3. Media disterilkan dengan menggunakan otoklaf pada tekanan 1 atm dan
suhu 121
о
C selama 15 menit. 4.
Media PDA dan PSA dituang ke dalam cawan petri, kemudian didinginkan hingga memadat.
b. Uji Respon Pertumbuhan Biomassa Miselia Rhizoctonia sp.
1.
Metode Pengujian Respon Pertumbuhan Dalam laminar air flow, 2 potong isolat Rhizoctonia sp. yang
dipotong dengan bor gabus berdiameter 1 cm ditanam secara aseptik ke dalam larutan PDL dan PSL yang diberi perlakuan pH dalam erlenmeyer.
Pertumbuhan isolat diamati selama diinkubasi empat hari, baik dalam keadaan digoyang menggunakan shaker pada 80 rpm maupun tanpa
digoyang. Tabel 1. Kombinasi Perlakuan Percobaan Respon Pertumbuhan Miselia
Cendawan Rhizoctonia sp. No. Perlakuan
Keterangan
Macam media A Penggoyangan media B pH media C
1 A1B1C1 PDL
+ 2
2 A1B1C2 PDL
+ 4
3 A1B1C3 PDL
+ 6
4 A1B1C4 PDL
+ 8
5 A1B1C5 PDL
+ 10
6 A1B1C6 PDL
+ 12
7 A1B2C1 PDL
- 2
8 A1B2C2 PDL
- 4
9 A1B2C3 PDL
- 6
10 A1B2C4 PDL
- 8
11 A1B2C5 PDL
- 10
12 A1B2C6 PDL
- 12
13 A2B1C1 PSL
+ 2
14 A2B1C2 PSL
+ 4
15 A2B1C3 PSL
+ 6
16 A2B1C4 PSL
+ 8
17 A2B1C5 PSL
+ 10
18 A2B1C6 PSL
+ 12
19 A2B2C1 PSL
- 2
20 A2B2C2 PSL
- 4
21 A2B2C3 PSL
- 6
22 A2B2C4 PSL
- 8
23 A2B2C5 PSL
- 10
24 A2B2C6 PSL
- 12
Keterangan : + digoyang menggunakan alat shaker 80 rpm - keadaan stasionerdiam tidak digoyang dengan shaker
Perlakuan percobaan dengan tiga faktor. Faktor pertama adalah macam media A dimana A1 adalah media PDL Potato Dextrose Liquid
dan A2 adalah media PSL Potato Sucrose Liquid. Faktor kedua adalah perlakuan penggoyangan media B dengan dua taraf, yaitu B1 adalah
penggoyangan media larutan menggunakan alat shaker selama diinkubasi, dan B2 adalah cendawan yang diinkubasi dalam media dengan keadaan
diam stasioner. Faktor yang ketiga adalah faktor derajat kemasamanpH C dengan 6 taraf, dimana taraf C1 adalah pH 2, taraf C2 adalah pH 4,
taraf C3 adalah pH 6, taraf C4 adalah pH 8, taraf C5 adalah pH 10, dan taraf C6 adalah pH 12. Dengan demikian terdapat 24 macam kombinasi
perlakuan masing-masing dengan 5 ulangan. Tiap ulangan berupa isolat Rhizoctonia
sp. yang dibiakan dalam media cair pada sebuah erlenmeyer. 2. Pengambilan Data Biomassa Miselia
1. Bobot kertas saring ditimbang terlebih dahulu sebelum digunakan
untuk menyaring, kemudian miselia dipisahkan dari larutan dengan kertas saring tersebut, kemudian kertas saring beserta miselia dioven
selama 24 jam dengan temperatur 47
о
C. Dengan timbangan analitik bobot kering kertas saring bersama-sama miselia ditimbang.
2. Bobot kering miselia adalah bobot kering kertas saring bersama-sama
miselia yang telah dioven dikurangi bobot kertas saring sebelum digunakan dan dikurangi bobot kering potongan agar.
c. Uji Respon Pertumbuhan Diameter Koloni Isolat Rhizoctonia sp.
