a. Volume obat kumur ekstrak kayu manis yang digunakan: 15 ml b. Lama penggunaan obat kumur ekstrak kayu manis : 30 detik
c. Konsentrasi 2,5 ekstrak kayu manis dalam obat kumur ekstrak kayu manis d. Volume akuades: 15 ml
3.5 Metode penelitian 3.5.1 Prosedur pembuatan obat kumur
a. Pembuatan ekstrak kayu manis
1.Sebanyak 500gr kayu manis yang segar dan tidak berjamur diseleksi dan dicuci bersih dengan air mengalir dan ditiriskan.
2.Kayu manis yang telah dicuci lalu ditimbang seberat 100gr dan dicatat berat basahnya.
3.Kayu manis dikeringkan dalam lemari pengering sampai kering dengan suhu 40
° C simplisia.
4.Kayu manis kemudian ditumbuk dengan mortal dan diblender sampai menjadi serbuk.
5.Serbuk ditimbang 100 gr kemudian dimasukkan dalam wadah bertutup. 6.Tambahkan etanol 96 untuk perendaman seluruh simplisia terendam lalu
disimpan dalam wadah tertutup dan di rendam selama 1 jam pada suhu 25 °
C. 7.Massa dipindahkan sedikit demi sedikit ke dalam perkulator yang sudah diberi
kapas saring pada dasarnya dan kemudian dituangkan ethanol 96 sampai hampir penuh.
8.Perkulator ditutup dengan aluminium foil serta dibiarkan selama 24 jam. 9.Setelah 24 jam, keran perkulator dibuka serta dibiarkan cairan menetes dengan
kecepatan 20 tetesmenit, ethanol 96 ditambah berulang-ulang secukupnya supaya massa kayu manis tidak kekeringan dan sampai sari kayu manis perkolat yang
keluar tidak berwarna. 10.Perkolat yang diperoleh diuapkan dengan rotavapor pada suhu 40
° C dan dipe-
Universitas Sumatera Utara
katkan dengan menggunakan water bath. 11.Ekstrak dimasukkan dalam botol kaca dan disimpan dalam kulkas.
b. Formulasi Obat Kumur
1. Ekstak kayu manis 2,5 berarti mengandungi 2,5gr ekstrak kayu manis dalam 100ml larutan obat kumur dan dimasukkan ke dalam mortal. Larutan obat kumur
yang dibuat sebanyak 500ml. Ekstrak kental kayu manis ditimbang sebanyak 12,5 gram dan dilarutkan dengan 450ml akuades.
2. Tambahkan Carboxymethyl cellulose CMC 0,3 sebanyak 15 gram sebagai suspending agent dalam ekstrak kental tersebut. Diaduk dengan stamfer sampai
homogen. 3. Tambahkan bahan penyegar dan rasa 5 tetes peppermint oil dan sorbitol 10
secukupnya ke dalam mortal lalu diaduk sampai homogen. 4. Obat kumur placebo hanya diberikan 5 tetes pepermint oil dan sorbitol 10.
3.5.2 Prosedur berkumur
1. Seluruh subjek sebanyak 30 orang dikumpulkan di Laboratorium DPH Fakultas Kedokteran Gigi USU untuk diberi penjelasan mengenai prosedur penelitian
dan diberi informed consent untuk ditandatangani. Subjek dibagi secara acak menjadi 2 kelompok dan masing-masing kelompok terdiri atas 15 orang yaitu kelompok
perlakuan berkumur 2,5 ekstrak kayu manis dan kelompok kontrol berkumur akuades. Penelitian pada kedua kelompok dilakukan pada hari dan waktu yang sama.
2. Sebelum memulai penelitian, sampel saliva kedua kelompok ditampung. Subjek diminta untuk mengunyah cotton roll selama 1 menit dan kemudian saliva
yang dirangsang akan ditampung dalam tabung yang steril pre test dan ditutup
rapat.
Universitas Sumatera Utara
3. Seterusnya, subjek kelompok perlakuan diberi obat kumur kayu manis de- ngan konsentrasi 2,5 sebanyak 15 ml untuk berkumur selama 30 detik dan subjek
kontrol diberi akuades sebanyak 15ml untuk berkumur selama 30 detik. 4. Setelah berkumur,air kumur dibuang dan subjek diminta untuk mengunyah
cotton roll selama 1 menit dan kemudian saliva dari kedua kelompok ditampung sebanyak 1ml dalam tabung steril dan ditutup. Saliva ditampung dengan cara subjek
diminta untuk duduk dengan nyaman dalam posisi tegak dan kepala mereka dimiringkan sedikit sehingga saliva dari mulut mengalir ke dalam tabung yang steril
dan setelah itu tabung ditutup rapat. Kemudian saliva yang ditapung dibawa ke Laboratorium Mikrobiologi Fakultas MIPA USU paling lama 1 jam untuk dilakukan
perhitungan jumlah bakteri.
3.5.3 Perhitungan jumlah bakteri
1. Sebanyak 1ml saliva pre test dan 1ml sampel saliva posttest pada 2 kelompok dipindahkan ke tabung reaksi untuk melakukan pengenceran secara seri.
2. Pengenceran secara seri dilakukan pada kedua sampel pre dan post test yaitu dengan menyediakan 3 tabung reaksi berisi 9ml sodium chloride 0,9. Pada setiap
tabung reaksi diberi nomor satu sampai tiga, tabung nomor satu adalah tabung yang berisi air kumur yang sekaligus dihitung sebagai pengenceran pertama kemudian
dihomogenisasikan, setelah suspensi tersebut homogen dengan pipet steril dimasukkan kedalam tabung nomor dua, dikocok sampai homogen sehingga terjadi
pengeceran, dari tabung nomor dua diambil suspensi sebanyak 0,1 ml dengan menggunakan pipet steril kembali, masukkan ke dalam tabung nomor tiga, dikocok
hati-hati sampai homogen sehingga terjadi pengenceran. 3. Suspensi saliva dari pengenceran tabung ketiga, diambil dengan pipet steril
sebanyak 0,1ml, kemudian disebar pada piring petri steril yang mengandungi natrium agar NA dengan menggunakan hockey stick.
Universitas Sumatera Utara
4. Tahap selanjutnya, piring petri dimasukkan dalam incubator 37 °
C selama 2X24jam.
5. Sesudah 48 jam, jumlah bakteri pada setiap piring dihitung dengan Colony Forming Unit CFU.
3.6 Pengolahan dan analisis data
Pengolahan data dilakukan secara komputerisasi yaitu dianalisis dengan uji statistik uji t berpasangan untuk menghitung perbedaan rata-rata jumlah bakteri
sebelum baseline salivary bacterial count dan sesudah berkumur ekstrak kayu manis dan akuades. Kemudian dianalisa perbedaan selisih jumlah bakteri antara
kelompok perlakuan dan kelompok kontrol dengan menggunakan uji t tidak berpasangan.
3.7 Etika Penelitian
Etika penelitian ini mencakup: 1.Ethical Clearance
Peneliti menunjukan lembar persetujuan pelaksana penelitian kepada Komisi Etik Penelitian Kesehatan berdasarkan ketentuan etika yang bersifat internasional maupun
nasional. 2.Lembar persetujuan inform consent
Peneliti memberikan lembar persetujuan kepada responden kemudian menjelaskan lebih dahulu tujuan penelitian, tindakan yang akan dilakukan serta
menjelaskan manfaat diperoleh dari hal-hal lain yang berkaitan dengan penelitian dan mendapatkan tandatangan responden di inform consent.
Universitas Sumatera Utara
3.8 Alur Penelitian
