3.3.2 Bahan
Bahan yang digunakan adalah kulit buah dari tanaman jengkol Pithecellobium lobatum Benth, air suling, larutan fisiologis NaCl 0,9 steril,
etanol 96, etanol 70, toluena, larutan kloralhidrat, kloroform, HCl 2 N, larutan kristal violet, larutan aceton-alkohol, larutan safranin, larutan iodine, Nutrient Agar
NA, Mueller Hinton Agar MHA, Media Mac. Conkey, Salmonella Shigella Agar SSA, glukosa, maltosa, laktosa, NaOH 0,2 N, bakteri Escherichia coli ATCC
25922, Shigella dysenteriae, Salmonella typhimurium.
3.4 Pembuatan Media dan Pereaksi 3.4.1 Nutrient Agar NA
Komposisi: Beef extract
3,0 gram Pepton
5,0 gram Agar
15,0 gram Cara pembuatan: ditimbang sebanyak 23 gram serbuk nutrient agar kemudian
disuspensikan dalam erlenmeyer dengan air suling yang ditambahkan sedikit demi sedikit hingga 1000 ml, dipanaskan sebentar sambil sekali-kali diaduk sampai
terbentuk larutan jernih. Tutup erlenmeyer dengan kapas yang dilapisi aluminium foil. Disterilkan di dalam autoklaf pada suhu 121
o
C tekanan 2 atm selama 15 menit.
3.4.2 Mueller Hinton Agar MHA
Komposisi: Beef infusion form
300 g Casein hydrolysate
17,5 g Starch
1,5 g Agar
17 g
Universitas Sumatera Utara
Cara pembuatan: ditimbang sebanyak 38 gram serbuk MHA kemudian disuspensikan dalam erlenmeyer dengan air suling yang ditambahkan sedikit demi sedikit hingga
1000 ml, dipanaskan hingga mendidih sambil sekali-kali diaduk sampai terbentuk larutan jernih. Tutup erlenmeyer dengan kapas yang dilapisi aluminium foil.
Disterilkan di dalam autoklaf pada suhu 121
o
C tekanan 2 atm selama 15 menit.
3.4.3 Media Mac. Conkey
Komposisi: Peptone
20,0 gram Lactose
20,0 gram Bile Salt
5,0 gram Sodium chloride
5,0 gram Agar
12,0 gram Phenol red
0,075 gram Cara pembuatan: ditimbang sebanyak 52 gram bahan, kemudian disuspensikan
dalam erlenmeyer dengan air suling yang ditambahkan sedikit demi sedikit hingga 1000 ml. Dipanaskan sebentar sambil sekali- kali diaduk sampai seluruhnya larut
sempurna. Tutup erlenmeyer dengan kapas yang dilapisi aluminium foil. Disterilkan dalam autoklaf pada suhu 121
C dan tekanan 2 atm selama 15 menit.
3.4.4 Salmonella Shigella Agar SSA
Komposisi: Lab-Lemco powder 5,0 gram
Peptone 5,0 gram
d-glucose 10,0 gram
Bile Salt 8,5 gram
Sodium citrate 10,0 gram
Sodium thiosulfate 8,5 gram
Universitas Sumatera Utara
Ferric citrate 1,0 gram
Briliant green 0,00033 gram
Neutral red 0,025 gram
Bacto agar 13,5 gram
Cara pembuatan: ditimbang sebanyak 60 gram serbuk SSA, kemudian disuspensikan dalam erlenmeyer dengan air suling yang ditambahkan sedikit demi sedikit hingga
1000 ml. Dipanaskan sebentar sambil sesekali diaduk sampai seluruhnya larut sempurna. Selagi masih panas segera tuang ke dalam cawan petri steril sambil
meminimalisasi terjadinya kontaminasi, disimpan dalam lemari es. 3.4.5 Media Cair Glukosa
Cara pembuatan: ditimbang sebanyak 10 gram glukosa, dilarutkan dalam air suling hingga 100 ml. Bila pH 7 maka ditambahkan beberapa tetes NaOH 0,2 N.
3.4.6 Media Cair Maltosa
Kategori