Single Strand Conformation Polymorphism SSCP merupakan suatu metode analisis molekuler yang bertujuan untuk melihat perbedaan jumlah basa
antar fragmen dengan menggunakan gel poliakrilamid, yang masing-masing dapat memisahkan 6-8 basa. Template DNA pada poliakrilamid gel difragmentasi
dengan elektroforesis terkontrol yang disebut GenePhor. Genephor merupakan horizontal elektroforesis kering, dengan suhu yang dapat diatur sedemikian rupa,
sehingga dapat memisahkan DNA pada tegangan tinggi tanpa menimbulkan panas yang berlebihan pada poliakrilamid gel. Metode pewarnaan menggunakan metode
silver stainning. Hasil dari SSCP sangat dipengaruhi dan ditentukan oleh konsentrasi DNA sampel serta proses ekstraksi, amplifikasi, purifikasi dan
restriksi serta optimasi dalam pelaksanaan stainning. Teknik ini merupakan salah satu teknik analisis polimorfisme dan banyak diterapkan untuk genotiping dengan
hasil cukup akurat.
Analisis Keragaman Genetik
Keragaman genetik dapat digunakan sebagai parameter dalam mempelajari genetika populasi dan genetika evolusi. Tingkat keragaman dalam
populasi dapat digambarkan dari frekuensi alel yang merupakan rasio relatif suatu
alel terhadap keseluruhan alel yang ditemukan dalam satu populasi. Informasi keragaman genetik suatu populasi menggunakan beberapa lokus, dapat
digambarkan melalui nilai heterozigositas Nei Kumar 2000. Identifikasi keragaman genetik dalam suatu populasi berguna untuk
mengetahui dan melestarikan bangsa-bangsa dalam populasi terkait dengan penciri suatu sifat khusus. Populasi alami biasanya memiliki keragaman genetik
yang tinggi. Informasi keragaman genetik suatu bangsa akan sangat bermanfaat bagi keamanan dan ketersediaan bahan pangan yang berkesinambungan Blott et
al. 2003.
BAHAN DAN METODE Tempat dan Waktu
Penelitian dilaksanakan mulai bulan Juni 2010 hingga Januari 2011. Lokasi pengambilan sampel darah dan susu kambing dilakukan di PT Fajar Taurus Dairy
Farm dan PT Elang 45. Analisis keragaman gen dilaksanakan di Laboratorium Genetika Molekuler Bagian Pemuliaan dan Genetika Ternak Fakultas Peternakan
IPB, sementara pengujian kualitas susu dan produk olahan susu dilaksanakan di Laboratorium Pengolahan Susu Bagian THT Fakultas Peternakan IPB dan
Laboratorium Terpadu IPB.
Materi Sampel Darah Kambing
Ternak yang digunakan dalam penelitian ini adalah kambing Saanen dan Peranakan Etawah yang berjumlah 89 ekor. Pengambilan sampel darah dilakukan
untuk masing-masing individu ternak kambing. Alat dan bahan untuk pengambilan sampel darah berupa venoject, vacutainer dan etanol. Ekstraksi
DNA menggunakan metode fenol kloroform Sambrook et al.1989.
Primer
Primer adalah DNA utas tunggal dengan ukuran pendek, biasanya 18 sampai 25 basa, yang akan menempel pada DNA cetakan pada tempat yang
spesifik. Primer berguna untuk mengapit sekuen DNA target pada reaksi PCR. Pada penelitian ini, primer forward dan reverse untuk mengamplifikasi gen GH
ditunjukkan pada Tabel 3. Tabel 3. Primer untuk amplifikasi gen GH
No. Sekuens 5-3
Pustaka 1.
Forward GGA AGG GAC CCA ACA ATG CCA Kioka et al.
1989 2.
Reverse CTG CCA GCA GGA CTT GGA GC
Bahan dan Alat Analisis PCR
Bahan yang digunakan untuk PCR adalah DNA, pereaksi PCR Master mix- Genaid yang terdiri atas enzim tag DNA polymerase, 10x buffer, larutan
MgCl
2,
dNTPs, primer forward dan reverse fragmen gen GH. Peralatan yang
digunakan adalah pipet tip, mikropipet, microtube eppendorf, microsentrifuge dan mesin thermocycler.
Bahan dan Alat Analisis PCR-SSCP
Bahan yang digunakan untuk analisis PCR-SSCP adalah air destilasi steril, akrilamida 30, 5 x TBE, TEMED tetramethylendiamine dan APS ammonium
persulfat 10 , loading dye dan marker 100 pb Biorad. Alat yang digunakan adalah dua buah kaca untuk cetakan gel, pipet berskala, tabung reaksi, sisir khusus
untuk sumur, pipet mikro Eppendorf 2 µl dengan tipsnya dan power supply 200
Volt.
Bahan dan Alat Pewarnaan Perak
Bahan yang digunakan adalah larutan yang terdiri atas 0.2 gram AgNO
3
; 80 µl NaOH 10 N ; 0.8 ml NH
4
OH dalam 200 ml air destilasi, larutan 6 gram NaOH
dengan 200 µl formaldehida dan asam asetat 200 µl dalam 200 ml air. Alat yang digunakan adalah gelas ukur, labu Erlenmeyer dan water-bath shaker.
Bahan dan Alat Analisis Kualitas Susu Kambing dan Mentega
Sampel susu diambil dari ternak kambing Saanen dan PE. Pengolahan susu yang dilakukan adalah pemisahan lemak susu dengan separator krim.
Sebelum dilakukan pengolahan susu dilakukan pengujian terhadap kualitas susu segar. Bahan yang digunakan untuk analisis susu dan mentega susu kambing
antara lain H
2
SO
4
, alkohol 70, Aquadest, NaOH 0.1 N, amilalkohol, fenolftalin, NaOH, kalium oksalat, K
2
SO
4
, HgO dan formalin. Peralatan yang digunakan antara lain laktodensimeter, butirometer, pipet volumetric, pH-meter, inkubator,
autoklaf, timbangan analitik, termometer, labu Kjeldahl, alat titrasi, alat-alat gelas, sentrifuse, wadah plastik, desikator, cawan porselen, tanur, alat ekstraksi Sokhlet,
oven 105ºC dan penangas air.
Metode I.
Identifikasi Keragaman Molekuler a.
Pengambilan Sampel Darah Sulandari Zein 2003
Pengambilan sampel darah kambing dilakukan menggunakan venoject pada bagian vena jugularis sebanyak 2 ml. Sampel darah selanjutnya dicampur dengan
etanol 70 untuk menghindari kerusakan sel-sel darah.
b. Ekstraksi DNA Sambrook 1989
DNA diekstraksi dengan menggunakan metode fenol kloroform Sambrook et al.1989. Sampel darah total yang disimpan dalam etanol 95 disentrifugasi
3500 rpm selama 5 menit. Endapan sel-sel darah yang diperoleh dicuci dengan buffer TE sebanyak
2 kali. Sekitar 100 µl sel-sel darah yang telah bebas dari etanol disuspensikan dengan 1xSTE sampai volume mencapai 350 µl. Sel-sel
darah kemudian dilisis dengan 20 µl proteinase K 10 mgml dan 40 µl 10
SDS. Campuran ini dikocok pelan-pelan selama 2 jam pada suhu 55
o
C. Pemurnian DNA dilakukan dengan metode fenol-kloroform, yaitu dengan
menambahkan 110 volume 5 M NaCl, 1 x volume larutan fenol, dan 1 x volume kloroform iso amil alkohol 24:1, kemudian dikocok pelan-pelan pada suhu
ruang selama 2 jam. Fase DNA dipisahkan dari fase fenol dengan sentrifugasi pada kecepatan 7000 rpm selama 5 menit. Molekul DNA diendapkan dengan
menambahkan 110 x volume 5 M NaCl dan 2 x volume etanol absolut. Endapan DNA yang dihasilkan selanjutnya dicuci dengan etanol 70 kemudian
diendapkan lagi dengan kecepatan 7000 rpm selama 5 menit. Sisa etanol dibuang dan diuapkan dengan menggunakan pompa vakum. DNA selanjutnya dilarutkan
dengan 80 µl 80 buffer TE.
c. Amplifikasi Gen dengan Tehnik PCR
Teknik PCR dilakukan untuk memperbanyak amplifikasi fragmen gen menjadi 2
n
copy. Dengan perbanyakan ini maka fragmen gen target dapat divisualisasikan pada gel elektroforesis.
Reaksi PCR dilakukan dengan volume total 25 µl dari campuran larutan yang terdiri atas
2 µl DNA genom, 1 U enzim taq polimerase dan 10X buffernya New England Biolab; 2 mM dNTP mix; 2.5 mM MgCl
2
dan dH
2
O steril. Kondisi reaksi PCR dalam mesin thermocycler dirancang dengan suhu pradenaturasi 94
o
C selama 4 menit, selanjutnya 30 siklus reaksi yang terdiri atas denaturasi 95
o
C selama 30 detik, annealing suhu spesifik primer selama 1 menit, perpanjangan
72
o
C selama 1 menit. Pemanjangan akhir pada suhu 72
o
C selama 5 menit. Suhu annealing untuk primer gen GH 60
o
C.
d. Genotiping Teknik PCR-SSCP Tegelstrom 1992
Genotiping dengan teknik SSCP menggunakan elektroforesis gel poliakrilamid 10. Gel dibuat dengan cara pencampuran 14 ml air destilata; 2.5
ml larutan 5 x TBE; 8,3 ml larutan akrilamid 30; 15 µl larutan TEMED dan 150 µl APS 10. Sebanyak 2 µl produk PCR dicampur dengan + 25 µl loadying dye
bromthymol blue 0.01, xilene cyanol 0.01 dan gliserol 50. Elektroforesis dilakukan pada tegangan konstan 200 volt selama 16 jam. Setelah elektroforesis
selesai, gel diambil untuk dilakukan pewarnaan perak.
d. Visualisasi Pita DNA Tegelstrom 1992
Visualisasi pola pita hasil SSCP menggunakan metode silver stainning atau pewarnaan perak. Tahapan pewarnaan perak yaitu gel dicuci secara bertahap
sebagai berikut: dengan larutan AgNO
3
0.2 gram, 80 µl NaOH 10 N, 800µl ammonia dalam 200 ml air destilasi selama 8 menit, kemudian dibilas dengan air
destilasi selama 2 menit. Proses memunculkan pita dalam gel melalui gel perendam dalam larutan yang terdiri atas 6 gram NaOH200 ml air destilata
selama 6 menit ditambah 200 µl formaldehid. Setelah pita muncul, larutan asam
asetat dituangkan untuk penghentian aktifitas oksidasi perak oleh formaldehida.
II. Analisis Kualitas Susu Segar
Analisis kualitas susu segar meliputi pemeriksaan BJ, kadar lemak, kadar protein dan bahan kering tanpa lemak.
a. Analisis Berat Jenis Standar Nasional Indonesia 1992
Pengukuran berat jenis dilakukan dengan alat laktodensimeter. Sebanyak 100 ml susu pada suhu antara 20
C dimasukkan kedalam gelas ukur. Laktodensimeter dicelupkan perlahan-lahan. Nilai berat jenis dapat dibaca pada
skala yang tertera pada laktodensimeter, kemudian dilakukan penyetaraan pada suhu 27.5
C. Setiap perbedaan 1 C diatas atau di bawah 27.5
C maka nilai berat jenisnya ditambah atau dikurangi 0.0002.
b. Analisis Kadar Lemak Standar Nasional Indonesia 1992
Pengukuran kadar lemak menggunakan metode Gerber. Sebanyak 10 ml asam sulfat pekat dimasukkan kedalam butirometer, kemudian ditambahkan 10.5
ml susu secara hati-hati melalui dinding mulut butirometer dan ditambahkan 1 ml amilalkohol. Setelah butirometer ditutup dengan sumbat karet dan dihomogenkan,
butirometer dimasukkan ke dalam penangas air pada suhu 60
º
C selama ± 10 menit. Tahap selanjutnya adalah sentrifugasi dengan menggunakan sentrifuge
Gerber dengan kecepatan 1200 rpm selama 5 menit, kemudian butirometer dimasukkan kembali kedalam penangas air minimal 2 menit. Butirometer
dipegang vertikal dan karet penutup diatur, sehingga tepat pada suatu garis pada skala butirometer dan dibaca persen kadar lemaknya.
c. Analisis Kadar Protein Standar Nasional Indonesia 1992
Dua puluh lima mililiter susu, 1 ml larutan kalium oksalat dan 0.25 fhenolftalin dimasukkan kedalam gelas beker, dicampur hingga homogen,
dibiarkan selama 2 menit. Setelah homogen, campuran dititrasi dengan larutan NaOH dari buret sampai warnanya sama dengan warna standar merah muda,
kemudian larutan formalin sebanyak 2.5 ml ditambahkan kedalam campuran yang telah dititrasi, lalu dikocok hingga warna merah muda hilang, dibiarkan selama 1
menit. Campuran dititrasi kembali dengan NaOH sampai berwarna merah muda. Dihitung dan dicatat jumlah NaOH yang terpakai p ml. Blanko dibuat dengan 10
ml aquades ditambah 0.4 ml kalium oksalat jenuh, 2 ml formalin 40 serta 2-3 tetes fenolftalein 1, lalu dititrasi dengan larutan NaOH 0.1 N sampai terbentuk
warna merah muda dan dicatat banyaknya NaOH 0.1 N yang terpakai q ml.
Kadar Protein dihitung dengan rumus berikut: protein = p-q x 1.95 faktor formol untuk susu kambing
d. Bahan Kering dan Bahan Kering Tanpa Lemak Standar Nasional
Indonesia 1992 Perhitungan dilakukan setelah kadar lemak dan berat jenis diperoleh dengan
rumus: BK = 1.23 L + 2.71 100 BJ – 1
BJ BKTL = BK – L
Keterangan : BK
: Bahan Kering BKTL : Bahan Kering Tanpa Lemak
L : Lemak
BJ : Berat Jenis
III. Analisis Kualitas Mentega
Analisis kualitas kimia mentega yang dilakukan meliputi nilai pH, bilangan peroksida, kadar lemak, kadar protein, kadar abu, kadar air dan rendemen.
a. Nilai pH Association of Official Analytical Chemist 1995
Pengukuran nilai pH dilakukan dengan pH meter. Sebanyak 50 gram sampel mentega dilelehkan, kemudian suhunya diturunkan sesuai dengan suhu ruang. pH
meter terlebih dahulu distandarisasi dengan buffer untuk pH 4 dan pH 7. Pengukuran dilakukan dengan mencelupkan elektroda pH meter kedalam sampel
dan skala di baca setelah jarum penunjuk berada pada posisi tetap.
b. Bilangan Peroksida SNI 01 -3555 -1998
Sebanyak 5 gram sampel ditimbang dan diletakkan dalam labu Erlenmeyer. Ditambahkan 30 ml pelarut terdiri atas 60 asam asetat glasial dan 40
kloroform, lalu dihomogenkan. Ditambahkan 0.5 ml larutan potasium iodida jenuh lalu dihomogenkan, didiamkan selama 2 menit dalam ruangan gelap.
Ditambahkan 30 ml air destilata dan selanjutnya larutan di titrasi dengan larutan sodium tiosulfat 0.1 N.
Bilangan peroksida = A x N x B x 100 G Keterangan :
A = ml sodium tiosulfat yang dipakai N = normalitas sodium tiosulfat
B = bobot equivalen oksigen G = berat sampel gram
c. Kadar Lemak Association of Official Analytical Chemist 1995
Labu lemak yang ukurannya sesuai dengan alat ekstraksi Soklet yang akan digunakan dikeringkan dalam oven, didinginkan dalam desikator dan ditimbang.
Lima gram contoh ditimbang dalam selongsong lemak kemudian ditutup dengan kertas bebas lemak secukupnya, kemudian direflux selama 6 jam. Pelarut yang
ada dalam labu didestilasi kemudian pelarutnya ditampung. Selanjutnya labu lemak yang berisi lemak hasil ekstraksi dipanaskan dalam oven selama 2 jam
sampai berat tetap dan didinginkan dalam desikator. Labu beserta lemak tersebut ditimbang.
Kadar lemak = bobot labu lemak akhir – bobot labu lemak awal x 100 Bobot sampel g
d. Kadar Protein Association of Official Analytical Chemist 1995
Metode yang digunakan adalah mikro Kjeldahl. Sampel sebanyak 0.1 gram dimasukkan kedalam labu Kjeldahl, lalu ditambahkan 1 g K
2
SO
4
, 40 mg HgO dan 20 ml H
2
SO
4
. Sampel yang diperoleh selanjutnya dididihkan sampai larutan menjadi jernih sekitar 1 jam. Larutan jernih yang diperoleh ini dipindahkan ke
dalam destilasi. Labu Kjeldahl dicuci dengan air 1-2 ml, kemudian air cuciannya dimasukkan kedalam alat destilasi dan ditambahkan 8- 10 ml larutan
NaOH-Na
2
S
2 3
. Dibawah kondensor diletakkan labu Erlenmeyer yang berisi 5 ml larutan
H
3
BO
3
dan 2-4 tetes indikator campuran metil merah 0.2 dalam alkohol dan metil biru 0.2 dalam alkohol dengan perbandingan 1:2 ujung kondensor harus
terendam dalam larutan H
3
BO
3.
Isi labu Erlenmeyer diencerkan sampai 50 ml, lalu dititrasi dengan HCl 0.02 N sampai terjadi perubahan warna menjadi abu-abu.
Blanko dipersiapkan dengan cara yang sama, tetapi sebagai ganti mentega digunakan aquades.
N = ml HCL – ml blanko x N HCL x 14.007 x 100 Berat sampel g
protein = N x 6.38
e. Kadar Abu Association of Official Analytical Chemist 1995
Pengukuran kadar abu menggunakan metode pengabuan dalam tanur. Sejumlah 5 gram sampel dimasukkan dalam cawan porselen yang telah
dikeringkan dan telah diketahui beratnya. Terlebih dahulu sampel dipanaskan pada hot plate untuk menguapkan sebanyak mungkin zat organik yang ada
sampai sampel tidak berasap lagi. Cawan selanjutnya dipindahkan kedalam tanur dan dipanaskan pada suhu 300º C sampai semua karbon berwarna keabuan,
kemudian suhu dinaikkan sampai 450º C selama 5 jam sampel berwarna putih. Cawan dari tanur didinginkan dan ditimbang berat abu yang dihasilkan.
Kadar abu = bobot abu x 100 bobot sampel
f. Kadar Air SNI 01‐2891‐1992
Cawan dikeringkan pada suhu 105º C selama 1 jam, diangkat dan didinginkan dalam desikator kemudian ditimbang. Sampel yang akan ditentukan kadar airnya
ditimbang sebanyak 5 gram dan dimasukkan kedalam cawan. Cawan yang berisi sampel dimasukkan ke dalam oven bersuhu 105º C sampai mencapai berat
konstan 6 jam. Kadar air dihitung berdasarkan persamaan berikut: Kadar air = bobot sampel awal-bobot sampel akhir x 100
Bobot sampel awal
g. Rendemen Mentega Association of Official Analytical Chemist 1995
Besar rendemen dihitung berdasarkan persentase berat produk yang dihasilkan terhadap berat awal bahan yang digunakan.
Rendemen mentega = Bobot mentega x 100 Bobot susu segar
IV. Pembuatan Mentega
Proses pembuatan mentega diawali dengan pemisahan antara krim dan skim susu menggunakan cream separator merek Elecream. Krim yang diperoleh
selanjutnya digunakan sebagai bahan baku pembuatan mentega. Diagram alir pembuatan mentega disajikan pada Gambar 1.
Gambar 1 Diagram alir proses pembuatan mentega Hunziker 2008
Analisis Data Frekuensi Alel dan Genotipe
Keragaman genotipe tiap-tiap individu dapat ditentukan dari pita-pita DNA gen yang ditemukan. Masing-masing sampel dibandingkan berdasarkan pola
migrasi pita yang sama dan dihitung frekuensi alelnya. Frekuensi alel dihitung berdasarkan rumus Nei Kumar 2000 sebagai berikut:
Pemisahan Krim
Kneading Pasteurisasi 85
◦C-15detik
Dinginkan hingga 7 ◦C
Mentega Churning 5-10ºC
n n
n x
i j
ij ii
i
2 2
Keterangan : x
i
= frekuensi alel, n
ii
= jumlah genotipe dari alel ke-i, dan n
ij
= jumlah alel ke-i terpaut alel ke-j j ≠i.
Frekuensi genotipe dapat diperkirakan dengan menghitung perbandingan jumlah genotipe pada populasi. Menggunakan asumsi sebelumnya, maka
frekuensi genotipe A
i
A
i
Χ
ii
dapat dihitung dengan persamaan sebagai berikut : Χ
ii=
n
ii
n Keterangan:
Χ
ii
= frekuensi genotipe
n
ii
= individu yang bergenotipe A
i
A
i
n = jumlah total sampel Kualitas Susu dan Mentega
Analisis perbedaan kualitas susu dan mentega antar genotipe gen GH menggunakan metode analisis General Linear Model GLM dengan bantuan
software SAS 9.1.
HASIL DAN PEMBAHASAN Kondisi Umum Peternakan Kambing Perah
Pengambilan sampel darah dan susu kambing perah berlokasi di dua peternakan yaitu peternakan PT Elang 45 dan
PT Fajar Taurus Dairy Farm. PT Elang 45 terletak di desa Sukajaya, kecamatan Taman Sari, kabupaten Bogor
dengan letak geografis berada pada ketinggian 15- 2500 meter di atas permukaan laut dpl
dengan suhu udara antara 20
o
-30
o
C dengan curah hujan rata-rata pertahun antara 2500 mm sampai lebih dari 5000 mmtahun. PT Fajar Taurus
Dairy Farm yang terletak di jalan Raya Bogor-Sukabumi km 10 jalan Tenjo Ayu, desa Benda, kecamatan Cicurug, kabupaten Sukabumi, secara geografis terletak
pada ketinggian 500-550 dpl dengan suhu udara 19-28
o
C dan curah hujan 3.200 mmtahun. Letak geografis dari PT Elang 45 dan PT Fajar Taurus Dairy Farm
sangat mendukung usaha peternakan, dengan akses pemasaran yang cukup luas karena berada di wilayah Jabodetabek.
PT Elang 45 menempati area seluas 10 ha yang terbagi atas lahan hijauan, perkandangan, tempat pengolahan pakan dan bangunan yang berupa fasilitas
perusahaan. Pemeliharaan kambing perah PE dilakukan secara intensif dengan bentuk kandang panggung tipe koloni, sedangkan pejantan mendapat kandang
individu. Pakan yang diberikan terdiri atas a hijauan : rumput gajah, hijauan pohon, silase, sisa hasil perkebunan dan leguminosa turi, gamal, lamtoro dan b
konsentrat: dedak, bungkil sawit, bungkil kedele, polard, dan jagung yang diperoleh dari Balai Penelitian Ternak Ciawi. Pemerahan susu dilakukan sebanyak
3 kali sehari : pagi hari 06.00 WIB, sore hari 14.00 WIB dan malam hari 20.00 WIB.
PT Fajar Taurus menempati area seluas 50 ha dengan luas bangunan 10 ha, luas hijauan 32 ha dan luas palawija 8 ha. Pemeliharaan ternak kambing perah
Saanen dilakukan secara intensif dengan bentuk kandang panggung tipe koloni dengan kandang pejantan merupakan kandang individu. Pakan yang diberikan
berupa hijauan rumput gajah, leguminosa dan konsentrat polard, bungkil kelapa, dan jagung. Pemerahan susu dilakukan sebanyak 2 kali sehari: pukul
04.00 WIB dan pukul 16.00 WIB.
Studi Polimorfisme pada Gen GH Amplifikasi Gen GH
Amplifikasi ruas gen GH terhadap sampel darah kambing Saanen dan Peranakan Etawah PE menggunakan mesin thermal cycler dengan suhu
denaturasi 95º C, suhu annealing 60º C dan suhu ekstensi 72º C. Panjang produk hasil amplifikasi fragmen gen GH exon 4 adalah 200 bp dengan nomor akses
GenBank D00476 Kioka et al. 1989. Panjang produk PCR dari gen GH yang dihasilkan sesuai dengan yang dilaporkan oleh Mousavizadeh et al. 2009. Hasil
amplifikasi fragmen gen GH kambing Saanen dan PE dirgtf visualisasikan pada gel agarose 1.5, seperti ditampilkan pada Gambar 2.
Gambar 2 Produk PCR gen GH exon 4 200 bp
Identifikasi Gen GH pada Kambing Perah Saanen dan Peranakan Etawah dengan Pendekatan PCR-SSCP
Metode Single Strand Conformation Polymorphism SSCP digunakan untuk identifikasi genotipe atau genotyping gen GH dari kambing Saanen dan PE.
Hasil PCR-SSCP dari gen GH kambing perah menunjukkan sifat yang polymorphic beragam, karena ditemukan lima pita DNA dengan pola migrasi
yang berbeda, yaitu tipe gen CE, BC, BB, CD dan CC. Keragaman ruas gen GH pada kambing perah Saanen dan PE disajikan dalam Gambar 3. Tipe gen CE, BC
dan BB merupakan tipe yang ditemukan pada kedua bangsa kambing Saanen dan PE. Tipe gen CD tidak ditemukan pada populasi kambing Saanen dan tipe gen CC
tidak ditemukan pada populasi kambing PE. Adanya polimorfisme gen GH pada kambing Saanen dan PE mengkonfirmasi keberadaan situs polimorfik kambing
100bp 200bp
perah dari hasil penelitian Mousavizadeh et al. 2009, Marques et al. 2003 dan Malveiro et al. 2001.
CE BC CD BB CC
Gambar 3 Hasil visualisasi produk PCR-SSCP gen GH
Frekuensi Alel dan Genotipe Gen GH
Keragaman genetik dapat dihitung secara kuantitatif berdasarkan nilai frekuensi alel. Frekuensi alel adalah proporsi jumlah suatu alel terhadap jumlah
total alel dalam suatu populasi pada lokus yang sama Nei Kumar 2000. Frekuensi dari masing-masing genotipe pada populasi total dapat diketahui
dengan membagi jumlah sampel yang memiliki tipe genotipe tertentu dengan jumlah sampel total. Hasil analisis frekuensi genotipe dan alel
gen GH kambing Saanen dan PE
dapat dilihat pada Tabel 4. Tabel 4 Frekuensi genotipe dan alel gen GH kambing Saanen dan PE
Kambing Frekuensi Genotipe
Frekuensi Alel BC
BB CC
CD B
C E
D Saanen
0.25 0.25
0.25 0.25
0.40 0.30
0.20 25 25 25 25
40 30 20 PE
0.40 0.30
0.10 0.20
0.25 0.45
0.20 0.10
40 30 10 20 25 45 20 10
Keterangan : n= Jumlah individu ekor
Penelitian mengenai polimorfisme gen GH juga telah dilakukan Mousavizadeh et al. 2009, Marques et al. 2003 dan Malveiro et al. 2001,
yang melaporkan bahwa polimorfisme gen GH juga terjadi pada ekson 4. Berdasarkan hasil penelitian Malveiro et al. 2001 didapatkan bahwa pada
bangsa kambing Algarvia ditemukan 6 genotipe yaitu genotipe AA, BB, CC, DD,
EE dan FF. Genotipe CC memiliki frekuensi tertinggi sebesar 35.2 diikuti
genotipe BB sebesar 27.8. Pada bangsa kambing Saanen didapatkan frekuensi untuk keempat genotip CE, BC, BB, CD dan CC adalah sama yaitu sebesar 25.
Pengaruh Keragaman Gen GH terhadap Kualitas Susu Segar Kambing Saanen dan PE
Kualitas susu kambing Saanen bergenotipe CE, BC, BB dan CC Tabel 5 yang meliputi BJ, lemak, protein, BK dan BKTL pada masing-masing tipe gen
menunjukkan hasil yang tidak berbeda P0.05, demikian pula dengan kualitas susu kambing PE bergenotipe CE, BC, CD dan BB Tabel 6. Hasil penelitian ini
tidak sejalan dengan pendapat Boutinaud et al. 2003 yang menyatakan bahwa keragaman gen GH pada kambing perah berhubungan dengan produksi,
kandungan lemak dan protein susu. Tabel 5 Kualitas susu kambing Saanen berdasarkan tipe gen
Tipe gen N
Lemak Protein
BK BKTL
BJ
---------------------------------------------------------------
CE 11 3.27±1.0
4.45±0.4 11.95±1.4
8.68±0.5 1.030±0.0015
BC 6
3.40±0.4 4.38±0.3
11.87±0.6 8.34±0.1
1.028±0.0040 BB
11 3.21±0.6 4.57±0.3
11.76±0.8 8.48±0.3
1.029±0.0015 CC
7 3.22±0.6
4.53±0.2 11.50±0.8
8.23±0.2 1.028±0.0050
Keterangan : n= Jumlah individu ekor
Tabel 6 Kualitas susu kambing PE berdasarkan tipe gen
Tipe gen N Lemak
Protein BK
BKTL BJ
----------------------------------------------------------- CE
19 4.38±0.9 4.98±0.2
13.40±1.2 9.00±0.4
1.030±0.0017 BC
15 4.12±0.8 4.84±0.2
13.05±1.2 8.92±0.5
1.030±0.0014 CD
1 3.25±0.0
5.23±0.0 11.67±0.0
8.72±0.0 1.031±0
BB 11 3.70±1.2
4.60±0.4 12.32±1.5
8.64±0.4 1.029±0.0011
Keterangan : n = Jumlah individu ekor
Perbedaan hasil penelitian ini dengan penelitian lain disebabkan oleh berbagai faktor antara lain lingkungan meliputi manajemen pemeliharaan,
pakan, daerah atau lokasi dan iklim. Bangsa kambing perah, bagian gen GH yang dianalisa exon, daerah 3’, daerah 5’ dsb, metode yang digunakan RFLP, SSCP
dsb serta jumlah sampel yang dianalisis. Menurut Noor 2002, ternak yang secara genetik unggul tidak akan
menampilkan keunggulan yang optimal jika tidak didukung oleh faktor
lingkungan yang baik pula. Sebaliknya, ternak yang memiliki mutu genetik rendah meski didukung oleh lingkungan yang baik juga tidak akan menunjukkan
produksi yang tinggi. Tabel 7 Komposisi asam lemak susu kambing Saanen
Parameter Rumus
Kimia CC
CE BC
BB ---------------------------------
Asam lemak tidak jenuh tunggal MUFA
Myristoleic acid C14:1
0.1 0.04
0.07 0.05
Palmitoleic acid C16:1
0.8 0.69
0.63 0.61
Oleic acid C18:1
14.95 11.13
11.26 10
Lemak tidak jenuh jamak PUFA
Linoleic acid C18:2
1.31 1.05
1.26 1.24
V-Linolenic Acid C18:3
0.02 Cis-11-Eicosedienoic acid
C20:1 0.03
0.05 0.03
0.04 Aracchidonic acid
C20:4 0.19
0.1 0.2
0.11 Cis-5,8,11,14,17-
Eicosapentaenoic acid EPA C20:5
0.04 0.05
0.10 0.06
Cis-4,7,10,13,16,19- Docosahexaenoic acid DHA
C22:6 0.03
0.05 0.03
Asam Lemak Jenuh Caproic acid
C6:0 5.66
6.12 4.31
5.36 Caprilic acid
C8:0 2.44
2.59 2.1
2.45 Capric acid
C10:0 6.56
6.81 7.11
6.76 Lauric acid
CI2:0 2.71
2.42 3.43
2.71 Myristic acid
C14:0 6.34
4.65 6.19
5.8 Palmitic acid
C16:0 14.92
15.14 15.43
14.2 Heptadecanoic acid
C17:0 0.59
0.46 0.51
0.47 Stearic acid
C18:0 4.85
6.74 5.41
7.82 Lemak merupakan komponen utama dalam pembuatan mentega susu
kambing. Kandungan lemak susu dari kambing-kambing Saanen yang bergenotipe CE, BC, BB dan CC tidak memiliki perbedaan P 0.05, demikian
juga dengan kadar lemak susu kambing PE yang bergenotipe CE, BC, BB dan CD tidak memiliki perbedaan P 0.05. Kadar lemak susu kambing Saanen dan PE
telah memenuhi Standar Nasional Indonesia, menurut SNI 01-3141-1998, dengan nilai minimal 2.8 . Berdasarkan standar kualitas susu kambing di negara
Thailand lemak susu kambing Saanen yang bergenotipe tipe gen CE, BC, BB dan CC termasuk kategori “standar” dengan kadar lemak antara 3.2 – 3.4 sedangkan
susu kambing peranakan Etawah masuk kedalam kategori ‘baik’ hingga ‘premium’.
Berdasarkan hasil analisis asam lemak pada susu kambing Saanen terhadap genotipe CE, BC, BB dan CC, maka dapat diketahui bahwa terdapat
sejumlah perbedaan komposisi asam lemak susu pada masing-masing tipe gen. Asam lemak nervonik hanya dijumpai pada susu kambing Saanen dengan gen GH
bergenotipe CE, selain itu pada genotipe CE tidak dijumpai asam lemak tak jenuh V-linolenik dan dokosaheksaenoik yang tidak terdapat pada salah satu genotipe
CE tetapi dijumpai pada genotipe lainnya. Komposisi asam lemak susu kambing Saanen menurut genotipe berbeda dapat dilihat pada Tabel 7.
Secara umum, jumlah kandungan asam lemak tidak jenuh jamak PUFA pada susu kambing Saanen bergenotipe BC lebih besar dari susu kambing
Saanen bergenotipe CC, CE dan BB Tabel 7. Jumlah tersebut lebih rendah dari total asam lemak rantai pendek yang terdapat dalam susu sapi dan lebih tinggi dari
total asam lemak rantai pendek yang terdapat dalam ASI. Rendahnya kandungan asam lemak rantai pendek yang terukur dapat disebabkan asam lemak butirat yang
tidak ikut dihitung. Hal ini disebabkan kromatogram untuk asam lemak tersebut berhimpit dengan fase gerak yang digunakan sehingga mempersulit pembacaan
dan perhitungan jumlah asam lemak butirat Rozali 2010. DHA adalah komponen terbesar dari long-chain polyunsaturated fatty acids
LC-PUFA. LC-PUFA harus ditambahkan pada makanan. DHA dalam komponen LC-PUFA penting untuk pembentukan jaringan saraf pusat dan sinap,
sedangkan AA arachidonic acid berperan sebagai neurotransmitter sebagai suatu bentuk asam lemak yang essensial Crawford 2000.
Asam lemak esensiel terdiri atas asam linoleat AL atau linoleic acid LA, asam linolenat ALN atau a-linolenic acid ALA serta asam arachidonic atau
arachidonic acid AA. Asam lemak ini tidak bisa dibuat oleh tubuh baik dari asam lemak lain maupun dari karbohidrat ataupun asam amino. Asam arachidonat
dapat dibuat dari asam linolenat seri n-6, karenanya yang dianggap sebagai asam lemak esensiel hanyalah asam lemak linolenat dan asam lemak linoleat Innis
2000. Lemak mempunyai pengaruh penting terhadap rasa lezat, khususnya
terhadap aroma dan mouthfeel suatu makanan. Jumlah dan kualitas lemak pada asupan makanan berhubungan dengan kesehatan manusia. Asam lemak jenuh
ALJ yang direkomendasikan dalam asupan makanan adalah tidak lebih dari 10 dari total energi, karena asupan ALJ yang lebih dari 15 dari total energi
berhubungan dengan peningkatan kadar kolesterol darah dan sedikitnya jumlah aktivitas reseptor LDL yang berhubungan dengan penyakit jantung koroner
Herdmann et al. 2010.
Kualitas Susu Kambing Perah
Definisi susu segar menurut SNI 01-1341-1998 adalah cairan yang berasal dari ambing yang sehat yang diperah dengan cara pemerahan yang benar, tidak
mengalami proses penambahan atau pengurangan suatu komponen apapun dan tidak mengalami proses pemanasan Dewan Standarisasi Nasional 1998. Kualitas
susu dipengaruh oleh beberapa faktor yaitu bangsa, pakan, waktu pemerahan, penyakit, genetik, umur, tingkat laktasi dan keadaan iklim.
Berdasarkan hasil analisis General Linear Model GLM terhadap kambing Saanen, tidak terdapat perbedaan P0
. 05 antara umur laktasi terhadap
semua parameter lemak, protein, BK, BKTL dan berat jenis Tabel 8.
Tabel 8 Rataan kualitas susu kambing Saanen berdasarkan laktasi
Laktasi N
Lemak Protein
BK BKTL
BJ
-----------------------------------------------------------------------
2 17
3.32 ±0.75
4.62±0.3 11.83
b
±0.92 8.45±0.3
1.029±0.0015 3
6 3.40
±1.10 4.82±0.3
11.79
a
±1.66 8.57±0.6
1.029±0.0016 4
6 3.11
±0.21 4.22±0.3
11.41
b
±0.42 8.25±0.1
1.028±0.0005 5
4 3.40
±0.35 4.25±0.4
12.38
a
±0.82 8.80±0.4
1.030±0.0015 7
2 3.32
±0.53 4.60±0.04
10.64
b
±0.14 8.32±0.4
1.029±0.0016
Keterangan: angka dengan huruf berbeda pada kolom yang sama adalah berbeda nyata P0.05. n= jumlah individu ,BK= Berat kering, BKTL= Berat kering tanpa lemak
Puncak laktasi terdapat pada laktasi ke empat dan umumnya produksi susu cenderung meningkat dengan bertambahnya jumlah laktasi. Hal ini sesuai
dengan pernyataan Atabany 2001 bahwa produksi susu kambing akan mencapai puncak pada laktasi ketiga hingga lima, atau umur 5 sampai 7 tahun. Menurut
Hale et al. 2002 puncak laktasi seekor ternak dipengaruhi tingkat perkembangan kelenjar ambing serta kelengkapan perangkat sintesisnya pada awal laktasi.
Faktor lain pendukung produksi susu adalah tersedianya prekursor untuk sintesis susu baik yang berasal dari bahan makanan maupun dari mobilisasi cadangan
tubuh. Hasil analisis General Linear Model GLM terhadap kambing PE
menunjukan hasil yang tidak berbeda P0 .
05 terhadap semua parameter. Rataan kualitas susu kambing Peranakan Etawah berdasarkan laktasi ke 2 dan 3 disajikan
pada Tabel 9.
Tabel 9 Rataan kualitas kambing Peranakan Etawah berdasarkan laktasi
Laktasi N Lemak
Protein BK
BKTL BJ
------------------------------------------------------------- 2
19 4.1±0.90
4.85±0.39 12.90±1.51
8.88±0.56 1.030±0.0015
3 27
4.1±1.03 4.85±0.35
12.99±1.28 8.88±0.43
1.030±0.0015
Berat Jenis
Berat jenis susu lebih berat dari air karena selain air 85-86 terdapat kandungan bahan kering berupa protein, lemak, mineral dan vitamin sekitar 13-
14. Rataan berat jenis susu kambing Saanen yaitu 1.028-1.030. Sementara rataan berat jenis susu kambing Peranakan Etawah yaitu 1.030. Nilai berat jenis
susu kambing Saanen serta Peranakan Etawah pada penelitian ini telah memenuhi standar nilai berat minimum yang ditetapkan oleh Dewan Standarisasi Nasional
DSNI dalam SNI susu segar yaitu 1.028. Berat jenis susu kambing dipengaruhi oleh bahan kering dan bahan kering
tanpa lemak. Berat jenis susu kambing Saanen pada laktasi ke 5 lebih tinggi dibanding laktasi ke 2, 3, 4 dan 7. Menurut Rahman et al. 1992 berat jenis susu
dipengaruhi oleh kandungan bahan kering didalam susu, sehingga kenaikan bahan kering akan menaikkan berat jenis susu.
Protein
Hasil rataan kadar protein susu kambing Saanen 4.22-4.82 maupun PE 4.85 menunjukkan nilai yang lebih besar dari ketentuan SNI 01-1341-1998 yaitu
minimal 2.70 dan Thai Agricultural Standar 200801-1341-1998 sebesar 3.70. Kadar protein susu pada kambing Saanen dan Peranakan Etawah berdasarkan
umur laktasi tidak terdapat perbedaan P0.05. Jenis pakan dapat mempengaruhi kadar protein susu, pada penelitian ini
pakan yang diberikan berupa hijauan dan konsentrat. Berdasarkan hasil penelitian Sukarini 2006 kadar protein susu dari induk kambing yang mendapat tambahan
konsentrat cenderung lebih tinggi dari pada kontrol. Hal ini dimungkinkan karena dengan tambahan konsentrat, energi yang tersedia menjadi lebih banyak untuk
pembentukan asam amino yang berasal dari protein mikroba rumen. Kualitas pakan yang baik akan mempengaruhi kandungan solid non fat dalam susu, protein
adalah salah satu komponen solid non fat Rahman et al. 1992.
Lemak
Berdasarkan hasil analisis General Linear Model GLM, kadar lemak pada produksi susu kambing Saanen laktasi ke-3 dan 5 berbeda nyata dengan kadar
lemak susu laktasi ke-2, 4, dan 7, sedangkan untuk parameter lainnya protein, BK, BKTL dan produksi susu menunjukkan hasil yang tidak berbeda P0,05.
Hasil analisis General Linear Model GLM kadar lemak susu kambing Peranakan Etawah terhadap umur laktasi ke 2 dan 3 menunjukkan hasil yang tidak berbeda
P0,05. Menurut Sukarini 2004 kadar lemak susu merupakan komponen paling mudah berubah dan sangat bergantung pada serat kasar makanan. Serat
kasar yang rendah akan menghasilkan asam asetat yang rendah, sehingga lemak susu yang dihasilkan juga rendah, karena asetat merupakan bahan utama
pembentukan lemak susu McDonald et al. 2002. Hasil rataan kadar lemak susu kambing Saanen 3.32-3.40 dan Peranakan
Etawah 4.10 menunjukkan nilai yang lebih besar dari ketentuan SNI 01-1341- 1998 yaitu minimal 3 . Berdasarkan Thai Agricultural Standar 2008 01-1341-
1998 maka komposisi lemak kambing Saanen termasuk kedalam kategori
‘standar’ sedangkan komposisi lemak kambing Peranakan Etawah termasuk kategori ‘premium’.
Bahan Kering dan Bahan Kering Tanpa Lemak
Kandungan bahan kering laktasi ke 3 dan 5 pada susu kambing Saanen lebih tinggi P 0.05 sedangkan kandungan bahan kering tanpa lemak susu kambing
Saanen pada berbagai tingkat laktasi menunjukkan tidak berbeda P0.05. Kandungan bahan kering yang tinggi pada laktasi ke 3 dan 5 dipengaruhi oleh
kadar lemak. Kandungan bahan kering susu kambing Peranakan Etawah laktasi ke 2 dan 3 menunjukkan hasil yang tidak berbeda P0.05 .
Kandungan bahan kering dan bahan kering tanpa lemak pada susu kambing Saanen dan Peranakan Etawah menunjukkan nilai yang lebih besar dari ketentuan
dalam SNI 01-3141-1998 yaitu bahan kering minimal 11, sedangkan kadar bahan kering tanpa lemak minimal 8.0. Hasil analisis kualitas susu kambing
Saanen dan Peranakan Etawah telah memenuhi standar susu segar berdasarkan SNI 01-3141-1998. Berdasarkan Thai Agricultural Standar 2008, hasil analisis
kualitas susu kambing Saanen memasuki kategori ‘standar’ hingga ‘baik’ sedangkan kualitas susu kambing Peranakan Etawah termasuk dalam kategori
‘baik’.
Mentega Susu Kambing Saanen dan PE
Secara umum, kandungan masing-masing asam lemak mentega kambing PE lebih besar dari mentega kambing Saanen Tabel 10. Perbedaan kadar lemak
yang dikandung kedua jenis susu tersebut adalah 84.05 pada susu kambing PE
dan 62. 83 pada susu kambing Saanen. Jumlah total asam lemak rantai pendek pada kedua mentega susu kambing adalah 24.78 pada PE dan 14.98 pada
Saanen. Jumlah ini belum termasuk kandungan asam butirat yang tidak ikut dihitung.
Tabel 10 Komposisi Asam Lemak Mentega Susu Kambing Saanen dan PE
Parameter
Rumus Kimia
Saanen
PE Asam lemak tidak jenuh tunggal MUFA
Myristoleic Acid C:14
n.d 0.1
Palmitoleic acid C16:1
0.28 0.39
Oleic acid C18:1
16.48 16.6
Asam lemak tidak jenuh jamak PUFA Linoleic acid
C18:2
3.48 1.4
Aracchidonic acid C20:4
0.11 n.d
Asam lemak jenuh Caproic acid
C6:0
1.69 1.78
Caprilic acid C8:0
1.83 2.34
Capric acid C10:0
5.16 7.77
Lauric acid CI2:0
1.76 3.68
Myristic acid C14:0
4.54 9.11
Myristoleic acid C14:1
n.d 0.1
Pentadecanoic acid C15:0
0.51 0.6
Palmitic acid C16:0
0.28 0.39
Heptadecanoic acid C17:0
0.46 0.49
Arachidic acid C20:0
0.2 0.17
Keterangan : Jumlah g100 g lemak susu
Karakteristik mentega dari susu kambing yang berbeda yaitu kambing Saanen dan PE yang diamati meliputi rendemen dan kandungan asam lemak.
Rendemen memiliki nilai ekonomis yang penting dalam pembuatan mentega. Pada mentega kambing Saanen di peroleh rendemen sebesar 5, sedangkan pada
mentega kambing PE diperoleh rendemen sebesar 25. Kadar lemak susu merupakan salah satu komponen yang mempengaruhi jumlah rendemen mentega.
Kadar lemak susu kambing PE berdasarkan analisis asam lemak yaitu sebesar 84.05 sedangkan kadar lemak kambing Saanen sebesar 62.83. Lemak susu
terdiri dari komponen asam-asam lemak. Komposisi asam lemak mentega berdasarkan bangsa kambing disajikan pada Tabel 10.
Berdasarkan analisis asam lemak mentega, terdapat perbedaan komposisi antara mentega yang berasal dari susu kambing PE dan Saanen. Kadar asam
lemak tak jenuh linoleic acid mentega kambing Saanen lebih tinggi dibandingkan kambing PE. Linoleic acid
merupakan asam lemak esensial yang berperan dalam
metabolisme dan mengontrol berbagai proses fisiologis dan biokimia pada manusia Mc Donagh et al 1999. Kadar asam lemak tak jenuh jamak PUFA
banyak berperan
terhadap kesehatan
diantaranya berfungsi
sebagai antikarsinogenik, antimutagenik, hipokolesterolemik dan antietherosklerotik.
Asam miristat dalam mentega menguntungkan bagi kesehatan, karena tidak mempunyai efek negatif terhadap penyakit aterosklerosis Rozali 2010.
Asam lemak caproic acid, caprilic acid, capric acid, lauric acid, myrisic acid, palmitic acid, palmitoleic acid dan heptadecanoic acid dalam mentega dari
kambing PE lebih tinggi dibandingkan mentega dari kambing Saanen. Beberapa asam lemak seperti caproic acid C6:0, caprilic acid C:8 dan capric acid
C:10 berkontribusi terhadap timbulnya flavor prengus. Selain itu asam lemak rantai pendek berfungsi sebagai sumber energi cepat bagi manusia. Adanya
perbedaan komposisi pada kedua bangsa kambing ini dapat disebabkan oleh perbedaan polimerisasi asetat yang dihasilkan oleh mikroba dalam rumen
kambing dan yang disekresikan kedalam kelenjar susu Park 2006. Asam lemak susu berasal dari aktivitas mikrobiologi dalam rumen lambung
ruminansia atau dari sintesis dalam sel sekretori. Asam lemak disusun dari rantai hidrokarbon dan golongan karboksil. Lemak susu dikeluarkan dari sel epitel
ambing dalam bentuk butiran fat globule globula lemak. Butiran lemak tersusun
atas butiran trigliserida yang dikelilingi membran tipis yang dikenal dengan Fat Globule Membran FGM atau membran butiran lemak susu. Komponen utama
dalam FGM adalah protein dan fosfolipid. FGM salah satunya berfungsi sebagai stabilisator butiran-butiran lemak susu dalam emulsi dengan kondisi aqueous
encer. Lemak susu mengandung beberapa komponen bioaktif yang sanggup mencegah kanker anticancer potential, termasuk asam linoleat konjugasi,
sphingomyelin, asam butirat, ether lipids lipid eter, β-karoten, vitamin A dan
vitamin D. Meskipun susu mengandung saturated fatty acids asam lemak jenuh dan trans fatty acids yang dihubungkan dengan atherosklerosis dan penyakit
jantung, namun susu juga mengandung oleic acid asam oleat yang memiliki korelasi negatif dengan penyakit tersebut. Lemak susu mengandung asam lemak
esensial, linoleic acid asam linoleat dan linolenat linolenic acid yang memiliki
bermacam-macam fungsi dalam metabolisme dan mengontrol berbagai proses fisiologis dan biokimia pada manusia Mc Donagh et al 1999.
Karakteristik Mentega Susu Kambing Saanen
Mentega yang dibuat pada penelitian ini termasuk kedalam kategori sweet butter, yaitu mentega yang dibuat dari krim susu tanpa proses pengasaman dan
tanpa penambahan garam. Karakteristik mentega yang dibuat dari susu kambing Saanen dengan genotipe gen GH yang berbeda yaitu CE, BC, BB dan CC secara
deskriptif disajikan pada Tabel 11. Sifat fisik mentega yang diamati meliputi rendemen, nilai pH, sedangkan sifat kimia mentega susu kambing Saanen
ditentukan berdasarkan bilangan peroksida, kadar lemak, kadar protein, kadar air dan kadar abu.
Tabel 11 Karakteristik mentega susu kambing Saanen dengan genotipe berbeda Peubah
Genotipe CE
BC BB
CC Sifat fisik
rendemen 42.50
26.00 39.00
40.00 pH
6.60 6.50
6.50 6.40
Sifat kimia bil. peroksida mEg
1x 10
-3
9 x 10
-4
9x 10
-4
2x 10
-3
kadar lemak 68.44
66.05 60.00
69.25 kadar protein
0.90 0.90
0.91 0.94
kadar air 18.40
17.64 16.00
17.60 kadar abu
0.21 0.29
0.33 1.03
Rendemen
Rendemen merupakan persentase banyaknya mentega yang dihasilkan dari sejumlah susu yang dijadikan bahan baku. Rendemen memiliki nilai ekonomis
yang penting dalam pembuatan mentega. Secara deskriptif dapat dinyatakan bahwa rendemen mentega yang dihasilkan dari susu kambing Saanen bergenotipe
CE lebih tinggi dibandingkan dengan rendemen mentega yang berasal dari genotipe gen GH kambing Saanen lainnya.
Tabel 12 Rendemen mentega susu kambing Saanen berdasarkan genotipe gen GH Genotipe
Rendemen Krim
g Mentega
g Butter milk
g CE
42.5 1060
425 635
BC 26
910 260
650 BB
39 1144
398 746
CC 40
1300 400
900 Banyaknya rendemen dipengaruhi oleh proses pemisahan krim atau separasi,
kecepatan pengadukan, suhu pada saat proses churning serta kandungan lemak dan asam lemak yang terdapat dalam susu. Apabila suhu 5-10
o
C dan kecepatan pengadukan pada saat proses churning dapat dipertahankan secara konstan maka
bodybutter yang terbentuk akan semakin kompak.
Nilai pH
Pengukuran pH bertujuan mengetahui keasaman mentega yang disebabkan adanya ion hidrogen. Nilai pH mentega yang dibuat dari susu kambing Saanen
dari masing-masing genotipe memiliki rataan yang sama yaitu 6.5. Nilai pH mentega susu kambing Saanen dari masing- masing genotipe tidak berbeda
dengan nilai pH dari susu segar maupun krim dari masing-masing genotipe, yaitu mempunyai rataan sebesar 6.5 pada suhu 27
o
C.
Bilangan Peroksida
Rataan bilangan peroksida yang diperoleh genotipe BC dan BB memiliki nilai yang sama yaitu 9 x 10
-4
, sedangkan rataan nilai bilangan peroksida genotipe CE dan CC berturut –turut 1 x 10
-3
dan 2 x 10
-3
. Berdasarkan SNI 01-3555-1998 mengenai bilangan peroksida bahan pangan, maka jumlah rataan bilangan
peroksida yang berasal dari mentega masing-masing genotipe menunjukkan angka yang masih dibawah batas minimum yaitu 10 mEqkg.
Kerusakan lemak bahan pangan yang utama adalah timbulnya rasa dan bau tengik yang disebabkan oleh otooksidasi radikal asam lemak tidak jenuh dalam
lemak. Otooksidasi yaitu rekasi-reaksi kimia yang menyebabkan ransiditas oksidatif lemak dan menghasilkan aldehida, asam-asam lemak bebas dan keton
yang selanjutnya menyebabkan bau. Terjadinya otooksidasi lemak tergantung
pada ada tidaknya oksigen dan kontak dengan oksigen Ketaren 1986. Hasil oksidasi lemak dalam bahan makanan bukan hanya menimbulkan bau dan rasa
tengik, tetapi juga dapat menurunkan nilai gizi, karena kerusakan vitamin terutama tokoferol serta asam lemak esensial dalam lemak Ketaren 1986.
Kenaikan bilangan peroksida merupakan indikator dan peringatan bahwa produk pangan akan berbau tengik.
Kadar Air
Berdasarkan standar SNI 01 ‐3744‐1995 mengenai syarat mutu mentega, kadar
air maksimal yaitu 16 . Hasil analisis terhadap kadar air mentega dari susu kambing Saanen menunjukkan nilai rataan mentega kambing Saanen dengan
genotipe BB, CC, CE dan BC berturut-turut 17.64, 16.00, 17.63 dan 18.40, sehingga hanya mentega susu kambing CC yang telah memenuhi syarat
mutu SNI mentega berdasarkan kadar air. Kadar air tergantung proses kneading atau pembuangan butter milk, penambahan garam dan lipolisis yang menyebabkan
air terkonversi menjadi bahan kering Hunziker 2008.
Kadar Abu
Hasil analisis ragam pada mentega yang dibuat dari susu kambing Saanen menunjukkan bahwa mentega susu kambing Saanen dengan genotipe CC
memiliki kadar abu tertinggi yaitu sebesar 1.03, sedangkan nilai kadar abu dari mentega susu kambing Saanen bergenotipe BC, BB dan CE berturut-turut adalah
0.29, 0.33, dan 0.21. Abu yaitu zat organik yang tidak menguap, sisa dari proses pembakaran atau hasil oksidasi. SNI 01
‐3744‐1995 tidak mempersyaratkan kadar abu. Penentuan kadar abu berkaitan dengan kandungan mineral suatu bahan
dan berhubungan dengan kemurnian serta kebersihan suatu bahan. Mineral yang terdapat dalam bahan pangan terdiri atas dua jenis garam, yaitu garam organik
misalnya asetat, pektat, mallat dan garam anorganik, misalnya karbonat, fosfat, sulfat dan nitrat. Tingginya kadar abu pada mentega susu kambing Saanen
didasarkan atas berat kering dan kandungan proteinnya, karena protein merupakan bahan kering terbesar didalam bahan pangan hewani yang mengandung atom
karbon, hidrogen dan oksigen juga mengandung sulfur dan fosfor Ketaren 1986.
Kadar Protein
Mentega merupakan salah satu bahan pangan yang kaya gizi dan memiliki energi tinggi. Selain kaya akan lemak, mentega juga mengandung sejumlah
protein. SNI 01 ‐3744‐1995 DS5N, 1995 mengenai syarat mutu mentega tidak
mempersyaratkan kadar protein. Berdasarkan hasil analisis terhadap kadar protein mentega yang dibuat dari susu kambing Saanen yang terdiri atas genotipe BC,
BB, CC dan CE berturut-turut diperoleh rataan 0.90, 0.91, 0.94 dan 0.90. Jumlah protein dalam pangan ditentukan oleh kandungan nitrogen bahan pakan
melalui metode Kjeldhal yang kemudian dikali dengan faktor protein yaitu sebesar 6.25.
Kadar Lemak
Komponen terbesar dari mentega susu kambing adalah lemak. Hasil analisis terhadap komposisi lemak mentega kambing Saanen berdasarkan genotipe BC,
BB, CC dan CE diperoleh nilai berturut-turut 69.26, 68.44, 66.05, 60.00. Berdasarkan SNI 01
‐3744‐1995 DSN, 1995 mengenai syarat mutu lemak mentega, yaitu maksimal 80 , sehingga mentega susu kambing Saanen yang
berasal dari ke empat tipe gen GH telah memenuhi syarat mutu lemak mentega berdasarkan ketentuan SNI.
Lemak tersusun dari komponen-komponen asam lemak yang terbagi menjadi asam lemak jenuh dan tidak jenuh. Kandungan asam lemak mentega kambing
Saanen berdasarkan genotipe gen GH yang disajikan pada Tabel 13. Berdasarkan hasil analisis asam lemak mentega susu kambing Saanen pada ke empat genotipe
gen GH, maka dapat diketahui bahwa terdapat sejumlah asam lemak yang tidak ditemukan kembali atau tidak terkandung pada produk mentega, selain itu
terdapat juga sejumlah asam lemak yang kadarnya berkurang jika dibandingkan dengan kadar asam lemak susu segar. Banyak faktor yang menyebabkan hal ini
selama proses pembuatan mentega. Asam-asam lemak merupakan asam lemah dan dapat terdisosiasi sebagian dalam air contohnya caproic acid dan caprilic
acid. Proses churning maupun kneading juga dapat menghilangkan sejumlah asam-asam lemak karena pada proses ini terjadi pemecahan membrane-membran
globula lemak, sehingga asam-asam lemak yang terdapat pada membran dan
sejumlah kecil asam-asam lemak pada lemak inti larut bersama butter milk yang menyebabkan berkurangnya kadar beberapa jenis asam lemak dan bahkan hilang
pada produk mentega yang dihasilkan. Buttermilk adalah fasecair yang diperoleh dari pemisahan krim pada proses pembuatan mentega. Buttermilk sebagian besar
terdiri atas air. Selain itu terdapat juga sejumlah lemak, protein susu, laktosa, mineral dan beberapa jenis asam lemak sebagai bagian dari fragmen membrane
globula lemak susu MFGM Walstra et al. 2006. Tabel 13 Komposisi asam lemak mentega susu kambing Saanen
Parameter Rumus
Kimia CC
CE BC
BB Asam lemak tidak jenuh tunggal
MUFA Myristoleic acid
C14:1 0.11
0.1 0.11
0.09 Palmitoleic acid
C16:1 0.9
0.82 0.83
0.71 Oleic acid
C18:1 0.24
0.17 0.14
0.12 Lemak tidak jenuh jamak PUFA
Linoleic acid C18:2
1.32 1.38
1.33 1.05
V-Linolenic Acid C:18:3
0.01 0.02
Cis-11-Eicosedienoic acid C20:1
0.03 0.02
0.04 0.03
Aracchidonic acid C20:4
0.11 0.1
0.12 0.08
Cis-5,8,11,14,17-Eicosapentaenoic acid EPA
C20:5 0.04
0.04 0.04
0.03 Cis-4,7,10,13,16,19-Docosahexaenoic
acid DHA C22:6
0.02 0 0.02
Asam lemak jenuh Caproic acid
C6:0 1.55
1.54 1.46
1.49 Caprilic acid
C8:0 2.03
1.89 1.96
1.85 Capric acid
C10:0 7.17
6.59 7.63
7.01 Lauric acid
CI2:0 3.7
3.34 4.16
3.27 Myristic acid
C14:0 7.92
7.73 7.69
6.63 Palmitic acid
C16:0 20.28 22.13 22.08 16.85
Heptadecanoic acid C17:0
0.57 0.54
0.5 0.46
Stearic acid C18:0
6.94 6.94
5.42 6.04
Sejumlah asam lemak seperti capric acid, lauric acid, myristic acid, pentadecanoic acid, oleic acid, arachidic acid, meningkat jumlahnya jika
dibandingkan dengan kadar asam lemak susu segar. Selama proses pembuatan
mentega maka terjadi penggabungan seluruh komponen lemak susu, sehingga akan meningkatkan kadar lemak maupun sejumlah asam lemak.
KARAKTERISTIK ORGANOLEPTIK Aroma
Berdasarkan uji organoleptik, mentega susu kambing Saanen yang terdiri atas mentega dengan genotipe BB, CC, CE dan BC memiliki aroma yang segar, khas
mentega dan tidak tengik. Mentega susu kambing Saanen dari genotipe BB, CC, CE dan BC telah memenuhi standar syarat mutu mentega berdasarkan SNI
01 ‐3744‐1995 yaitu beraroma normal atau khas mentega.
Aroma mentega terbentuk dari berbagai senyawa kimia seperti diasetil, lakton, butirat dan laktat. Mentega yang baik harus bebas dari bau rasa tengik,
pahit dan asam serta beraroma segar, kuat dan khas mentega Hunziker 2008. Oksidasi terhadap lemak mentega menyebabkan mentega berbau rasa tengik
Hettinga 2005 yang tidak dijumpai pada mentega yang dihasilkan pada penelitian ini.
Warna
Warna merupakan parameter kesan pertama yang didapat dari bahan makanan. Warna dapat pula menentukan diterima atau tidaknya suatu produk
oleh konsumen. Warna memegang peranan penting dalam penerimaan suatu makanan karena warna dapat memberikan petunjuk perubahan fisik dan kimia
dalam makanan, komposisi spektrum dari sumber cahaya yang menyelimuti objek, dan sensitifitas spektrum mata panelis Ross 2009.
Warna mentega sangat dipengaruhi oleh ukuran partikel yang terdapat di dalam susu sebagai bahan baku pembuatan mentega. Adanya karoten dan
riboflavin dalam globula lemak mempengaruhi warna susu sehingga tidak terlalu putih Ross 2009. Berbeda dengan susu sapi, susu kambing berwarna lebih putih
karena ketiadaan β-karoten Shhehan 2009.
Mentega susu kambing Saanen dari genotipe BB, CC, CE dan BC berwarna putih. Warna mentega susu kambing berbeda dengan warna mentega yang berasal
dari susu sapi. Menurut Fehr Sauvant 1980 susu kambing dan produknya termasuk mentega memiliki warna putih karena semua β-karoten yang berwarna
kuning telah dikonversi semua menjadi vitamin A murni yang tidak berwarna.
Rasa
Rasa merupakan komponen penting yang timbul pada perasaan seseorang setelah mencicipi suatu makanan. Rasa dinilai dengan adanya tanggapan
rangsangan kimiawi oleh indra pencicip lidah dan merupakan faktor yang paling penting dalam keputusan terakhir konsumen untuk menerima atau menolak suatu
makanan. Walaupun warna, aroma dan tekstur baik, namun jika rasa kurang disukai maka konsumen akan menolak makanan tersebut.
Rasa juga merupakan salah satu atribut terpenting pada mentega. Mentega yang dihasilkan dari susu kambing Saanen adalah mentega manis dan tanpa
penambahan garam. Mentega susu kambing Saanen dari genotipe BB, CC, CE dan BC memiliki rasa yang telah memenuhi standar syarat mutu mentega
berdasarkan SNI 01 ‐3744‐1995 yaitu rasa khas mentega atau normal dan tidak
memiliki asam atau penyimpangan seperti tengik. Cita rasa tengik dapat ditimbulkan oleh oksidasi asam-asam lemak yang
merupakan komponen utama mentega. Oksidasi pada mentega dapat dihambat dengan penambahan garam dan antioksidan. Salah satu antioksidan yang dapat
ditambahkan ke dalam mentega untuk menghambat oksidasi adalah vitamin E.
SIMPULAN DAN SARAN Simpulan
Polimorfisme dijumpai pada gen GH dari kambing Saanen maupun PE. Berdasarkan hasil SSCP gen GH dalam penelitian ini ditemukan lima pita DNA
yang menunjukkan pola migrasi yang berbeda, yaitu tipe gen CE, BC, CD, BB dan CC, namun keragaman ini tidak berpengaruh terhadap kualitas susu kedua
bangsa kambing Saanen dan PE, sehingga belum dapat dijadikan penanda bagi parameter kualitas susu terutama kadar lemak. Mentega susu kambing PE
memiliki kandungan lemak yang lebih tinggi dibandingkan mentega susu kambing Saanen. Mentega susu kambing dari genotipe BB, CC, CE dan BC tidak
menunjukan karakteristik organoleptik aroma, warna dan rasa yang berbeda.
Saran
Perlu dilakukan kajian mengenai penanda genetik lainnya sebagai pengontrol sifat kualitas, lemak dan asam lemak susu. Manajemen pemeliharaan
yang sama sangat ditekankan dalam pengambilan sampel pada bangsa kambing yang berbeda untuk membandingkan kualitas dari masing-masing bangsa.
DAFTAR PUSTAKA
Adiati UK, Sutama IK, Mathius IW, Yulistiani D. 2000. Produktivitas kambing PE pada sistem pemeliharaan yang berbeda. Kumpulan Hasil-hasil
Penelitian Peternakan. Bogor: Balitnak. Departemen Pertanian. hlm 64-73. Atabany A. 2001. Studi kasus produksi kambing PE dan kambing Saanen pada
peternakan kambing perah Barokah dan Taurus Dairy Farm [Tesis]. Bogor: Sekolah Pascasarjana Institut Pertanian Bogor.
Akers RM. 2002. Lactation and The Mammary Gland. Iowa: A Blackwell Publishing Company.
Akers RM. 2006. Major advances associated with hormone and growth factor regulation of mammary growth and lactation in dairy cows. J Dairy Sci 89:
1222-1234. Ardiyanti A, et al. 2009. Effects of GH gene polymorphism and sex on carcass
traits and fatty acid compotitions in Japanese Black cattle. Anim Sci J. 80: 62-69.
Association of Official Chemist. 1995. Official Method of Analysis. 16
th
Ed. Washington: Association of Official Analytical Chemist, Inc.
Ayuk J, Sheppard MC. 2006. Growth hormone and its disorders. Postgraduate Med J 82: 24-30.
Aliaga IL. 2003. Study of nutritive utilization of protein and magnesium in rats with resection of the distal small intestine beneficial effect of goat milk. J
Dairy Sci 86:2958-2966. Andreas E. 2010. Telaah kualitas daging serta identifikasi keragaman gen GH dan
GHR pada kerbau [Tesis]. Bogor: Sekolah Pascasarjana Institut Pertanian Bogor.
[Balitnak] Balai Penelitian Ternak. 2004. Kambing Peranakan Etawah: Kambing Perah Indonesia. Bogor: Puslitbang Deptan. [Terhubung berkala]
http:www.peternakan.litbang.deptan.go.id [30 Desember 2010]. Barroso AS, Dunner, Canon J. 1999. Technical Note: Use of PCR-Single-Strand
Conformation Polymorphism analysis for detection of Bovine β-casein
variant A1, A2,A3, and B. J Anim Sci 77:2629-2632 .
Bastos E, Cravador A, Azevedo J, Guedes-Pinto H. 2001 Single-Strand Conformation Polymorphism SSCP detection in six gene in portuguese
indigenous sheep Churra da Terra Quente. Biotech Agro Soc Environ 5:7-15.
Beauchemin VR, Thomas MG, Franke DE, Silver GA. 2006. Evaluation of DNA
polymorphisms involving growth hormone relative to growth and carcass characteristics in Brahman steers. Genet Mol Res 5:438-447.
Blakely J, Bade DH. 1992. The Science of Animal Husbandry. 4
th
Ed. New Jersey: Prentice Hall Career Technology
. Blott et al. 2003. Molecular dissection of a quantitative trait locus: a
phenylalanine-to-tyrosina substitution in the transmembrane domain of the
bovine growth hormone receptor is associated with a major effect on milk yield and composition. Genetics 163: 253-266.
Boutinaud M, Rousseau C, Keisler DH, James H. 2003. Growth hormone and milking frequency act differently on goat mammary gland in late lactation. J
Dairy Sci 85: 509-520. Budi U. 2002. Pengaruh interval pemerahan terhadap produksi susu dan aktivitas
seksual setelah beranak pada kambing Peranakan Etawah [Tesis]. Bogor: Program Pascasarjana Institut Pertanian Bogor.
Bylund G. 1995. Handbook of Dairy Processing. USA: Tettra Pack Processing System
. Bremel RD. 2008. Biology of lactation. London: WH. Freeman and
co.http:www.classes.ansci.uiuc. edu [ 25 Maret 2010] Ciappesoni CG, Pribyl J, Milerski M, Mares V. 2004. Factors affecting milk yield
and composition. Institute of Tropical and Subtropical Agriculture. Crech J Anim Sci 465-473.
Collomb M, Buhler T, Sieber UR, Jeangros B, Bosset JO. 2002. Composition of fatty acids in cow’s milk fat produced in the lowlands, mountains and
highlands of Switzerland using high-resolution gas chromatography. Intl Dairy J 8: 649-659.
Crawford MA. 2000. Placental delivery of arachidonic and docosahexaenoic acids: implications for the lipid nutrition of preterm infants. Am J Clin Nutr
275-284. Cronje P. 2003. Ruminant Physiology: Digestion, Metabolism, Growth and
Reproduction. New York: CABI Publishing. Davendra C, Burn M. 1994. Produksi Kambing di Daerah Tropis. Penerjemah:
Putra H. Bandung: Penerbit Institut Teknologi Bandung. De Laval. 2008. Milking technology. Di dalam: De Laval Editor. The Lactating
Dairy Cow. USA: De Laval Publishing .
Dewan Standarisasi Nasional. 1992. SNI 01-2891-1992. Cara Uji Makanan dan Minuman. Jakarta: Standar Nasional Indonesia.
Dewan Standarisasi Nasional. 1995. SNI 01-3744-1995. Syarat Mutu Mentega. Jakarta: Standar Nasional Indonesia.
Dewan Standarisasi Nasional. 1998. SNI 01-3141-1998. Susu Segar. Jakarta: Standar Nasional Indonesia.
Etherton TD, Bauman DE . 1998. Biology of somatotropin in growth and lactation of domestic animals. Physiol Rev 78: 745-761.
Ensminger ME. 2002. Sheep and Goat Science. 6
th
Ed. Illoins: Interstate Printers and Publisher Inc.
Fehr PM, Sauvant D. 1980. Composition and yield of goat milk as affected by nutritional manipulation. J Dairy Sci 63: 1671-1680.
Fodor M, Kordon C, Epelbaum J. 2006. Anatomy of the hypophysiotropic somatostatinergic and growth hormone-releasing hormone system.
Neurochem Res 31: 137-143. Fox PF, McSweeney PLH. 1998. Dairy Chemistry and Biochemistry. London:
Blackie Academic and Profesional. Frago LM, Chowen
JA. 2005. Basic
physiology of the growth
hormoneinsulinlike growth factor axis. Di dalam: Varela-Nieto I, Chowen JA, editor. The Growth HormoneInsulin-like Growth Factor Axis During
Development. USA: Springer. hlm 1-25.
Hale SA, Capuco AP, Erdman RA. 2002. Milk yield and mammary growth effects due to increased milking frequency during early lactation. J Dairy Sci 86:
2061-2071. Hayasi, K. 1999. Recent enhancements in SSCP. Genet Anim 14: 193-196.
Herdmann A, Martin J, Nuernberg G, Wegner J, Dannenberger D, Nueenberg K. 2010. How do n-3 fatty acid short-time restricted vs un restricted and n-6
fatty acidenriched diets affect the fatty acid profile in different tissues of German Simmental bulls. J Meat Sci. [doi: 10.1016j. meatsci 201006010].
Herlina. 2006. Tinjauan fisiologis ternak kambing perah Saanen sesudah pemerahan pagi dan sore di PT Taurus Dairy Farm[Skripsi] Bogor: Institut
Pertanian Bogor Hettinga D. 2005. Bailey’s Industrial Oil and Fat Products. 6
th
Ed. New York: John Wiley Sons.
Hunziker OF. 2008. The Butter Industry. 10
th
Ed. Illinois: Giniger Press. Hurley WL. 2007. Lactation Biology. Urbana: Departement of Animal Science
University of Illiois .
Innis SM. 2000. Essential fatty acids in infant nutrition: lessons and limitations from animal studies in relation to studies on infant fatty acid requirements.
Am J Clin Nutr 238-244 Ge W, Davis ME, Hines HC, Irvin KM. 2003. Association of single nucleotide
polymorphisms in the growth hormone and growth hormone receptor genes with blood serum insulin-like growth factor I concentration and growth traits
in Angus cattle. J Anim Sci 81: 641-648.
Ketaren, S. 1986. Pengantar Teknologi Minyak dan Lemak Pangan. Cetakan Pertama. Jakarta : UI-Press.
Kioka et al. 1989. Cloning and squencing of goat growth hormone gene. Agric Biol Chem 53: 1583-1592.
Malveiro et al. 2001 Polymorphisms at the five exons of the growth hormone gene in the Algarvia goat: possible association with milk traits. Small Rum
Res 41: 163-170.
Marques PX et al. 2003. Association of milk trait with SSCP polymorphisms at the growth hormone gene in the Serrana goat. Small Rum Res 73: 177-
185 .
Mateljan G.
2008. Milk
goat. USA:
The GM
Foundation. http:www.dairygoat.com [6 Januari 2011].
McDonald P, Edwards RA, Greenhalgh JFD, Morgan CA. 2002. Animal Nutrition. 6
th
Ed. London:Prentice Hall. Moeljanto RD, Wirjanta BTW. 2002. Khasiat dan manfaat susu kambing susu
terbaik dari hewan ruminansia. Depok: PT. Agro Media Pustaka. Mousavizadeh et al. 2009. Genetic polymorphism at the growth hormone locus in
Iraniantali goats by PCR-SSCP. Iran J Biotech 7:51-53 Muladno. 2002. Seputar Teknologi Rekayasa Genetika. Bogor: Pustaka
Wirahusada Muda dan USESE Foundatioan. Mulyono S. 2008. Penggemukan Kambing Potong. Jakarta: Penebar Swadaya.
Nataraj AJ, Olivos-glander I, Kusukawa N, Highsmith WE. 1999 Single- strand conformation polymorphism and heteroduplex analysis for gel-based
mutation detection. Electrophoresis 20:1177–1185. Nei, M. Kumar. 2000. Molecular Evolutionery Genetics and Phylogenetics. New
York: Oxford University Press. Noor RR. 2000. Genetika Ternak. Jakarta: Penebar Swadaya.
Ohlsson C, Bengtsson BA, Isaksson OG, Andreassen TT. 1998. Growth hormone and bone. Endocrinol Rev 19: 55-79.
Park YW. 2007. Rheological characteristics of goat and sheep milk. Small Rum Res 68 : 73-87
Pfaffle RW, Kim C, Blankenstein O, Kentrup H. 1999. GH transcription factors. J Pediatr Endocrinol Metab 12 : 311-317
. Pulina G, Nudda A. 2004. Milk Production. Wallingford: CABI
. Ross CF. 2009. Physiology of Sensory Perception. Di dalam: Clark S, Costello
M, Drake MA, Bodyfelt F, editor. The Sensory Evaluation of Dairy Products. 2
nd
Ed. New York: Springer Science. Rozali ZF. 2010. Karakteristik nutrisi dan sifat fungsional susu pasteurisasi dari
campuran susu kambing Peranakan Etawah dan Saanen serta diversifikasi rasanya dengan ekstrak rempah [Tesis]. Bogor: Sekolah Pascasarjana
Institut Pertanian Bogor.
Ruhimat A. 2003. Produktivitas kambing persilangan Peranakan Etawah betina dengan kambing Saanen jantan PESA di PT Fajar Taurus Dairy Farm
[Skripsi]. Bogor: Fakultas Peternakan. Institut Pertanian Bogor. Rumetor SD. 2008. Suplementasi daun bangun-bangun dan zinc-vitamin E dalam
ransum untuk memperbaiki metabolisme dan produksi susu kambing peranakan etawah [Disertasi]. Bogor: Program Pascasarjana. Institut
Pertanian Bogor.
Sambrook J, Fritsch EF, Maniatis T. 1989. Molecular Cloning. A Laboratory Manual
. 2
nd
ed. USA: Cold Spring Harbor Laboratory Press. Scott TW, Ashes JR. 1993. Dietary lipid for ruminant: protection, utilization and
effects remodeling of skeletal muscle phospholipids. Aust J Agric Res 44:495-508
. Shaldolm TM, Saarela M. 2003. Functional Dairy Products. England: CRC Press.
Shhean JJ, Fahmy GE. 2009. Effect of partial or total substitution of bovine for caprine milk on the compositional, volatile, non volatile and sensory
characteristics of semi-hard cheeses. Intl Dairy J 19 :498-509 Sofyan LA, Sigit N. 1993. Evaluasi nutrisi dan efek biologis bungkil biji kapuk
Ceiba petendra terhadap produksi dan komposisi susu kambing perah. Bogor: Laporan Penelitian. Pusat Antar Universitas Institut Pertanian Bogor
. Sukarini.I. A. M. 2004. Produksi dan komposisi air susu kambing Peranakan
Etawah yang diberi tambahan konsentrat pada awal laktasi. Laporan Penelitian. Denpasar: Universitas Udayana.
Sulandari S, Zein MSA. 2003. Panduan Praktis Laboratorium DNA. Jakarta: Bidang Zoologi Pusat Penelitian Biologi. Lembaga Ilmu Pengetahuan
Indonesia. Spreer, E. 1998. Milk and Dairy Product Technology. A Mixa, penerjemah. New
York: Marcel Dekker Inc. Standard Nasional Indonesia. 1992. Cara uji susu segar. Pusat Standardisasi
Industri. Departemen Prindustrian. Tamime AY. 2009. Milk Processing and Quality Management. New Delhi: India:
Blackwell Publishing Ltd. Tegelastorm, H. 1992. Mitocondrial DNA in natural population: an improved
routine for screening of genetic variation based on sensitive silver stainning. Electrophoresis 7:226-229.
Thai Agriculturtural Standard. 2008. Raw Goat Milk. Thailand: National Bureau of Agricultural Comodity and Food Standars. Ministry of Agriculture and
Coperatives. Tomadzewska MW, Mastika IM, Djajanegara A, Gardiner S, Wiradarya TR.
1993. Produksi Kambing dan Domba di Indonesia. Surakarta: Sebelas Maret University Press
Vignal A, Milan D, San CM. 2002. A review of SNP and other types of molecular markers and their use in animal genetics. Genet Sel Evol 34:275–
305. Warwick EJ, Astuti M, Hardjosubroto W. 1995. Pemuliaan Ternak. Yogyakarta:
Gadjah Mada University Press. Walstra P, Wouters JTM, Geurts TJ . 2006. Dairy Science and Technology
Handbook. 2
nd
Ed. USA: Taylor and Francis Group.
Walstra P et al. 1999. Dairy Technology. New York: Marcal Dekker Inc. Weinsten M. 2005. Contribution of Wild and Domestic Large Mammals over
Time on the Great Hungarian Plain: ”introduced” sheep and goat, ”local” domesticated cattle and pigs, and large wild animals aurochs, wild pigs,
red deer by cultural period. Ohio: Ohio State University. [terhubung berkala]. http:www.jyi.orgresearch [25 April 2010]
Williams JL. 2005. The use of marker-assisted selection in animal breeding and biotechnology. Repro Vet Sci Tech 24:379-391.
Winarno FG, Fernandez IE. 2007. Susu dan Produk Fermentasinya. Jakarta: Mbrio Press.
Yardibi H et al. 2009. Association of growth hormone gene polymorphism with milk production traits in south Anatolian and east Anatolian red cattle. J
Anim Vet 8: 1040-1044. Ye F et al. 2001. Fluorescent microsphere based readout technology for
multiplexed human single nucleotide polymorphism analysis and bacterial identification. Human Mutation 17: 305-316.
Zhou G et al. 2005. Association of genetic polymorphism in GH gene with milk production traits in Beijing Holtein cows. J Biosci. 30: 595-598.
ABSTRACT
DINA TRI MARYA . Diversity of milk quality and butter based on the genotype
of GH gene from Saanen and Etawah Grade goats. Supervised by RARAH RATIH ADJIE MAHESWARI
and CECE SUMANTRI.
The Growth hormone GH secreted by the pituitary gland plays an important role in lactation. The objectives of this study were to observe the quality
of raw milk fat, protein, density, and dry matter and characteristics of butter from Saanen and Etawah-Grade EG goat and to analyse the effect of GH gene
type in milk quality. The DNA of 89 goats Saanen and EG was evaluated. Single-strand conformation polymorphisms SSCP was utilized to
identify goat growth hormone gGH gene. The results showed that there were exist five types
of GH gene in exon 4 consist of type CE, BC, CD, BB and CC. The CE, BC and BB types were found in all population Saanen and EG. The CD and CC type
only found in Saanen and EG goats respectively, but this diversity did not affect milk quality of the raw milk of Saanen and EG goats. Diversity of genotypes of
GH gene also did not affect the characteristics of goats milk butter.
Keywords: Goat milk, quality, butter, GH gene, Saanen, Etawah- Grade
PENDAHULUAN Latar Belakang
Salah satu ternak ruminansia kecil yang banyak dipelihara oleh peternak adalah kambing. Ternak kambing mempunyai peran strategis bagi masyarakat
Indonesia khususnya di daerah pedesaan. Ternak kambing selain sebagai sumber pendapatan, juga memberikan sumbangan yang cukup berarti bagi kesehatan dan
gizi manusia. Kelebihan lain yang dimiliki kambing adalah ternak ini sangat efisien dalam mengubah hijauan pakan menjadi energi, modal usaha yang
diperlukan relatif kecil dan cukup adaptif terhadap berbagai kondisi lingkungan. Ternak kambing disamping sebagai penghasil daging ada juga yang
menghasilkan susu atau dikenal dengan kambing perah. Kambing Saanen dan Peranakan Etawah adalah bangsa kambing perah yang banyak dipelihara di
Indonesia. Susu kambing memiliki kelebihan dibandingkan dengan susu sapi karena memiliki daya cerna yang tinggi, mempunyai ukuran butiran lemak susu
yang lebih kecil dibandingkan dengan susu sapi dan baik dikonsumsi bagi penderita lactose intolerance karena mempunyai kandungan laktosa yang rendah.
Kualitas susu kambing sangat dipengaruhi oleh kadar lemak. Lemak susu baik dalam bentuk susu cair, krim maupun mentega memiliki nilai ekonomis yang
tinggi. Salah satu gen yang berperan dalam mengontrol kadar lemak maupun produksi susu adalah gen GH.
Penyebab kesenjangan antara produksi susu dan pemenuhan produk olahan asal susu adalah rendahnya populasi dan potensi genetik ternak perah. Kondisi
manajemen pemeliharaan yang belum maksimal juga berpengaruh terhadap kualitas susu maupun produk olahan yang dihasilkan. Usaha kambing perah di
Indonesia pada umumnya masih bersifat subsistem yaitu masih berskala kecil. Pengetahuan serta keterampilan petani yang mencakup aspek reproduksi,
pemberian pakan, pengelolaan hasil pascapanen, penerapan sistem pencatatan, pemerahan, sanitasi dan pencegahan penyakit juga masih rendah.
Perbaikan mutu genetik kambing perah melalui seleksi pada umumnya banyak dilakukan secara konvensional berdasarkan morfologi dan produksi susu.
Sistem konvensional memerlukan waktu yang lama. Kemajuan teknologi pada
bidang molekular saat ini dapat membantu mempercepat seleksi dalam program pembibitan. Hal ini dapat dilakukan dengan pemanfaatan gen-gen penciri yang
berpengaruh pada sifat-sifat kualitatif yang bernilai ekonomis. Pada studi gen kandidat terhadap sifat-sifat produksi ternak, gen hormon pertumbuhan atau
growth hormone GH banyak diteliti untuk digunakan sebagai marker penciri dalam seleksi ternak. Hal ini dikarenakan hormon tersebut merupakan hormon
regulator pertumbuhan, perkembangan tubuh ternak dan produksi susu. Penelitian ini diharapkan dapat membantu melakukan seleksi terhadap kambing-kambing
perah yang memiliki sifat dan kualitas produksi yang diharapkan.
Tujuan Penelitian
Penelitian ini bertujuan untuk: 1. Menganalisis kualitas susu kambing Saanen dan Peranakan Etawah.
2. Mengidentifikasi polimorfisme gen GH pada kambing Saanen dan Peranakan Etawah.
3. Mengkaji hubungan antara keragaman gen GH pada kambing Saanen dan Peranakan Etawah dengan kualitas susu.
4. Mengkaji karakteristik mentega yang dihasilkan dari kambing Saanen dan Peranakan Etawah.
Manfaat Penelitian
1. Diperoleh data tentang gen GH pada kambing perah Saanen dan Peranakan Etawah.
2. Didapatkan informasi genetik calon tetua kambing perah Saanen dan Peranakan Etawah sebagai penghasil susu untuk tujuan pengolahan mentega.
Hipotesis Penelitian
1. Adanya polimorfisme gen GH pada kambing perah Saanen dan Peranakan Etawah.
2. Terdapat korelasi antara variasi genotipe GH dengan kualitas susu dan mentega yang dihasilkan pada kambing Saanen dan Peranakan Etawah.
TINJAUAN PUSTAKA Kambing Perah
Kambing diklasifikasikan kedalam kingdom Animalia, filum Chordata, sub- filum Vertebrata, kelas Mammalia, ordo Artiodactyla, sub-ordo Ruminantia,
famili Bovidae, genus Capra dan spesies Capra hircus Ensminger 2002. Pemeliharaan kambing memberikan pengaruh besar terhadap sistem pertanian
pedesaan, karena kambing telah beradaptasi dengan baik di sebagian besar wilayah Indonesia. Produksi susu kambing telah memberikan kontribusi sebesar
35 terhadap total produksi susu dunia, atau mengalami peningkatan cukup berarti dari tahun-tahun sebelumnya yaitu sebesar 9 Weinsten 2005.
Kambing Saanen
Kambing Saanen berasal dari lembah Saanen di Swiss Barat. Kambing ini berwarna putih, krem atau coklat muda dengan bulu yang panjang atau pendek,
telinga tegak, serta memiliki temperamen yang tenang dan jinak Blakely Bade 1992. Kambing Saanen mempunyai produksi susu tertinggi dibandingkan
dengan bangsa kambing perah lainnya, oleh karena itu bangsa kambing ini disebarluaskan ke banyak negara. Rata-rata produksi susu kambing Saanen di
daerah tropis adalah 1-3 kg per hari, sedangkan di daerah subtropik dapat mencapai 5 kg per hari. Jenis kambing Saanen banyak dipelihara sebagai
penghasil susu. Kambing Saanen terkenal sebagai penghasil susu berkualitas dengan
kandungan lemak rendah Winarno Fernandez 2007. Produksi susu dengan kandungan lemak antara 3-4 per masa laktasi yang berlangsung selama 250 hari
Davendra Burn 1994. Kambing jenis Saanen dapat dibedakan dari kambing lainnya yaitu dengan ciri-ciri utama telinga dengan cuping kearah atas. Telinga
kecil, pendek, tegak ke arah depan dan samping. Kepala kecil dan berbentuk lancip. Selain itu warna bulu biasanya putih atau krem, ambing serta puting besar
dan lunak, induk betina sering melahirkan anak kembar Mulyono 2008.
Kambing Peranakan Etawah
Peranakan Ettawa PE merupakan hasil persilangan antara kambing Ettawa dari India dengan kambing kacang yang penampilannya mirip Ettawa
tetapi lebih kecil dengan proporsi genotipe yang tidak jelas Balitnak 2004. Ciri khas kambing PE yaitu bentuk muka cembung melengkung dan dagu berjanggut,
di bawah leher terdapat gelambir yang tumbuh berawal dari sudut janggut, telinga panjang, menggantung dan ujungnya agak melipat, tanduk berdiri tegak mengarah
kebelakang dengan ujung tanduk melingkar, tinggi tubuh gumba 70-90 cm, tubuh besar, pipih, bentuk garis punggung seolah-olah mengombak kebelakang,
bulu tubuh tampak panjang di bagian leher, pundak, punggung, dan paha, bulu paha panjang dan tebal, warna bulu putih, hitam hingga cokelat Mulyono 2008.
Kambing PE digolongkan sebagai kambing tipe dwiguna yaitu sebagai penghasil daging dan susu Adiati et al. 2000. Kambing PE memiliki ambing
yang besar, putingnya panjang. Produksi susunya berkisar 1.0-1.5 literekorhari sepanjang masa laktasi antara 5-6 bulan, dengan masa kering 2-3 bulan Balitnak
2004.
Susu Kambing
Susu menurut SNI01-3141-1998, susu adalah cairan yang berasal dari ambing sehat dan bersih, yang diperoleh dengan cara pemerahan yang benar, yang
kandungan alaminya tidak dikurangi atau ditambah sesuatu apapun dan belum mendapat perlakuan apapun kecuali proses pendinginan tanpa mempengaruhi
kemurniannya DSN 1998. Pemerintah untuk melindungi konsumen, menetapkan standar khusus untuk suatu produk. Indonesia saat ini baru
mempunyai standar untuk susu sapi segar yang tercantum dalam SNI 01-1341- 1998 Tabel 1 dan belum mempunyai standar susu kambing segar.
Susu kambing memiliki nilai gizi yang serupa dengan susu sapi. Susu kambing terkenal karena kandungan atau nilai nutrisi dan dipercaya mempunyai
nilai medis sejak zaman dahulu. Karakteristik susu kambing dibandingkan dengan susu sapi adalah 1 warna susu lebih putih 2 globula lemak susu lebih kecil
dengan diameter 0.73- 0.58 µm 3 mengandung mineral kalsium, fosfor, vitamin
A, E dan B kompleks yang tinggi 4 dapat diminum oleh orang-orang yang alergi susu sapi dan orang-orang yang mengalami gangguan pencernaan 5 dari segi
produktivitas, produksi susu kambing lebih cepat diperoleh karena kambing telah dapat berproduksi pada umur 1.5 tahun, sedangkan sapi baru dapat berproduksi
pada umur 3-4 tahun, tergantung ras Saleh 2004. Tabel 1. Syarat mutu susu sapi segar berdasarkan SNI 01-3141-1998
No Parameter
Syarat
1.
2. SUSUNAN SUSU
Berat Jenis BJ pada suhu 27,5
o
C Kadar lemak
Kadar Bahan Kering Tanpa Lemak BKTL atau Solid Non Fat SNF
Kadar protein Cemaran logam berbahaya
- Timbal Pb - Seng Zn
- Merkuri Hg - Arsen As
KEADAAN SUSU
Organoleptik : warna, bau, rasa dan kekentalan
Kotoran dan benda asing Cemaran mikroba
- Total mikroba - Salmonella
- Escherichia coli patogen - Coliform
- Streptococcus group B - Staphylococcus aureus
Jumlah sel radang Uji Katalase
Uji Reduktase Residu antibiotic, pestisida dan insektisida
Uji Alkohol 70 Derajat Asam
Uji Pemalsuan Titik Beku
Uji Peroksidase Minimal 1,0280
Minimal 3,0 Minimal 8,0
Minimal 2,7 Maksimum 0,3 ppm
Maksimum 0,5 ppm Maksimum 0,5 ppm
Maksimum 0,5 ppm
Tidak ada perubahan Negatif
Maksimum 1.000.000 CFUml Negatif
Negatif 20 CFUml
Negatif 100 CFUml
Maksimum 40.000ml Maksimum 3 cc
2-5 jam Sesuai dengan peraturan yang
berlaku Negatif
6-7
o
SH Negatif
-0,520 sd -0,560
o
C Positif
Sumber: DSN 1998
Ketersediaan magnesium di dalam susu kambing, menurut Aliaga 2003 lebih besar dibandingkan susu sapi dan mengandung jumlah vitamin D yang lebih
banyak. Magnesium memiliki arti penting, karena berhubungan dengan metabolisme. Mineral magnesium dikenali sebagai kofaktor di dalam lebih dari
300 reaksi enzimatik yang mempengaruhi kegiatan metabolisme dan sintesa
protein dan asam nukleat. Susu kambing adalah sumber Ca dan asam amino triptofan dan zat gizi lain yang sangat baik. Susu kambing tidak mengandung
protein yang menyebabkan alergi seperti yang terdapat pada susu sapi serta mengandung olisakarida yang berperan sebagai anti-inflamasi Mateljan 2008.
Menurut Thai Agricultural Standard 2008 susu kambing segar adalah susu segar yang diperoleh dari induk kambing Capra spp. tidak kurang dari 3 hari
setelah kelahiran. Susu harus tidak dikurangi dan tidak ditambahkan komponen lain. Tidak boleh mengalami suatu perlakuan kecuali pendinginan. Susu harus
tidak mengandung kolostrum. Klasifikasi susu kambing berdasarkan mutu digolongkan berdasarkan total mikroba, jumlah sel somatik ambing, kandungan
lemak dan bahan kering, dengan ketentuan parameter tersebut digunakan sebagai kriteria untuk pemasaran susu kambing segar. Penggolongan mutu tersebut dapat
dilihat pada Tabel 2. Tabel 2. Klasifikasi mutu susu kambing segar berdasarkan karakteristiknya
Karakteristik Kelas
Premium Baik
Standar 1. Total Mikroba cfuml
5 x 10
4
5 x 10
4
- 10
5
10
5
- 2 x 10
5
2. Sel Somatik selml 7 x 10
5
7 x 10
5
- 10
6
10
6
- 1,5 x 10
6
3. Protein 3.7
3.4 – 3.7 3.1 – 3.4
4. Lemak 4
3.5 – 4 3.25 – 3.5
5. Total Solid 13
12 – 13 11.7 - 12
Thai Agricultural Standard 2008 menetapkan beberapa syarat untuk susu kambing segar, yaitu syarat secara umum dan pengelompokan berdasarkan mutu.
Syarat umum yaitu: normal, bersih dan berwarna putih atau krem, flavor normal tanpa bahan asing dan pencampuran, ketika diuji dengan uji alkohol untuk
mengamati reaksi antara susu kambing segar dengan etil alkohol, endapan atau gumpalan harus hanya sedikit dan berukuran kecil, pH harus diantara 6.5 – 6.8,
berat kering tanpa lemak tidak boleh kurang dari 8.25 , titik beku tidak boleh di atas – 0.530
o
C, berat jenis harus tidak kurang dari 1.028 pada suhu 20
o
C, perubahan warna metilen blue harus lebih dari 4 jam, perubahan warna resazurin
pada satu jam pertama tidak kurang dari skala 4.5.
Mentega
Mentega berdasarkan SNI01-3744-1995 DSN, 1995 adalah produk makanan berbentuk padat lunak yang dibuat dari lemak atau krim susu atau
campurannya dengan atau tanpa penambahan garam NaCl atau bahan lain yang diizinkan dan maksimal mengandung 80 lemak susu.
Spreer 1998 menyatakan, mentega merupakan emulsi air dalam minyak dengan kira-kira 18 air terdispersi didalam 80 lemak dengan sejumlah kecil
protein yang bertindak sebagai zat pengemulsi emulsifier. Mentega merupakan lemak makanan dengan flavor dan cita rasa yang enak dan khas. Ciri khas ini pada
dasarnya merupakan komposisi alami dari lemak susu yang dihasilkan melalui proses biokimia. Mentega mudah dicerna dan dimanfaatkan oleh tubuh 90
karena kemampuan mentega mencair yang mendekati temperatur tubuh. Mentega mengandung vitamin yang dapat larut dalam lemak, terutama vitamin A.
Apabila ditinjau dari segi kesehatan maka kandungan kolesterol yang terdapat pada mentega sering menjadi perhatian utama, namun berdasarkan teori
lipid belum ada bukti yang nyata dari hubungan antara kolesterol makanan dan kolesterol serum dibentuk pada tubuh saat mencapai 1000mghari.
Proses pembuatan mentega melalui tahapan utama separasi krim, churning dan kneading.
Mentega diperoleh dari krim melalui proses agitasi yang disebut churning. Krim diaduk dan dikocok sehingga menghancurkan membran yang
menyelubungi butir-butir lemak. Gumpalan-gumpalan lemak susu dipisahkan dari bagian lain dan dicuci dengan air dingin beberapa kali untuk menghilangkan
buttermilk hasil ikutannya. Working atau kneading dilakukan dengan tujuan
untuk mengeluarkan air yang tersisa dalam lemak butter fat susu. Mentega biasanya diberi garam dengan jumlah sekitar dua setengah persen untuk
meningkatkan citarasa dan sebagai pengawet Winarno Fernande 2007. Menurut Hettinga 2005, mentega adalah salah satu bentuk pengawetan
komponen lemak susu. Karakteristik tekstur mentega secara signifikan tergantung pada komposisi lemak susu dan metode pembuatannya. Jika komposisi kimia dari
lemak mentega diketahui, maka akan memudahkan untuk memilih parameter teknologi yang tepat pada pembuatan mentega guna memperbaiki teksturnya. Hal
ini penting dilakukan pada industri pembuatan mentega guna menghasilkan
produk mentega dengan karakteristik yang konstan dan mengendalikan parameter pembuatan mentega.
Lemak susu memiliki komposisi asam lemak yang cukup komplek. Trigliserida merupakan komponen yang paling banyak mendominasi lemak susu
yaitu sebesar 98 dengan sejumlah kecil digliserida, monogliserida dan asam lemak bebas. Komponen lainnya yang terdapat dalam lemak susu yaitu
fosfolipid, sterol kolesterol serta sejumlah kecil vitamin yang larut dalam lemak terutama A, D dan E, antioksidan tokoferol, pigmen karoten dan komponen
rasa lakton, aldehid dan keton. Asam lemak adalah asam monokarboksilat berantai lurus yang terdapat di
alam sebagai ester di dalam molekul lemak atau trigliserida. Hasil hidrolisis trigliserida akan menghasilkan asam lemak jenuh dan tak jenuh berdasarkan ada
tidaknya ikatan rangkap rantai karbon di dalam molekulnya. Asam lemak tidak jenuh memiliki ikatan rangkap yang terdapat dalam lemak dapat berada dalam
dua bentuk yakni isomer cis dan trans. Asam lemak tak jenuh alami biasanya berada sebagai asam lemak cis, hanya sedikit bentuk trans.
Stuktur asam lemak pada mentega belum dipahami dengan jelas, diperkirakan terdapat 400 jenis asam lemak yang ditemukan didalam lemak susu
dengan jumlah atom karbon C
2
hingga C
28
, termasuk asam lemak dengan jumlah atom karbon ganjil, jenuh, tak jenuh tunggal dan tak jenuh ganda, cis dan
trans, linear dan bercabang, dan berbagai keto-dan asam lemak hidroksi Collomb et al.
2002. Sekitar 20 asam lemak merupakan komponen utama dalam pembentukan lemak susu dan sisanya terdapat dalam jumlah yang sangat sedikit,
sedangkan pada mentega hanya sekitar 15 asam lemak utama yang dipertimbangkan Hettinga 2005.
Gen Growth Hormon GH
Hormon pertumbuhan atau growth hormone GH merupakan hormon anabolik yang disintesis dan disekresikan oleh sel somatotrof pada lobus anterior
pituitari Ayuk Stephard 2006. Protein GH terdiri atas 191 asam amino, dengan berat molekul 22 kDa Frago Chowen 2005. Sintesis dan sekresi
protein tersebut dipengaruhi oleh umur dan jenis kelamin Ardiyanti et al. 2009.
Protein ini memiliki peranan penting dalam pertumbuhan dan perkembangan longitudinal pascanatal, pertumbuhan jaringan, laktasi, reproduksi, metabolism
lipid a
, protein dan karbohidrat. Pada ternak ruminansia, GH berperan dalam pengaturan perkembangan kelenjar mamae Akers 2002.
Protein GH disandikan oleh gen GH yang terletak pada kromosom 18 dengan panjang sekitar 200 bp yang tersusun atas lima ekson dan empat intron.
Gen GH telah digunakan secara luas sebagai penanda pada beberapa spesies ternak seperti sapi Bos taurus dan Bos indicus Zhou et al. 2005 dan kambing
Capra hircus Boutinaud et al. 2003. Keragaman gen GH pada kambing Algarvia Portugis yang diidentifikasikan dengan metode single strand
conformation polymorphism SSCP berhubungan dengan sifat produksi, lemak dan protein susu Boutinaud et al. 2003.
Mekanisme Kerja Growth Hormone
GH Growth hormone yang dihasilkan oleh kelenjar pituitari pertama-tama mengalir melalui pembuluh darah menuju ke organ hati. GH di dalam hati diubah
menjadi IGF-1 Insulinlike Growth Factor 1, melalui peredaran darah bersama aliran nutrien, IGF-1 dialirkan ke seluruh organ-organ yang ada di tubuh ternak.
IGF-1 inilah yang bertanggung jawab untuk memelihara seluruh organ-organ di dalam tubuh manusia. Gen GH penting untuk pertumbuhan setelah kelahiran dan
metabolisme normal karbohidrat, lemak, nitrogen serta mineral. Growth hormone tidak bekerja secara langsung dalam mempengaruhi pertumbuhan, tetapi melalui
perantaraan suatu peptida yang disebut somatomedin IGF I dan IGF II yang produksinya diinduksi oleh growth hormone. Somatomedin yang produksi
utamanya di hati ini dipengaruhi juga oleh usia dan keadaan nutrisi ternak. Somatomedin inilah yang akan berikatan dengan reseptor-reseptor dalam sel
tubuh guna merangsang pertumbuhan melalui:
1. Sintesis protein. Hormon pertumbuhan akan meningkatkan produksi
protein dan transportasinya ke sel-sel otot sehingga merangsang pertumbuhan otot dan jaringan pada umumnya.
2. Metabolisme karbohidrat. Hormon pertumbuhan memiliki efek
antagonis terhadap insulin ,
sehingga meningkatkan kadar gula dalam
darah, yang nantinya akan meningkatkan proses konversi karbohidrat menjadi protein.
3. Metabolisme lemak. Hormon pertumbuhan akan meningkatkan
penguraian lemak tubuh menjadi asam lemak bebas dan gliserol ,
sehingga kadar lemak dalam darah meningkat.
4. Efek mirip prolaktin sehingga merangsang kelenjar ambing dan produksi
susu saat kebuntingan Ohlsson et al.1998.
Penanda Molekuler
Penanda molekuler memiliki peranan penting dalam genetika ternak. Hal tersebut merupakan salah satu faktor utama yang mendasari terjadinya proses
seleksi Vignal et al. 2002. Penanda molekuler merupakan pemanfaatan dari keragaman meliputi subsitusi, delesi, insersi dan inverse Nei Kumar 2000.
Polymerase chain reaction PCR merupakan suatu teknik untuk
menggandakan jumlah molekul DNA secara in vitro. Proses ini berjalan dengan bantuan enzim polymerase dan primer. Primer merupakan oligonukleotida
spesifik pada DNA template. Enzim polymerase merupakan enzim yang dapat mencetak urutan DNA baru. Hasil PCR dapat langsung divisualisasikan dengan
elektroforesis atau dapat digunakan untuk analisis lebih lanjut Williams 2005. Polymerase chain reaction-single-strand conformation polymorphism atau
PCR-SSCP merupakan salah satu metode analisis lebih lanjut yang memanfaatkan produk PCR. Metode PCR-SSCP merupakan metode yang handal dalam
mendeteksi adanya mutasi secara cepat Hayasi 1991. Metode ini didasarkan pada asumsi bahwa perubahan asam nukleotida akan menyebabkan perubahan
pola migrasi dari bentuk ikatan utas tunggal DNA pada gel poliakrilamida, yang disebut sebagai perubahan konformasi atau bentuk molekul. Pendeteksian dalam
SSCP dipengaruhi oleh matriks gel, kondisi elektroforesis, panjang fragmen dan kandungan G+C Nataraj et al. 1999. Perbedaan konsentrasi akrilamida,
perbandingan akrilamida dengan bis-akrilamida, penggunaan gliserol, suhu elektroforesis dan kondisi buffer dapat berpengaruh terhadap pendeteksian
keragaman Barroso et al. 1999.
Single Strand Conformation Polymorphism SSCP merupakan suatu metode analisis molekuler yang bertujuan untuk melihat perbedaan jumlah basa
antar fragmen dengan menggunakan gel poliakrilamid, yang masing-masing dapat memisahkan 6-8 basa. Template DNA pada poliakrilamid gel difragmentasi
dengan elektroforesis terkontrol yang disebut GenePhor. Genephor merupakan horizontal elektroforesis kering, dengan suhu yang dapat diatur sedemikian rupa,
sehingga dapat memisahkan DNA pada tegangan tinggi tanpa menimbulkan panas yang berlebihan pada poliakrilamid gel. Metode pewarnaan menggunakan metode
silver stainning. Hasil dari SSCP sangat dipengaruhi dan ditentukan oleh konsentrasi DNA sampel serta proses ekstraksi, amplifikasi, purifikasi dan
restriksi serta optimasi dalam pelaksanaan stainning. Teknik ini merupakan salah satu teknik analisis polimorfisme dan banyak diterapkan untuk genotiping dengan
hasil cukup akurat.
Analisis Keragaman Genetik
Keragaman genetik dapat digunakan sebagai parameter dalam mempelajari genetika populasi dan genetika evolusi. Tingkat keragaman dalam
populasi dapat digambarkan dari frekuensi alel yang merupakan rasio relatif suatu
alel terhadap keseluruhan alel yang ditemukan dalam satu populasi. Informasi keragaman genetik suatu populasi menggunakan beberapa lokus, dapat
digambarkan melalui nilai heterozigositas Nei Kumar 2000. Identifikasi keragaman genetik dalam suatu populasi berguna untuk
mengetahui dan melestarikan bangsa-bangsa dalam populasi terkait dengan penciri suatu sifat khusus. Populasi alami biasanya memiliki keragaman genetik
yang tinggi. Informasi keragaman genetik suatu bangsa akan sangat bermanfaat bagi keamanan dan ketersediaan bahan pangan yang berkesinambungan Blott et
al. 2003.
BAHAN DAN METODE Tempat dan Waktu
Penelitian dilaksanakan mulai bulan Juni 2010 hingga Januari 2011. Lokasi pengambilan sampel darah dan susu kambing dilakukan di PT Fajar Taurus Dairy
Farm dan PT Elang 45. Analisis keragaman gen dilaksanakan di Laboratorium Genetika Molekuler Bagian Pemuliaan dan Genetika Ternak Fakultas Peternakan
IPB, sementara pengujian kualitas susu dan produk olahan susu dilaksanakan di Laboratorium Pengolahan Susu Bagian THT Fakultas Peternakan IPB dan
Laboratorium Terpadu IPB.
Materi Sampel Darah Kambing
Ternak yang digunakan dalam penelitian ini adalah kambing Saanen dan Peranakan Etawah yang berjumlah 89 ekor. Pengambilan sampel darah dilakukan
untuk masing-masing individu ternak kambing. Alat dan bahan untuk pengambilan sampel darah berupa venoject, vacutainer dan etanol. Ekstraksi
DNA menggunakan metode fenol kloroform Sambrook et al.1989.
Primer
Primer adalah DNA utas tunggal dengan ukuran pendek, biasanya 18 sampai 25 basa, yang akan menempel pada DNA cetakan pada tempat yang
spesifik. Primer berguna untuk mengapit sekuen DNA target pada reaksi PCR. Pada penelitian ini, primer forward dan reverse untuk mengamplifikasi gen GH
ditunjukkan pada Tabel 3. Tabel 3. Primer untuk amplifikasi gen GH
No. Sekuens 5-3
Pustaka 1.
Forward GGA AGG GAC CCA ACA ATG CCA Kioka et al.
1989 2.
Reverse CTG CCA GCA GGA CTT GGA GC
Bahan dan Alat Analisis PCR
Bahan yang digunakan untuk PCR adalah DNA, pereaksi PCR Master mix- Genaid yang terdiri atas enzim tag DNA polymerase, 10x buffer, larutan
MgCl
2,
dNTPs, primer forward dan reverse fragmen gen GH. Peralatan yang
digunakan adalah pipet tip, mikropipet, microtube eppendorf, microsentrifuge dan mesin thermocycler.
Bahan dan Alat Analisis PCR-SSCP
Bahan yang digunakan untuk analisis PCR-SSCP adalah air destilasi steril, akrilamida 30, 5 x TBE, TEMED tetramethylendiamine dan APS ammonium
persulfat 10 , loading dye dan marker 100 pb Biorad. Alat yang digunakan adalah dua buah kaca untuk cetakan gel, pipet berskala, tabung reaksi, sisir khusus
untuk sumur, pipet mikro Eppendorf 2 µl dengan tipsnya dan power supply 200
Volt.
Bahan dan Alat Pewarnaan Perak
Bahan yang digunakan adalah larutan yang terdiri atas 0.2 gram AgNO
3
; 80 µl NaOH 10 N ; 0.8 ml NH
4
OH dalam 200 ml air destilasi, larutan 6 gram NaOH
dengan 200 µl formaldehida dan asam asetat 200 µl dalam 200 ml air. Alat yang digunakan adalah gelas ukur, labu Erlenmeyer dan water-bath shaker.
Bahan dan Alat Analisis Kualitas Susu Kambing dan Mentega
Sampel susu diambil dari ternak kambing Saanen dan PE. Pengolahan susu yang dilakukan adalah pemisahan lemak susu dengan separator krim.
Sebelum dilakukan pengolahan susu dilakukan pengujian terhadap kualitas susu segar. Bahan yang digunakan untuk analisis susu dan mentega susu kambing
antara lain H
2
SO
4
, alkohol 70, Aquadest, NaOH 0.1 N, amilalkohol, fenolftalin, NaOH, kalium oksalat, K
2
SO
4
, HgO dan formalin. Peralatan yang digunakan antara lain laktodensimeter, butirometer, pipet volumetric, pH-meter, inkubator,
autoklaf, timbangan analitik, termometer, labu Kjeldahl, alat titrasi, alat-alat gelas, sentrifuse, wadah plastik, desikator, cawan porselen, tanur, alat ekstraksi Sokhlet,
oven 105ºC dan penangas air.