Alat dan Bahan .1 Alat-alat Hewan Percobaan Pengumpulan dan Pengolahan Sampel .1 Pengumpulan sampel

Tabel 3.2 Desain penelitian efek relaksasi EEDPT pada otot polos trakea Subjek Ach+EEDPT 1 mgml 2 mgml 3 mgml 4 mgml 5 mgml 6 mgml 7 mgml 8 mgml S 1 K 11 K 21 K 31 K 41 K 51 K 61 K 71 K 81 S 2 K 12 K 22 K 32 K 42 K 52 K 62 K 72 K 82 S 3 K 13 K 23 K 33 K 43 K 53 K 63 K 73 K 83 S 4 K 14 K 24 K 34 K 44 K 54 K 64 K 74 K 84 S 5 K 15 K 25 K 35 K 45 K 55 K 65 K 75 K 85 Jumlah ΣK 1 ΣK 2 ΣK 3 ΣK 4 ΣK 5 ΣK 6 ΣK 7 ΣK 8 Mean �� 1= ∑ � 1 5 �� 2= ∑ � 2 5 �� 3= ∑ � 3 5 �� 4= ∑ � 4 5 �� 5= ∑ � 5 5 �� 6= ∑ � 6 5 �� 7= ∑ � 7 5 �� 8= ∑ � 8 5 Keterangan: K xy K = relaksasi trakea oleh EEDPT x = konsentrasi asetilkolin y = subjek Tabel 3.3 Desain penelitian mekanisme efek relaksasi EEDPT pada otot polos trakea melalui penghambatan fosfodiesterase oleh teofilin Subjek Teofilin+Ach+EEDPT 1 mg 2 mg 3 mg 4 mg 5 mg 6 mg 7 mg 8 mg S 1 M 11 M 21 M 31 M 41 M 51 M 61 M 71 M 81 S 2 M 12 M 22 M 32 M 42 M 52 M 62 M 72 M 82 S 3 M 13 M 23 M 33 M 43 M 53 M 63 M 73 M 83 S 4 M 14 M 24 M 34 M 44 M 54 M 64 M 74 M 84 S 5 M 15 M 25 M 35 M 45 M 55 M 65 M 75 M 85 Jumlah ΣM 1 ΣM 2 ΣM 3 ΣM 4 ΣM 5 ΣM 6 ΣM 7 ΣM 8 Mean �� 1= ∑ � 1 5 �� 2= ∑ � 2 5 �� 3= ∑ � 3 5 �� 4= ∑ � 4 5 �� 5= ∑ � 5 5 �� 6= ∑ � 6 5 �� 7= ∑ � 7 5 �� 8= ∑ � 8 5 Keterangan: M xy M = relaksasi trakea oleh EEDPT dengan inkubasi awal menggunakan teofilin x = konsentrasi asetilkolin y = subjek 3.1 Alat dan Bahan 3.1.1 Alat-alat Alat- alat yang digunakan pada penelitian ini adalah alat-alat bedah, alat- alat gelas laboratorium, amplifier ADinstrument, blender, lemari pengering, micropipet Socorex, Swiss, mortir dan stamfer, neraca analitik, neraca kasar, Universitas Sumatera Utara organ bath volume 40 mL Panlab, oven listrik, recorder ADinstrument, rotary evaporator Haake D, timbangan hewan, transducer ADinstrument, vortex.

3.1.2 Bahan-bahan

Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah daun pugun tanoh. Bahan-bahan kimia yang digunakan adalah etanol 96, air suling, gas karbogen mengandung 95 oksigen dan 5 karbondioksida Tri Gases, Medan, larutan Kreb’s mengandung natrium klorida, kalium klorida, kalsium klorida, magnesium sulfat, natrium bikarbonat, kalium dihidrofosfat dan glukosa, dimetil sulfoksida DMSO, asetilkolin klorida, dan teofilin.

3.2 Hewan Percobaan

Hewan yang digunakan pada penelitian ini adalah marmut Cavia porcellus jantan, berat badan antara 300-500 gram dengan usia 3-4 bulan. Hewan ini diaklimatisasi selama 1 satu minggu dengan tujuan untuk menyeragamkan makanan dan hidupnya dengan kondisi yang serba sama sehingga dianggap memenuhi syarat untuk penelitian. Sebelum digunakan pada tahap penelitian, hewan percobaan dipuasakan selama 24 jam agar kontraksi trakea yang digunakan tidak dipengaruhi oleh zat-zat lain. 3.3 Pengumpulan dan Pengolahan Sampel 3.3.1 Pengumpulan sampel Pengumpulan sampel dilakukan secara purposif, yaitu tanpa membandingkan tumbuhan yang sama dari daerah lain. Tumbuhan yang digunakan dalam penelitian ini adalah pugun tanoh yang diambil dari Kecamatan Pancur Batu, Kabupaten Deli Serdang, Provinsi Sumatera Utara. Bagian Universitas Sumatera Utara tumbuhan yang digunakan yaitu daun pugun tanoh. Daun yang diambil sebagai sampel adalah keseluruhan dari daun tumbuhan yang masih dalam keadaan baik.

3.3.2 Identifikasi tanaman

Identifikasi tanaman daun pugun tanoh dilakukan di Pusat Penelitian Biologi, Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia LIPI Bogor, Indonesia.

3.3.3 Pengolahan sampel

Sampel yang digunakan pada penelitian ini adalah daun pugun tanoh yang masih segar. Daun dicuci hingga bersih untuk menghilangkan tanah dan pengotoran lainnya, kemudian ditiriskan dan ditimbang. Diperoleh berat basah. Selanjutnya daun tersebut dikeringkan dalam lemari pengering sampai daun kering ditandai bila diremas rapuh. Simplisia yang telah kering ditimbang, kemudian diblender menjadi serbuk. Lalu dimasukkan ke dalam kantung plastik dengan silika gel dan di simpan pada suhu kamar.

3.4 Karakterisasi Simplisia