28 Berdasarkan Gambar 4.8 maka dapat ditentukan 5 panjang gelombang
yang akan digunakan. Lima panjang gelombang yang digunakan adalah 227,04 nm pada panjang gelombang ini merupakan titik perpotongan kloramfenikol dan
prednisolon, pada panjang gelombang 243,40 nm merupakan panjang gelombang serapan maksimum prednisolon dimana kloramfenikol memberikan serapan yang
cukup besar, pada panjang gelombang 253,52 nm merupakan titik perpotongan kloramfenikol dan prednisolon, 263,66 nm merupakan titik sebelum mencapai
panjang gelombang serapan maksimum kloramfenikol dimana prednisolon masih memberikan serapan yang cukup besar, pada panjang gelombang 273,80 nm
merupakan panjang gelombang serapan maksimum kloramfenikol dan prednisolon masih memberikan serapan. Pemilihan lima titik panjang gelombang
dapat dilihat pada Gambar 4.8 di atas.
4.4 Penentuan Serapan
Harga serapan merupakan nilai yang menunjukkan seberapa besar konstribusi serapan suatu senyawa terhadap serapan dari campuran senyawa pada suatu
panjang gelombang Andrianto, 2009. Penentuan harga serapan ini dilakukan dengan mengukur serapan masing-
masing larutan baku kloramfenikol dan prednisolon pada panjang gelombang 227,04 nm, 243,40 nm, 253,52 nm, 263,66 nm dan 273,80 nm.
Dalam penelitian ini penentuan harga serapan dilakukan dengan mengoperasikan data serapan pada tiap panjang gelombang terhadap konsentrasi
larutan dalam persamaan regresi linear yang analog dengan persamaan dalam hukum Beer. Persamaan regresi linear adalah :
Y = aX + b
Universitas Sumatera Utara
29 Pada persamaan regresi linear tersebut, Y menunjukkan serapan A, a
menunjukkan serapan, X adalah konsentrasi c dalam mg 100ml, sedangkan b adalah konstanta.
Hasil pengamatan nilai serapan kloramfenikol dan prednisolon dapat dilihat pada
Table I-XII : Tabel 4.1 Data perhitungan serapan Kloramfenikol Pengulangan I
Konsentrasi µgMl
λ1 λ2
λ3 λ4
λ5 227.40 nm
243.40 nm 253.52 nm 263.66 nm 273.80 nm 0.0000
0.0000 0.0000
0.0000 0.0000
12 0.191
0.141 0.220
0.325 0.379
14 0.222
0.165 0.256
0.378 0.440
16 0.257
0.190 0.294
0.434 0.504
18 0.279
0.209 0.328
0.484 0.562
20 0.309
0.231 0.362
0.535 0.622
a = 0.01556 a=0.01162 a=0.01818 a=0.02685 a=0.03119
b = 0.0023 b=0.0011
b=0.0009 b=0.0014
b=0.0020 r = 0.9994
r = 0.9997 r =0.9999 r =0.9999
r=0.9999
Tabel 4.2 Data perhitungan serapan Kloramfenikol Pengulangan I
Konsentrasi µgMl
λ1 λ2
λ3 λ4
λ5 227.40 nm
243.40 nm 253.52 nm 263.66 nm 273.80 nm 0.0000
0.0000 0.0000
0.0000 0.0000
12 0.183
0.131 0.211
0.319 0.376
14 0.213
0.154 0.247
0.370 0.436
16 0.234
0.169 0.278
0.420 0.496
18 0.266
0.195 0.314
0.474 0.559
20 0.298
0.217 0.349
0.524 0.616
a = 0.01480 a=0.01080 a=0.01743 a=0.02624 a=0.03090
b = 0.0016 b=0.0004
b=0.0007 b=0.0013
b=0.0019 r = 0.9995
r = 0.9996 r =0.9999 r=0.99995 r=0.9999
Universitas Sumatera Utara
30
Tabel 4.3 Data perhitungan serapan Kloramfenikol Pengulangan III
Konsentrasi µgmL
λ1 λ2
λ3 λ4
λ5 227.40 nm
243.40 nm 253.52 nm 263.66 nm 273.80 nm 0.0000
0.0000 0.0000
0.0000 0.0000
12 0.203
0.147 0.224
0.327 0.378
14 0.219
0.163 0.257
0.380 0.442
16 0.251
0.186 0.291
0.429 0.499
18 0.288
0.212 0.330
0.485 0.564
20 0.315
0.233 0.363
0.536 0.624
a = 0.01574 a=0.01165 a=0.01819 a=0.02688 a =0.0314
b = 0.0027 b=0.0015
b=0.0016 b= 0.0011
b=0.0013 r = 0.9986
r = 0.9994 r =0.9998 r =0.9999
r=0.9999
Tabel 4.4 Data perhitungan serapan Kloramfenikol Pengulangan IV
Konsentrasi µgmL
λ1 λ2
λ3 λ4
λ5 227.40 nm
243.40 nm 253.52 nm 263.66 nm 273.80 nm 0.0000
0.0000 0.0000
0.0000 0.0000
12 0.186
0.140 0.221
0.325 0.377
14 0.222
0.165 0.256
0.378 0.440
16 0.257
0.190 0.294
0.432 0.502
18 0.272
0.210 0.324
0.482 0.562
20 0.301
0.224 0.357
0.532 0.622
a = 0.01524 a=0.01146 a=0.01797 a=0.02671 a=0.03118
b = 0.0031 b=0.0020
b=0.0024 b=0.0020
b=0.0014 r = 0.9981
r = 0.9987 r =0.9996 r =0.9999
r=0.99995 Table 4.5 Data perhitungan serapan kloramfenikol Pengulangan V
Konsentrasi µgmL
λ1 λ2
λ3 λ4
λ5 227.04 nm
243.40 nm 253.52 nm 263.66 nm 273.80 nm 0.0000
0.0000 0.0000
0.0000 0.0000
12 0.186
0.140 0.221
0.325 0.377
14 0.222
0.165 0.256
0.378 0.440
16 0.249
0.184 0.289
0.428 0.499
18 0.279
0.210 0.328
0.485 0.562
20 0.309
0.231 0.362
0.535 0.622
a= 0.01550 a=0.01158
a=0.01812 a=0.02680 a=0.03115 b = 0.0007
b=0.0005 b=0.0011
b=0.0011 b=0.0014
r= 0.9998 r = 0.9998
r =0.9999 r =0.9999
r=0.99996
Universitas Sumatera Utara
31
Tabel 4.6 Data perhitungan serapan Kloramfenikol Pengulangan VI
Konsentrasi µgmL
λ1 λ2
λ3 λ4
λ5 227.40 nm
243.40 nm 253.52 nm 263.66 nm 273.80 nm 0.0000
0.0000 0.0000
0.0000 0.0000
12 0.186
0.140 0.221
0.325 0.377
14 0.222
0.165 0.256
0.378 0.440
16 0.245
0.179 0.284
0.424 0.495
18 0.284
0.207 0.327
0.486 0.565
20 0.304
0.225 0.358
0.533 0.623
a = 0.01542 a=0.01132 a=0.01794 a=0.02673 a =0.0311
b = 0.0013 b=0.0018
b=0.0017 b=0.0013
b=0.0008 r = 0.9992
r = 0.9991 r =0.9996 r =0.9998
r=0.9999
Tabel 4.7 Data perhitungan serapan Prednisolon Pengulangan I
Konsentrasi µgmL
λ1 λ2
λ3 λ4
λ5 227.40 nm
243.40 nm 253.52 nm 263.66 nm 273.80 nm 6
0.096 0.271
0.231 0.165
0.081 8
0.248 0.360
0.309 0.219
0.106 10
0.331 0.459
0.393 0.281
0.141 12
0.386 0.547
0.468 0.333
0.164 14
0.436 0.630
0.538 0.381
0.183 a = 0.03349
a=0.04531 a=0.03874 a=0.02749 a=0.01337 b = -0.0296
b=0.0002 b=0.0004
b=0.0008 b=0.0011
r = 0.9739 r = 0.9999 r =0.9998
r =0.9997 r=0.9982
Tabel 4.8 Data perhitungan serapan Prednisolon Pengulangan II
Konsentrasi µgmL
λ1 λ2
λ3 λ4
λ5 227.40 nm
243.40 nm 253.52 nm 263.66 nm 273.80 nm 6
0.175 0.267
0.228 0.162
0.079 8
0.235 0.349
0.297 0.209
0.100 10
0.308 0.451
0.383 0.271
0.132 12
0.358 0.526
0.448 0.316
0.152 14
0.416 0.611
0.521 0.368
0.178 a = 0.02997
a=0.04381 a=0.03732 a=0.02634 a=0.01272 b =-0.0011
b=0.0022 b=0.0019
b=0.0015 b=0.0009
r = 0.9994 r = 0.9997 r =0.9997
r =0.9996 r=0.9993
Universitas Sumatera Utara
32
Tabel 4.9 Data perhitungan serapan Prednisolon Pengulangan III
Konsentrasi µgMl
λ1 λ2
λ3 λ4
λ5 227.40 nm
243.40 nm 253.52 nm
263.66 nm 273.80 nm
6 0.226
0.287 0.245
0.177 0.094
8 0.287
0.379 0.324
0.232 0.118
10 0.350
0.467 0.399
0.286 0.145
12 0.410
0.557 0.476
0.340 0.171
14 0.470
0.6480 0.554
0.396 0.196
a = 0.03346 a=0.04619
a=0.03949 a=0.02819
a=0.01395 b = 0.0116
b=0.0048 b=0.0039
b=0.0036 b=0.0044
r = 0.9982 r = 0.9998
r =0.9998 r =0.9998
r=0.9985
Tabel 4.10 Data perhitungan serapan Prednisolon Pengulangan IV
Konsentrasi µgmL
λ1 λ2
λ3 λ4
λ5 227.40 nm
243.40 nm 253.52 nm 263.66 nm 273.80 nm
6 0.175
0.267 0.228
0.162 0.079
8 0.235
0.349 0.297
0.209 0.100
10 0.308
0.451 0.383
0.271 0.132
12 0.358
0.526 0.448
0.316 0.152
14 0.416
0.611 0.521
0.368 0.178
a = 0.02997 a= 0.04381 a =0.03732 a =0.02634 a =0.01272
b =-0.0011 b=0.0022
b=0.0019 b=0.0015
b=0.0009 r = 0,9994
r = 0,9997 r = 0,9997
r = 0,9996 r = 0,9993
Universitas Sumatera Utara
33
Tabel 4.11 Data perhitungan serapan Prednisolon Pengulangan V
Konsentrasi µgmL
λ1 λ2
λ3 λ4
λ5 227.40 nm
243.40 nm 253.52 nm
263.66 nm 273.80 nm
6 0.174
0.263 0.224
0.160 0.078
8 0.235
0.349 0.297
0.209 0.100
10 0.291
0.438 0.373
0.263 0.126
12 0.353
0.521 0.443
0.313 0.151
14 0.416
0.611 0.521
0.368 0.178
a = 0.02961 a=0.04356
a=0.03711 a=0.02618
a=0.01262 b=-0.0019
b=-0.0006 b=0.0004
b=0.0007 b=0.0003
r = 0.9999 r=0.99997
r=0.99996 r =0.9999
r=0.9998
Tabel 4.12 Data perhitungan serapan Prednisolon Pengulangan VI
Konsentrasi µgmL
λ1 λ2
λ3 λ4
λ5 227.40 nm
243.40 nm 253.52 nm 263.66 nm 273.80 nm 6
0.214 0.286
0.245 0.176
0.091 8
0.287 0.379
0.324 0.232
0.118 10
0.354 0.471
0.403 0.288
0.146 12
0.419 0.564
0.483 0.346
0.176 14
0.475 0.654
0.559 0.399
0.201 a = 0.03424
a = 0.04675
a =0.03998
a =0.02855
a =0.01440
b = 0.0062 b=0.0028
b=0.0025 b=0.0022
b=0.0020 r = 0.9992
r = 0.9999 r =0.9999
r =0.9999 r=0.9996
Nilai serapan a yang dipakai adalah nilai serapan dari kloramfenikol pada pengulangan V dan prednisolon pada pengulangan V. Pemilihan nilai
serapan ini a dapat ditentukan berdasarkan harga r hitung. Nilai r hitung dibandingkan dengan nilai r tabel dengan taraf kepercayaan 95 dengan df 4
yaitu 0,8114. Berdasarkan data tersebut terlihat bahwa nilai r hitung kloramfenikol dan prednisolon pada pengulangan V lebih besar dari nilai r tabel.
Universitas Sumatera Utara
34 Ini berarti bahwa persamaan tersebut mempunyai linearitas yang baik, karena nilai
r hitung berkisar dengan nilai -1 ≤ r ≤ 1 Rohman, 2007.
Data serapan yang diperoleh ini kemudian digunakan untuk menetapkan kadar kloramfenikol dan prednisolon dalam campuran dengan perhitungan
matriks.
4.5 Hasil Kadar Teoritis Campuran Baku Kloramfenikol dan Prednisolon
