama 48 jam pada suhu ruang.
3.2.3.2 Bakteri
Masing-masing 0.1 mL suspensi dari medium pengayaan mikrobadiambil secara aseptis lalu masukkan ke dalam larutan tabung reaksi yang berisi 0.9 mL larutan pengencer lalu dihomogenkan.
Larutan tersebut merupakan pengenceran 10
-1
. Untuk pengenceran berikutnya, ambil sebanyak 0.1 ml larutan dari pengenceran 10
-1
dan masukkan ke dalam tabung reaksi berisi 0.9 mL larutan pengencer kemudian dihomogenkan. Larutan tersebut merupakan pengenceran 10
-2
. Langkah tersebut dilakukan hingga pengenceran 10
-5
. Selanjutnya, sebanyak masing-masing 0.01 mL suspensi diambil dari pengenceran 10
-4
dan10
-5
secara aseptis lalu dimasukkan ke dalam medium skim milk agar yang telah dibekukan pada cawan petri. Inkubasi terbalik dilakukan selama 24 jam pada suhu ruang.
3.2.4 Pembuatan Kurva Pertumbuhan