69
c. Kadar Selulosa
Residu ADF C yang berada dalam filter glass diletakkan di atas nampan yang berisi air setinggi kira-kira 1 cm, kemudian ditambahkan H
2
SO
4
setinggi ¾ bagian filter glass dan dan dibiarkan selama 3 jam sambil diaduk-aduk. Penyaringan dengan filter glass dibantu dengan pompa vakum.
Pencucian dilakukan dengan aseton dan air panas. Sampel diletakkan ke dalam oven dan dimasukkan ke dalam desikator untuk melakukan pendinginan dan ditimbang D.
selulosa = D-C A x 100 Keterangan : A= bobot sampel g
B= bobot filter glass dan residu ADF setelah dioven g C= bobot filter glass dan residu ADF awal g
70
Lampiran 2. Prosedur analisis karakteristik fermentable sugar
1. Penentuan Total Gula dan Kurva Standar Total Gula
a. Analisis Total Gula Dubois et al. 1956
Sebelum melakukan pengujian sampel maka perlu diketahui kurva standar fenol yang digunakan. Pembuatan kurva standar fenol adalah sebagai berikut: 2 ml larutan glukosa standar yang
mengandung 0, 10, 20, 30, 40, 50, dan 60 μg glukosa masing-masing dimasukkan ke dalam tabung ulir, kemudian ditambahkan 1 ml fenol 5 dan dikocok. Kemudian ditambahkan 5 ml H
2
SO
4
pekat dengan cepat. Sampel selanjutnya dibiarkan selama 10 menit, dikocok dan dipanaskan dalam air
mendidih selama 15 menit. Absorbansinya diukur pada panjang gelombang 490 nm. Total gula sagu diukur dengan menggunakan metode fenol sulfat. Pengujian sampel sama dengan pembuatan kurva
standar fenol tetapi 2 ml larutan glukosa standar diganti dengan 2 ml sampel.
b. Kurva Standar Total Gula
2.
Penentuan Gula Pereduksi dan Kurva Standar Glukosa a.
Analisis Gula Pereduksi Metode asam Dinitro salisilat DNS Miller 1959
Sebelum sampel diuji, perlu diketahui kurva standar glukosa yang akan digunakan persamaannya. Pembuatan kurva standar glukosa adalah sebagai berikut: 1 ml larutan glukosa standar
dengan 0, 100, 150, 200, 250, dan 300 ppm masing-masing dimasukkan ke dalam tabung ulir kemudian ditambahkan dengan 3 ml DNS dan dikocok. Campuran tersebut dipanaskan selama 5
menit dalam air mendidih. Setelah itu, campuran diangkat dan didinginkan kemudian diukur pada 550 nm.
y = 0.014x - 0.023 R² = 0.996
0,1 0,2
0,3 0,4
0,5 0,6
0,7 0,8
0,9 1
10 20
30 40
50 60
70
A bs
o r
ba ns
i
Konsentrasi ppm
71
b. Kurva Standar Glukosa