BAB III METODOLOGI PENELITIAN
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian ini termasuk jenis penelitian eksperimental murni dengan rancangan acak lengkap pola searah.
B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional
1. Variabel utama
a. Variabel bebas : waktu pemanenan hari ke- dan variasi konsentrasi 2,4-D
dan FAP. b.
Variabel tergantung: profil pertumbuhan kultur kalus dan susut pengeringan kalus .
2. Variabel pengacau terkendali
a. Subyek uji : daun yang digunakan sebagai eksplan adalah daun segar dan
sehat yang terletak pada nomor 3-5 dari ujung batang atau cabang dengan ukuran eksplan 0,5 - 1,0 cm.
b. Bahan uji dan cara kerja penanaman berupa:
i. Media agar jenis WPM dengan sterilisasi tetap terjaga.
ii. Sterilitas, suhu, kelembaban dan intesitas cahaya dalam ruang inkubator.
3. Variabel pengacau tidak terkendali
a. Keadaan patologis pada daun tanaman yang tidak tampak.
36
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
b. Kandungan senyawa kimia lain yang terkandung dalam kamboja jepang
yang dapat mempengaruhi hasil kromatogram.
4. Definisi Operasional
a. Daun yang digunakan sebagai eksplan dalam penelitian ini adalah daun
yang segar dan sehat, terletak pada nomor 3-5 dari ujung batang atau cabang.
b. Waktu inisiasi adalah waktu yang dibutuhkan oleh eksplan untuk
membentuk kalus dihitung mulai dari saat penanaman eksplan sampai hari pertama kalus mulai terbentuk berupa bintik putih dari tepi irisan daun
eksplan. c.
Subkultur adalah suatu kegiatan pemeliharaan kalus dengan memindahkan kalus ke dalam media baru sehingga kalus tidak kekurangan nutrisi.
d. Bobot kalus basah awal adalah hasil pengurangan antara bobot botol +
media + kalus dengan bobot botol + media pada saat subkultur. e.
Bobot kalus basah akhir adalah bobot kalus yang ditimbang pada saat pemanenan.
f. Bobot kalus kering adalah bobot kalus pada saat pemanenan dan sesudah
mengalami proses pengeringan dengan menggunakan oven pada suhu 40- 50
C, sampai diperoleh kalus dengan bobot konstan yaitu antara penimbangan yang pertama dan berikutnya selama 1 jam tidak berbeda 0,5
mg.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
g. Laju pertumbuhan kalus adalah laju pertumbuhan kalus yang ditandai
adanya pertambahan berat kalus dari waktu ke waktu dengan memanen setiap 4 hari sekali sebanyak 3 botol selama 36 hari.
h. Profil pertumbuhan kalus adalah rasio antara pertumbuhan kalus bobot
kalus basah akhir- bobot kalus basah awal dengan waktu pemanenan serta rasio antara bobot kalus kering dengan waktu pemanenan.
i. Persen susut pengeringan adalah rerata bobot kalus basah dikurangi
dengan rerata bobot kalus kering lalu dibagi dengan rerata bobot kalus basah dikali dengan 100.
j. Konsentrasi zat pengatur tumbuh, yaitu asam 2,4-Diklorofenoksiasetat
yang digunakan adalah 4 ppm dan 2 ppm yang terkandung dalam satu liter media. Sedangkan konsentrasi 6-furfurylaminopurine yang digunakan
adalah 1 ppm.
C. Alat dan Bahan Penelitian
Kategori