33 g. Dipipet 125 µL ekstrak daun keji beling ke dalam organ bath sehingga
konsentrasi ekstrak dalam organ bath didapat 7 mgml. h. Dipipet 125 µL ekstrak daun keji beling ke dalam organ bath sehingga
konsentrasi ekstrak dalam organ bath didapat 8 mgml.
3.7.2 Pembuatan larutan tirode
Larutan buffer fisiologis yang digunakan adalah larutan tirode. Untuk membuat 1 liter larutan tirode ditimbang:
NaCl : 8,00 gram
KCl : 0,20 gram
MgCl
2
: 0,10 gram NaH
2
PO
4
: 0,05 gram NaHCO
3
: 1,00 gram D-Glukosa
: 1,00 gram CaCl
2
: 0,20 gram Bahan NaCl, KCl, MgCl
2
, NaH
2
PO
3
, CaCl
2
dilarutkan terpisah dengan akuades sampai larut. NaHCO
3
dan D-Glukosa ditambahkan terakhir setelah semua bahan tercampur.
Setelah semua bahan tercampur, larutan di aerasi dengan karbogen O
2
95, CO
2
5 agar tidak terjadi pengendapan garam kalsium yang ditandai dengan kekeruhan. Selanjutnya larutan diatur pada pH 7,4. Larutan tirode dapat
bertahan selama 24 jam Tyrode, 1910.
3.7.3 Penyiapan larutan asetilkolin
Dalam penelitian ini asetilkolin klorida digunakan sebagai agonis kolinergik. Senyawa ini dapat menyebabkan kontraksi otot polos pada usus halus.
34 Dibuat larutan induk dengan cara melarutkan asetilkolin ke dalam aqua destilata
sehingga didapat konsentrasi 2 x 10
-1
M. Kemudian dibuat larutan yang lebih encer sampai kadar 2 x 10
-6
M dengan faktor pengenceran 5 kali. a. Pembuatan larutan baku asetilkolin klorida
Timbang seksama asetilkolin klorida BM 181,60 gmol seberat 181,60 mg kemudian dilarutkan dalam 5,0 ml aquadest. Diperoleh larutan asetilkolin
klorida 2 x 10
-1
M. b. Pembuatan seri konsentrasi asetilkolin klorida
i. Asetilkolin klorida 2 x 10
-2
M Dipipet 500 µL larutan baku asetilkolin 2 x 10
-1
M. masukkan kedalam tabung reaksi, tambahkan 4500 µL aquadest. Vortex selama 3 menit.
ii. Asetilkolin klorida 2 x 10
-3
M Dipipet 500 µL larutan baku asetilkolin 2 x 10
-2
M. masukkan kedalam tabung reaksi, tambahkan 4500 µL aquadest. Vortex selama 3 menit.
iii. Asetilkolin klorida 2 x 10
-4
M Dipipet 500 µL larutan baku asetilkolin 2 x 10
-3
M. masukkan kedalam tabung reaksi, tambahkan 4500 µL aquadest. Vortex selama 3 menit.
iv. Asetilkolin klorida 2 x 10
-5
Dipipet 500 µL larutan baku asetilkolin 2 x 10
-4
M. masukkan kedalam tabung reaksi, tambahkan 4500 µL aquadest. Vortex selama 3 menit.
v. Asetilkolin klorida 2 x 10
-6
Dipipet 500 µL larutan baku asetilkolin 2 x 10
-5
M. masukkan kedalam tabung reaksi, tambahkan 4500 µL aquadest. Vortex selama 3 menit.
35
3.7.4 Penyiapan larutan atropin sulfat
