3.4.5.2 Pembuatan kurva kalibrasi Na Siklamat BPFI
Dipipet LIB I sebanyak 2,0 ml; 4,0 ml; 6,0 ml; 8,0 ml; dan 10,0 ml; dan, dimasukkan ke dalam labu tentukur 10 ml, diencerkan dengan pelarut hingga garis
tanda. Dikocok sehingga diperoleh konsentrasi 50,0 ppm, 100,0 ppm, 150,0 ppm, 200,0 ppm, dan 250,0 ppm. Kemudian masing-masing larutan disaring dengan
membran filter PTFE 0,2 µm, dan diinjeksikan ke sistem KCKT sebanyak 20 µl dan dideteksi pada panjang gelombang 201 nm. Dari luas area yang diperoleh
pada kromatogram dibuat kurva kalibrasi kemudian dihitung persamaan garis regresi dan faktor korelasinya.
3.4.5.3 Penetapan kadar sampel
Ditimbang seksama 1 g sampel yang mengandung Na Siklamat sebanyak 6 kali pengulangan. Masing-masing dimasukkan ke dalam labu tentukur 10 ml
dan dicukupkan dengan pelarut hingga garis tanda, dikocok, kemudian disaring dengan membran filter PTFE 0,2 µm dan disonikasi selama 15 menit.
Diinjeksikan sebanyak 20 µl menggunakan autosampler ke sistem KCKT dan dideteksi pada panjang gelombang 201 nm dengan perbandingan fase gerak
dapar fosfat pH 7,0:methanol 70:30, laju alir 1 mlmenit. Dilakukan sebanyak 6
kali perlakuan untuk setiap sampel.
Konsentrasi dapat dihitung dengan mensubstitusikan luas area sampel pada Y dari persamaan regresi : Y = ax + b.
3.4.5.4 Analisis data penetapan kadar secara statistik
Data perhitungan kadar dianalisis secara statistik menggunakan uji T. Menurut Rubin 2012, rumus yang digunakan untuk menghitung Standar
Deviasi SD adalah :
Universitas Sumatera Utara
1
2
n X
X SD
Kadar dapat dihitung menggunakan rumus: K =
Dan untuk menentukan data diterima atau ditolak digunakan rumus:
t hitung
n SD
X X
Dengan dasar penolakan data apabila t hitung ≥ t tabel, pada taraf
kepercayaan 99 dengan nilai α = 0,01, dk = n – 1.
Keterangan : SD = Standar deviasi
X = Kadar dalam satu perlakuan
X = Kadar rata-rata dalam satu sampel n = Jumlah pengulangan
Untuk mencari kadar sebenarnya dapat digunakan rumus:
n SD
x t
X
dk 2
1 1
Keterangan: μ = Kadar sebenarnya
X = Kadar sampel n = Jumlah pengulangan
t = Harga t
tabel
sesuai dengan derajat kepercayaan dk = Derajat kebebasan
3.4.6 Validasi metode 3.4.6.1 Akurasi kecermatan
Kategori