Penetapan Kadar Mineral Kalsium, Natrium dan Magnesium Pada Daun Salam (Eugenia polyantha Wight) Secara Spektrofotometri Serapan Atom

Lampiran 2. Sampel yang digunakan

Gambar 2. Daun Salam Gambar 1. Pohon Salam

Lampiran 3. Gambar Alat yang digunakan

Gambar 4. Alat Spektrofotometer Serapan Atom Hitachi Z-2000

Lampiran 4. Hasil Analisis Kualitatif

Gambar 6. Kristal Kalsium Sulfat (perbesaran 10x10)

Gambar 7. Kristal Natrium Pikrat (Perbesaran 10x10)

Gambar 8. Endapan Merah Terang (+ magnesium)

Kristal Kalsium Sulfat

Lampiran 5. Bagan Alir Proses Destruksi Kering

1. Bagan Alir Proses Destruksi Sampel ( Daun Salam Segar )

Dibersihkan dari pengotoran

Di siram dengan akua demineralisata kemudi- an ditiriskan dan di keringkan dengan cara diangin-anginkan dan dipotong-ptong kira-kira ± 1 cm

Di haluskan dengan blender

Ditimbang sebanyak 10 g didalam krus porselen Di arangkan di atas hot plate

Diabukan di tanur dengan temperatur awal 100° C dan perlahan-lahan temperatur dinaikkan menjadi 500° C dengan interval 25° C setiap 5 menit

Dilakukan selama 48 jam dan dibiarkan dingin dalam desikator

di tambahkan 5 ml HNO3 (1:1) diuapkan di atas hot plate

di masukkan kembali kedalam tanur dengan tempe-ratur awal 100° C dan perlahan-lahan tempe-

ratur dinaikkan menjadi 500° C dengan interval 25° C setiap 5 menit

dilakukan selama 1 jam dan dibiarkan hingga dingin dalam desikator

500g Daun Salam Segar

Sampel yang telah dihaluskan

Sampel Hasil Destruksi Abu

Lampiran 5. (Lanjutan)

2. Bagan Alir Proses Destruksi Sampel (Daun Salam Rebus)

Dibersihkan dari pengotoran dan di cuci dengan air mengalir,

Dipanaskan air hingga mendidih dan direbus daun salam segar selama 7 menit

Diangkat dan ditiriskan

Di keringkan dengan cara diangin-anginkan Dihaluskan dengan blender

Ditimbang sebanyak 10 g didalam krus porselen Di arangkan diatas hot plate

Diabukan di tanur dengan temperatur awal 100° C dan perlahan-lahan temperatur dinaikkan menjadi 500° C dengan interval 25° C setiap 5 menit Dilakukan selama 48 jam dan dibiarkan dingin dalam desikator

di tambahkan 5 ml HNO3 (1:1) diuapkan di atas hot plate

di masukkan kembali kedalam tanur dengan temperatur awal 100° C dan perlahan-lahan temperatur dinaikkan menjadi 500° C dengan interval 25° C setiap 5 menit

dilakukan selama 1 jam dan dibiarkan hingga dingin dalam desikator

500g Daun Salam Segar

Sampel yang telah dihaluskan

Sampel Hasil Destruksi Abu

Lampiran 6. Bagan Alir Pembuatan Larutan Sampel

Dilarutkan dengan 5 mL HNO3 (1:1) dalam krus Dipindahkan ke dalam labu tentukur 50 mL Dibilas krus porselen sebanyak tiga kali

dengan aquademineralisata dan dicukupkan dengan akua demineralisata hingga garis tanda

Disaring dengan menggunakan kertas saring Whatman No. 42

Dibuang 5 mL untuk menjenuhkan kertas saring

Dilakukan pengujian kualitatif

Dilakukan pengujian kuantitatif dengan Spektrofotometer serapan Atom pada λ 422,7 nm untuk logam kalsium, λ 589,0 nm untuk logam natrium, dan λ 285,2 nm untuk magnesium

Sampel Hasil Destruksi

Larutan Sampel

Lampiran 7. Data Hasil Pengukuran Absorbansi Larutan Standar Kalsium dan Perhitungan Persamaan Garis Regresi Kalsium dan koefisien korelas (r)

1. Data Hasil Pengukuran Absorbansi Larutan Standar Kalsium No Konsentrasi (µg/ml) (X) Absorbansi (Y)

1 0,000 0,0000

2 2,000 0,0975

3 4,000 0,1764

4 6,000 0,2716

5 8,000 0,3566

6 10,000 0,4426

2. Perhitungan Persamaan Garis Regresi Kalsium

No. X Y XY X2 Y2

1. 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,00000000 2. 2,0000 0,0975 0,1950 4,0000 0,00950625 3. 4,0000 0,1764 0,7056 16,0000 0,03111696 4. 6,0000 0,2716 1,6296 36,0000 0,07376656 5. 8,0000 0,3566 2,8528 64,0000 0,12716356 6. 10,0000 0,4426 4,4260 100,0000 0,19589476 ∑

30 1,3447 9,809 220 0,43744809 X_{= 5 Y = 0,22411}

a = ∑�� −(∑�)(∑�)/� ∑x2−(∑�)2/n

=

9,809 − (30)(1,3447 )/6 220 − (30)2/6

=

9,809 –6,7235

Lampiran 7. (Lanjutan)

=

3,0855

70 a

=

0,0440785 b

= y – ax

= 0,22411 - (0,0440785) (5) = 0,0037175

Maka persamaan garis regresinya adalah Y= ax + b

Y= 0,0440785X + 0,0037175 Maka koefisien korelasi (r): r = �.∑�� −(∑�)(∑�)

�[�.(∑�2)−(∑�)2)][�.(∑�2)−(∑�)2)

=

(6�9,809)−(30)(1,3447 )

�[6�220−(30)2)][6�0,43744809−(1,3447 )2)

=

18,513

�(420)(0,81647045 )

=

18,513

√342,917589

=

18,513

18,518 r = 0,9997

Lampiran 8. Data Hasil Pengukuran Absorbansi Larutan Standar Natrium dan Perhitungan Persamaan Garis Regresi Natrium dan Koefisien Korelasi (r)

1. Data Hasil Pengukuran Absorbansi Larutan Standar Natrium No Konsentrasi (µg/ml) (X) Absorbansi (Y)

1 0,000 0,0000

2 0,200 0,0099

3 0,400 0,0186

4 0,600 0,0284

5 0,800 0,0369

6 1,000 0,0450

2. Perhitungan Persamaan Garis Regresi Natrium

No. X Y XY X2 Y2

1. 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,00000000 2. 0,2000 0,0099 0,00198 0,0400 0,00009801 3. 0,4000 0,0186 0,00744 0,1600 0,00034596 4. 0,6000 0,0284 0,01704 0,3600 0,00080656 5. 0,8000 0,0369 0,02952 0,6400 0,00136161 6. 1,0000 0,0450 0,0450 1,0000 0,002025 ∑ 3 0,1388 0,10098 2,2 0,00463714 X_{= 0,5 Y = 0,02313}

a = ∑�� −(∑�)(∑�)/� ∑x2−(∑�)2/n

=

0,10098 − (3)(0,1388 )/6 2,2− (3)2/6

=

0,10098 –0,0694

Lampiran 8. (Lanjutan)

=

0,03158

0,7 a

=

0,0451143 b

= y – ax

= 0,02313 - (0,0451143) (0,5) = 0,0005728

Maka persamaan garis regresinya adalah Y= ax + b

Y= 0,0451143X + 0,0005728 Maka koefisien korelasi (r): r = �.∑�� −(∑�)(∑�)

�[�.(∑�2)−(∑�)2)][�.(∑�2)−(∑�)2)

=

(6�0,10098 )−(3)(0,1388 )

�[6�2,2−(3)2)][6�0,00463714−(0,1388 )2)

=

0,18948

�(4,2)(0,0085574 )

=

0,18948

√0,03594108

=

0,18948

0,18958 r = 0,9995

Lampiran 9. Data Hasil Pengukuran Absorbansi Larutan Standar Magnesium dan Perhitungan Persamaan Garis Regresi Magnesium dan Koefisien Korelasi (r)

1. Data Hasil Pengukuran Absorbansi Larutan Standar Magnesium No Konsentrasi (µg/ml) (X) Absorbansi (Y)

1 0,000 0,0000

2 0,500 0,2229

3 1,000 0,4284

4 1,500 0,6065

5 2,000 0,8317

6 2,500 1,0133

2. Perhitungan Persamaan Garis Regresi Magnesium

No. X Y XY X2 Y2

1. 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,00000000 2. 0,5000 0,2229 0,11145 0,2500 0,04968441 3. 1,0000 0,4284 0,4284 1,0000 0,18352656 4. 1,5000 0,6065 0,90975 2,2500 0,36784225 5. 2,0000 0,8317 1,6634 4,0000 0,69172489 6. 2,5000 1,0133 2,53325 6,2500 1,02677689 ∑

7,5 3,1028 5,64625 13,75 2,319555 X _{= 1,25 Y = 0,51713}

a = ∑�� −(∑�)(∑�)/� ∑x2−(∑�)2/n

=

5,64625 – (7,5)(3,1028 )/6 13,75 − (7,5)2/6

=

5,64625 –3,8785

Lampiran 9. (Lanjutan)

=

1,76775

4,375

a

=

0,4040571 b

= y – ax

= 0,51713 - (0,4040571) (1,25) = 0,0120619

Maka persamaan garis regresinya adalah Y= ax + b

Y= 0,4040571X + 0,0120619 Maka koefisien korelasi (r): r = �.∑�� −(∑�)(∑�)

�[�.(∑�2)−(∑�)2)][�.(∑�2)−(∑�)2)

=

(6�5,64625 )−(7,5)(3,1028)

�[6�13,75−(7,5)2)][6�2,319555−(3,1028 )2)

=

10,6065

�(26,25)(4,28993216 )

=

10,6065

√112,6107192

=

10,6065

10,6118 r = 0,9995

Lampiran 10. Hasil Analisis Kadar Kalsium, Natrium dan Magnesium dalam Sampel

A. Sampel Daun Salam Segar 1. Hasil Analisis Kadar Kalsium

No Sampel

Berat Sampel (g)

Absorbansi (A)

Konsentrasi (µg/ml)

Kadar (mg/100g)

1 10,0175 0,1726 3,8314 764,9413

2 10,0192 0,1723 3,8246 763,4541

3 10,0176 0,1723 3,8246 763,5761

4 10,0163 0,1725 3,8291 764, 5737

5 10,0182 0,1722 3,8223 763, 0712

6 10,0196 0,1719 3,8155 761,6072

2. Hasil Analisis Kadar Natrium No

Sampel

Berat Sampel (g)

Absorbansi (A)

Konsentrasi (µg/ml)

Kadar (mg/100g)

1 10,0175 0,0277 0,6012 30,0074

2 10,0192 0,0276 0,5990 29,8926

3 10,0176 0,0277 0,6012 30,0071

4 10,0163 0,0278 0,6035 30,1258

5 10,0182 0,0279 0,6057 30,2299

6 10,0196 0,0280 0,6079 30,3355

3. Hasil Analisis Kadar Magnesium No

Sampel

Berat Sampel (g)

Absorbansi (A)

Konsentrasi (µg/ml)

Kadar (mg/100g)

1 10,0175 0,5786 1,4021 139,9650

2 10,0192 0,5781 1,4009 139,8215

4 10,0163 0,5788 1,4026 140,0052

5 10,0182 0,5786 1,4021 139,9818

6 10,0196 0,5787 1,4024 139,9657

B. Sampel Daun Salam Rebus 1. Hasil Analisis Kadar Kalsium

No Sampel

Berat Sampel (g)

Absorbansi (A)

Konsentrasi (µg/ml)

Kadar (mg/100g)

1 10,0054 0,1529 3,3844 676, 5146

2 10,0145 0,1538 3,4049 679, 9940

3 10,0034 0,1538 3,4049 680,7485

4 10,0097 0,1535 3,3981 678, 9614

5 10,0154 0,1535 3,3981 678, 5750

6 10,0297 0,1531 3,3890 675,7929

2. Hasil Analisis Kadar Natrium No

Sampel

Berat Sampel (g)

Absorbansi (A)

Konsentrasi (µg/ml)

Kadar (mg/100g)

1 10,0054 0,0226 0,4882 24,3968

2 10,0145 0,0227 0,4904 24,4844

3 10,0034 0,0229 0,4949 24,7365

4 10,0097 0,0228 0,4926 24,6061

5 10,0154 0,0227 0,4904 24,4822

6 10,0297 0,0228 0,4926 24,5570

3. Hasil Analisis Kadar Magnesium No

Sampel

Berat Sampel (g)

Absorbansi (A)

Konsentrasi (µg/ml)

Kadar (mg/100g)

2 10,0172 0,5035 1,2163 121,4211

3 10,0034 0,5031 1,2153 121,4887

4 10,0097 0,5032 1,2155 121,4322

5 10,0154 0,5028 1,2145 121,2632

Lampiran 11. Contoh perhitungan Kadar Kalsium, Natrium dan Magnesium Dalam Sampel

A. Contoh Perhitungan Kadar Kalsium, Natrium dan Magnesium pada Daun Salam Segar

1. Contoh Perhitungan Kadar Kalsium

Berat sampel yang ditimbang (W) = 10,0175 gram Absorbansi (Y) = 0,1726

Persamaan Regresi:Y= 0,0440785X + 0,0037175 X = 0,1726−0,0037175

0,0440785 = 3,8314 µg/ml Konsentrasi Kalsium = 3,8314 µg/ml

(g) Sampel Berat

n pengencera Faktor

x (ml) Volume x

(µg/ml) i

Konsentras

Kalsium

Kadar =

=

g 10,0175

400 x ml 50 x µg/ml 3,8314

= 7649, 413 µg/g = 764, 9413 mg/100g

2. Contoh Perhitungan Kadar Natrium

Berat sampel yang ditimbang (W) = 10,0175 gram Absorbansi (Y) = 0,0277

Persamaan Regresi:Y= 0,0451143X + 0,0005728 X = 0,0277−0,0005728

0,0451143 = 0,6012 µg/ml Konsentrasi Natrium = 0,6012 µg/ml

Lampiran 11. (Lanjutan) (g) Sampel Berat n pengencera Faktor x (ml) Volume x (µg/ml) i Konsentras Natrium

Kadar =

= g 10,0175 100 x ml 50 x µg/ml 0,6012

= 300,074 µg/g = 30,0074 mg/100g 3. Contoh Perhitungan Kadar Magnesium

Berat sampel yang ditimbang (W) = 10,0175 gram Absorbansi (Y) = 0,5786

Persamaan Regresi:Y= 0,4040571X + 0,0120619 X = 0,5786−0,0120619

0,4040571 = 1,4021 µg/ml Konsentrasi Magnesium = 1,4021 µg/ml

(g) Sampel Berat n pengencera Faktor x (ml) Volume x (µg/ml) i Konsentras Magnesium

Kadar =

= g 10,0175 200 x ml 50 x µg/ml 1,4021

= 1399,650 µg/g = 139,9650 mg/100g

Selanjutnya dilakukan perhitungan kadar kalsium, Natrium dan Magnesium dengan cara yang sama terhadap semua sampel.

Lampiran 11. (Lanjutan)

B. Contoh Perhitungan Kadar Kalsium, Natrium dan Magnesium pada Daun Salam Rebus

1. Contoh Perhitungan Kadar Kalsium

Berat sampel yang ditimbang (W) = 10,0054 gram Absorbansi (Y) = 0,1529

Persamaan Regresi:Y= 0,0440785X + 0,0037175 X = 0,1529−0,0037175

0,0440785 = 3,3844 µg/ml Konsentrasi Kalsium = 3,3844 µg/ml

(g) Sampel Berat

n pengencera Faktor

x (ml) Volume x

(µg/ml) i

Konsentras

Kalsium

Kadar =

=

g 10,0054

400 x ml 50 x µg/ml 3,3844

= 6765, 146 µg/g = 676, 5146 mg/100g

2. Contoh Perhitungan Kadar Natrium

Berat sampel yang ditimbang (W) = 10,0054 gram Absorbansi (Y) = 0,0226

Persamaan Regresi:Y= 0,0451143X + 0,0005728 X = 0,0226−0,0005728

0,0451143 = 0,4882 µg/ml Konsentrasi Natrium = 0,4882 µg/ml

Lampiran 11. (Lanjutan) (g) Sampel Berat n pengencera Faktor x (ml) Volume x (µg/ml) i Konsentras Natrium

Kadar =

= g 10,0054 100 x ml 50 x µg/ml 0,4882

= 243, 968 µg/g = 24, 3968 mg/100g 3. Contoh Perhitungan Kadar Magnesium

Berat sampel yang ditimbang (W) = 10,0178 gram Absorbansi (Y) = 0,5033

Persamaan Regresi:Y= 0,4040571X + 0,0120619 X = 0,5033−0,0120619

0,4040571 = 1,2158 µg/ml Konsentrasi Magnesium = 1,2158 µg/ml

(g) Sampel Berat n pengencera Faktor x (ml) Volume x (µg/ml) i Konsentras Magnesium

Kadar =

= g 10,0178 200 x ml 50 x µg/ml 1,2158

= 1213,639 µg/g = 121,3639 mg/100g

Selanjutnya dilakukan perhitungan kadar kalsium, Natrium dan Magnesium dengan cara yang sama terhadap semua sampel.

Lampiran 12. Perhitungan Statistik Kadar Kalsium pada Sampel 1. Perhitungan Statistik Kadar Kalsium pada Daun Salam Segar

No Kadar (mg/100g) (�_�− ��) (�_�− ��)2

1 764,9413 1,404 1,971216

2 763,4541 -0,0832 0,00692224

3 763, 5761 0,0388 0,00150544

4 764, 5737 1,0364 1,07412496

5 763, 0712 -0,4661 0,21724921

6 761, 6072 -1,9301 3,72528601

Σ 4581, 2236 6,99630386

�� 763, 5373

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

=

�

6,99630386 6−1 = 1,18290

Pada interval kepercayaan 95% dengan nilai α = 0,05, n =6, dk (n-1) = 5 dari tabel distribusi t diperoleh nilat t tabel = 2,5706.

Data diterima jika thitung ≤ ttabel thitung = n SD X Xi / ) ( −

thitung1 =

6 / 1,18290 404 , 1 = 0,482917 4041 , 1

= 2,9073 (ditolak) thitung2 = 0,482917 0,0832 -= 0,1722 thitung3 = 0,482917 0388 , 0 = 0,0803 thitung4 =

0,482917 0364 , , 1 = 2,1461 thitung5 = 0,482917 4661 , 0 − = 0,9652

Lampiran 12. (Lanjutan)

thitung6 =

0,482917 9301 , 1 −

= 3,9967 (ditolak)

Data ke-1 dan ke-6 ditolak, oleh karena itu perhitungan diulangi dengan cara yang sama tanpa mengikutsertakan data ke-1 dan ke-6.

No Kadar

(mg/100g)

(�_�− ��) (�_� − ��)2

2 763, 4541 -0,2147 0,04609609

3 763, 5761 -0,0927 0,00859329

4 764, 5737 0,9049 0,81884401

5 763, 0712 -0,5976 0,35712576

Σ 3054, 6751 1,23065915

�� 763, 6688

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

=

�

1,23065915 4−1 = 0,640484

Pada interval kepercayaan 95% dengan nilai α = 0,05, n =4, dk (n-1) = 3 dari tabel distribusi t diperoleh nilat t tabel = 3,1824.

Data diterima jika thitung ≤ ttabel thitung = n SD X Xi / ) ( −

thitung2 =

4 / 0,640484 2147 , 0 − = 320242 , 0 2147 , 0 − = 0,6704 thitung3 =

320242 , 0 0927 , 0 − = 0,2895

Lampiran 12. (Lanjutan)

thitung4 =

320242 ,

0

9049 , 0

= 2,8257 thitung5 =

320242 ,

0

5976 , 0 −

= 1,8650

Dari hasil perhitungan di atas diperoleh semua t hitung < t tabel, maka semua data tersebut diterima.

Maka kadar kalsium sebenarnya dalam daun salam segar µ = X ± (t (α/2, dk) x SD / √n )

= 763, 6688 ± (3,1824 x 0,640484 /√4) = (763, 6688 ± 1,019138) mg/100g.

2. Perhitungan Statistik Kadar Kalsium pada Daun Salam Rebus No Kadar (mg/100g) (�_�− ��) (�_�− ��)2

1 676,5146 -1,9165 3,67297225

2 679,9940 1,5629 2,44265641

3 680,7485 2,3174 5,37034276

4 678,9614 0,5303 0,28121809

5 678, 5750 0,1439 0,02070721

6 675,7929 -2,6382 6,96009924

Σ 4070, 5864 18,74799596

�� 678,4311

SD =

( )

1 -n

X

-Xi 2

∑

=

�

18,74799596 6−1 = 1,9363882

Pada interval kepercayaan 95% dengan nilai α = 0,05, n =6, dk (n-1) = 5 dari tabel distribusi t diperoleh nilat t tabel = 2,5706.

Lampiran 12. (Lanjutan) Data diterima jika thitung ≤ ttabel thitung =

n SD X Xi / ) ( − thitung1 = 6 / 1,9363882 9165 , 1 − = 7905272 , 0 9165 , 1 − = 2,4243 thitung2 = 7905272 , 0 1,5629 = 1,9770 thitung3 =

7905272 , 0 3174 , 2

= 2,9314 (ditolak) thitung4 = 7905272 , 0 5303 , 0 = 0,6708 thitung5 =

7905272 , 0 1439 , 0 = 0,1820 thitung6 = 7905272 , 0 6382 , 2 −

= 3,3372 (ditolak)

Data ke-3 dan ke-6 ditolak, oleh karena itu perhitungan diulangi dengan cara yang sama tanpa mengikutsertakan data ke-3 dan ke-6.

No Kadar

(mg/100g)

(�_�− ��) (�_� − ��)2

1 676,5146 -1,9967 3,98681089

2 679,9940 1,4827 2,19839929

4 678,9614 0,4501 0,20259001

5 678,5750 0,0637 0,00405769

Σ 2714, 045 6,39185788

�� 678,5113

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

=

�

6,39185788 4−1 = 1,4596641

Lampiran 12. (Lanjutan)

Pada interval kepercayaan 95% dengan nilai α = 0,05, n =4, dk (n-1) = 3 dari tabel distribusi t diperoleh nilat t tabel = 3,1824.

Data diterima jika thitung ≤ ttabel thitung =

n SD X Xi / ) ( − thitung1 = 4 / 1,4596641 9967 , 1 − = 7298320 , 0 9967 , 1 − = 2,7358 thitung2 = 7298320 , 0 4827 , 1 = 2,0316 thitung4 =

7298320 , 0 4501 , 0 = 0,6167 thitung5 = 7298320 , 0 0637 , 0 = 0,0873

Dari hasil perhitungan di atas diperoleh semua t hitung < t tabel, maka semua data tersebut diterima.

Maka kadar kalsium sebenarnya dalam daun salam rebus µ = X ± (t (α/2, dk) x SD / √n )

= 678,5113 ± (3,1824 x 1,45966 /√4) = (678,5113 ± 2,3226173) mg/100g.

Lampiran 13. Perhitungan Statistik Kadar Natrium pada Sampel 1. Perhitungan Statistik Kadar Natrium pada Daun Salam Segar

No Kadar (mg/100g) (�_�− ��) (�_�− ��)2

1 30,0074 -0,0923 0,00851929

2 29,8926 -0,2071 0,04289041

3 30,0071 -0,0926 0,00857476

4 30,1258 0,0261 0,00068121

5 30,2299 0,1302 0,01695204

6 30,3355 0,2358 0,05560164

Σ 180,5983 0,13321935

�� 30,0997

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

=

�

0,13321935 6−1 =0,163229

Pada interval kepercayaan 95% dengan nilai α = 0,05, n =6, dk (n-1) = 5 dari tabel distribusi t diperoleh nilat t tabel = 2,5706.

Data diterima jika thitung ≤ ttabel thitung = n SD X Xi / ) ( −

thitung1 =

6 / 0,163229 0923 , 0 − = 0666380 , 0 0923 , 0 − = 1,3850 thitung2 = 0666380 , 0 0,2071

-= 3,1078 (ditolak) thitung3 =

0666380 , 0 0926 , 0 − = 1,3895

thitung4 = 0666380 , 0 0261 , 0 = 0,3916 thitung5 = 0666380 , 0 1302 , 0 = 1,9538 Lampiran 13. (Lanjutan)

thitung6 = 0666380 , 0 2358 , 0

= 3,5385 (ditolak)

Data ke-2 dan ke-6 ditolak, oleh karena itu perhitungan diulangi dengan cara yang sama tanpa mengikutsertakan data ke-2 dan ke-6.

No Kadar

(mg/100g)

(�_�− ��) (�_� − ��)2

1 30,0074 -0,0851 0,00724201

3 30,0071 -0,0854 0,00729316

4 30,1258 0,0333 0,00110889

5 30,2299 0,1374 0,01887876

Σ 120,3702 0,03452282

�� 30,0925

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

=

�

0,03452282 4−1 = 0,107274

Pada interval kepercayaan 95% dengan nilai α = 0,05, n =4, dk (n-1) = 3 dari tabel distribusi t diperoleh nilat t tabel = 3,1824.

Data diterima jika thitung ≤ ttabel thitung = n SD X Xi / ) ( −

thitung1 = 4 / 0,107274 0851 , 0 − ₌ 053637 , 0 0851 , 0 − = 1,5865 thitung3 =

053637 , 0 0854 , 0 − = 1,5921 Lampiran 13. (Lanjutan)

thitung4 = 053637 , 0 0333 , 0 = 0,6208 thitung5 =

053637 , 0 1374 , 0 = 2,5616

Dari hasil perhitungan di atas diperoleh semua t hitung < t tabel, maka semua data tersebut diterima.

Maka kadar natrium sebenarnya dalam daun salam segar µ = X ± (t (α/2, dk) x SD / √n )

= 30,0925 ± (3,1824 x 0,107274 /√4) = (30,0925± 0,170694) mg/100g.

2. Perhitungan Statistik Kadar Natrium pada Daun Salam Rebus No Kadar (mg/100g) (�_�− ��) (�_�− ��)2

1 24,3968 -0,147 0,021609

2 24,4844 -0,0594 0,00352836

3 24,7365 0,1927 0,03713329

4 24,6061 0,0623 0,00388129

5 24,4822 -0,0616 0,00379456

6 24,5570 0,0132 0,00017424

Σ 147,263 0,07012074

�� 24,5438

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

=

�

0,07012074 6−1 = 0,118423

Pada interval kepercayaan 95% dengan nilai α = 0,05, n =6, dk (n-1) = 5 dari tabel distribusi t diperoleh nilat t tabel = 2,5706.

Lampiran 13. (Lanjutan) Data diterima jika thitung ≤ ttabel thitung =

n SD X Xi / ) ( − thitung1 = 6 / 0,118423 147 , 0 − = 048345 , 0 147 , 0 −

= 3,0406 (ditolak) thitung2 = 048345 , 0 0,0594 -= 1,2286 thitung3 = 048345 , 0 1927 , 0

= 3,9859 (ditolak) thitung4 = 048345 , 0 0623 , 0 = 1,2886 thitung5 =

048345 , 0 0616 , 0 − = 1,2741 thitung6 = 048345 , 0 0132 , 0 = 0,2730

Data ke-1 dan ke-3 ditolak, oleh karena itu perhitungan diulangi dengan cara yang sama tanpa mengikutsertakan data ke-1 dan ke-3.

No Kadar

(mg/100g)

(�_�− ��) (�_� − ��)2

1 24,4844 -0,048 0,002304

2 24,6061 0,0737 0,00543169

4 24,4822 -0,0502 0,00252004

5 24,5570 0,0246 0,00060516

Σ 98,1297 0,01086089

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

=

�

0,01086089 4−1 = 0,060169

Lampiran 13. (Lanjutan)

Pada interval kepercayaan 95% dengan nilai α = 0,05, n =4, dk (n-1) = 3 dari tabel distribusi t diperoleh nilat t tabel = 3,1824.

Data diterima jika thitung≤ ttabel thitung = n SD X Xi / ) ( −

thitung2 =

4 / 0,060169 048 , 0 − = 030084 , 0 048 , 0 − = 1,5955 thitung4 =

030084 , 0 0737 , 0 = 2,4498 thitung5 = 030084 , 0 0502 , 0 − = 1,6686 thitung6 = 030084 , 0 0246 , 0 = 0,8177

Dari hasil perhitungan di atas diperoleh semua t hitung < t tabel, maka semua data tersebut diterima.

Maka kadar natrium sebenarnya dalam daun salam rebus µ = X ± (t (α/2, dk) x SD / √n )

= 24,5324 ± (3,1824 x 0,060169 /√4) = (24,5324± 0,095739) mg/100g.

Lampiran 14. Perhitungan Statistik Kadar Magnesium pada Sampel 1. Perhitungan Statistik Kadar Magnesium pada Daun Salam Segar

No Kadar (mg/100g) (�_�− ��) (�_�− ��)2

1 139,9650 0,0345 0,00119025

2 139,8215 -0,109 0,011881

3 139,8439 -0,0866 0,00749956

4 140,0052 0,0747 0,00263169

5 139,9818 0,0513 0,00558009

6 139,9657 0,0352 0,00123904

Σ 839,5831 0,03002163

�� 139,9305

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

=

�

0,03002163 6−1 = 0,077487

Pada interval kepercayaan 95% dengan nilai α = 0,05, n =6, dk (n-1) = 5 dari tabel distribusi t diperoleh nilat t tabel = 2,5706.

Data diterima jika thitung ≤ ttabel thitung = n SD X Xi / ) ( −

thitung1 =

6 / 0,077487 0345 , 0 = 031634 , 0 0345 , 0 = 1,0906 thitung2 = 031634 , 0 0,109

thitung3 = 031634 , 0 0866 , 0 −

= 2,7376 (ditolak) thitung4 = 031634 , 0 0513 , 0 = 1,6217 thitung5 =

031634 , 0 0747 , 0 = 2,3614 Lampiran 14. (Lanjutan)

thitung6 = 031634 , 0 0352 , 0 = 1,1128

Data ke-2 dan ke-3 ditolak, oleh karena itu perhitungan diulangi dengan cara yang sama tanpa mengikutsertakan data ke-2 dan ke-3.

No Kadar

(mg/100g)

(�_�− ��) (�_� − ��)2

1 139,9650 -0,0144 0,00020736

4 139,9818 0,0024 0,00000576

5 140,0052 0,0258 0,00066564

6 139,9657 -0,0137 0,00018769

Σ 559,9177 0,00106645

�� 139,9794

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

=

�

0,00106645 4−1 = 0,018854

Pada interval kepercayaan 95% dengan nilai α = 0,05, n =4, dk (n-1) = 3 dari tabel distribusi t diperoleh nilat t tabel = 3,1824.

thitung = n SD X Xi / ) ( − thitung1 = 4 / 0,018854 0144 , 0 − = 009427 , 0 0144 , 0 − = 1,5275 thitung4 = 009427 , 0 0024 , 0 = 0,2546 Lampiran 14. (Lanjutan)

thitung5 =

009427 , 0 0258 , 0 = 2,7368 thitung6 = 009427 , 0 0137 , 0 − = 1,4533

Dari hasil perhitungan di atas diperoleh semua t hitung < t tabel, maka semua data tersebut diterima.

Maka kadar magnesium sebenarnya dalam daun salam segar µ = X ± (t (α/2, dk) x SD / √n )

= 139,9747 ± (3,1824 x 0,018854 /√4) = (139,9747± 0,03) mg/100g.

2. Perhitungan Statistik Kadar Magnesium pada Daun Salam Rebus No Kadar (mg/100g) (�_�− ��) (�_�− ��)2

1 121,3639 -0,0402 0,00161604

2 121,4211 0,017 0,000289

3 121,4887 0,0846 0,00715716

4 121,4322 0,0281 0,00078961

5 121,2632 -0,1409 0,01985281

6 121,4559 0,0518 0,00268324

Σ 728,425 0,03243222

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

=

�

0,03243222 6−1 = 0,0805385

Pada interval kepercayaan 95% dengan nilai α = 0,05, n =6, dk (n-1) = 5 dari tabel distribusi t diperoleh nilat t tabel = 2,5706.

Lampiran 14. (Lanjutan) Data diterima jika thitung ≤ ttabel thitung =

n SD X Xi / ) ( − thitung1 = 6 / 0,0805385 0402 , 0 − = 032879 , 0 0402 , 0 − = 1,2226 thitung2 = 032879 , 0 017 , 0 = 0,5170 thitung3 =

032879 , 0 0846 , 0

= 2,5730 (ditolak) thitung4 = 032879 , 0 0281 , 0 = 0,8546 thitung5 =

032879 , 0 1409 , 0 −

= 4,285 (ditolak) thitung6 = 032879 , 0 0518 , 0 = 1,5754

Data ke-3 dan ke-5 ditolak, oleh karena itu perhitungan diulangi dengan cara yang sama tanpa mengikutsertakan data ke-3 dan ke-5.

No Kadar

(mg/100g)

(�_�− ��) (�_� − ��)2

1 121,3639 -0,0544 0,00295936

2 121,4211 0,0028 0,00000784

4 121,4322 0,0139 0,00019321

Σ 485,6731 0,00457417

�� 121,4183

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

=

�

0,00457417 4−1 = 0,0390477

Lampiran 14. (Lanjutan)

Pada interval kepercayaan 95% dengan nilai α = 0,05, n =4, dk (n-1) = 3 dari tabel distribusi t diperoleh nilat t tabel = 3,1824.

Data diterima jika thitung ≤ ttabel thitung = n SD X Xi / ) ( − thitung1 = 4 / 0,0390477 0,0554 -= 0,019524 0,0554 = 2,7863 thitung2 = 0,019524 0,0028 = 0,1434 thitung4 = 0,019524 0,0139 = 0,719 thitung6 =

019524 , 0 0376 , 0 = 1,9258

Dari hasil perhitungan di atas diperoleh semua t hitung < t tabel, maka semua data tersebut diterima.

Maka kadar magensium sebenarnya dalam daun salam rebus µ = X ± (t (α/2, dk) x SD / √n )

= 121,4183± (3,1824 x 0,019524/√4) = (121,4183± 0,062133 ) mg/100g.

Lampiran 15. Persentase penurunan Kadar Kalsium, Natrium dan Magnesium dalam Daun Salam Segar dan Daun Salm Rebus

1. Kalsium

Kadar kalsium Daun Salam Segar adalah 763,6688 mg/100g Kadar kalsium Daun Salam Rebus adalah 678,5113 mg/100g Persentase penurunan Kadar Kalsium Daun Salam adalah :

����� (���� − ����)������������� − ����� (���� − ����)�������������

����� (���� − �����������������) � 100%

(763,6688−678,5113)

763,6688 � 100% = 11,15 %

2. Natrium

Kadar natrium Daun Salam Segar adalah 30,0925 mg/100g Kadar kalsium Daun Salam Rebus adalah 24,5324 mg/100g Persentase penurunan Kadar natrium Daun Salam adalah :

����� (���� − ����)������������� − ����� (���� − ����)�������������

����� (���� − �����������������) � 100%

(30,0925 −24,5324)

30,0925 �100% = 18,48 %

3. Magnesium

Kadar Magnesium Daun Salam Segar adalah139,9747 mg/100g Kadar Magnesium Daun Salam Rebus adalah mg/100g

����� (���� − ����)������������� − ����� (���� − ����)�������������

����� (���� − �����������������) � 100%

(139,9747−121,4183)

139,9747 � 100% = 13,25%

Lampiran 16. Perhitungan Uji Akurasi Kadar Kalsium, Natrium dan Magnesium dalam Sampel Daun Salam

A. Perhitungan Uji Perolehan Kembali Kadar Kalsium dalam Daun Salam Berat sampel rata-rata uji recovery = 10,0202 gram

Kadar larutan standar yang ditambahkan (C*A):

C*A =

����������� ���� ���� �� ����� ℎ���

����� ������ ���� −���� x ml yang di tambahkan

= 1000 µg/ml

10,0202 � x 8 ml = 798,3872 µg/g = 79,8387 mg/100 g

1) Berat sampel yang ditimbang (W) = 10,0254 gram Absorbansi (Y) = 0,1898

Persamaan regresi: Y = 0,0440785 X + 0,0037175 X= 0,1898 − 0,0037175

0,0440785 = 4,2216 µg /ml

Konsentrasi Kalsium setelah ditambahkan larutan baku = 4,2216 µg /ml

(g) Sampel Berat

n pengencera Faktor

x (ml) Volume x

(µg/ml) i

Konsentras

(µg/g) Kalsium

Kadar =

g 10,0254

400 x ml 50 x µg/ml 4,2216

=

= 842, 1808 mg/100g

Kadar rata-rata sampel sebelum di tambah larutan baku (CA) = 763, 6688 mg/100g Kadar rata-rata sampel setelah di tambah larutan baku (CF) = 842, 1808 mg/100g

Maka % Perolehan Kembali Kalsium = CF-CA

C*A

x 100% = mg/100g 79,8387 mg/100g 763,6688) -(842,1808 x 100%

= 98,33 %

2) Berat sampel yang ditimbang (W) = 10,0217 gram Absorbansi (Y) = 0,1899

Persamaan regresi: Y = 0,0440785 X + 0,0037175 X= 0,1899 − 0,0037175

0,0440785 = 4,2239 µg /ml

Konsentrasi Kalsium setelah ditambahkan larutan baku = 4,2239 µg /ml

(g) Sampel Berat n pengencera Faktor x (ml) Volume x (µg/ml) i Konsentras (µg/g) Kalsium

Kadar =

g 10,0217 400 x ml 50 x µg/ml 4,2239 =

= 8429,508 µg /g = 842,9508 mg/100g

Kadar rata-rata sampel sebelum di tambah larutan baku (CA) = 763, 6688 mg/100g Kadar rata-rata sampel setelah di tambah larutan baku (CF) = 842,9508 mg/100g Maka % Perolehan Kembali Kalsium = CF-CA

C*A

= mg/100g 79,8387 mg/100g 763,6688) -(842,9508 x 100%

= 99,30 %

3) Berat sampel yang ditimbang (W) = 10,0135 gram Absorbansi (Y) = 0,1896

Lampiran 16. (Lanjutan)

Persamaan regresi: 0,0440785 X + 0,0037175 X= 0,1896 − 0,0037175

0,0440785 = 4,2171 µg /ml

Konsentrasi Kalsium setelah ditambahkan larutan baku = 4,2171 µg /ml

(g) Sampel Berat n pengencera Faktor x (ml) Volume x (µg/ml) i Konsentras (µg/g) Kalsium

Kadar =

g 10,0135 400 x ml 50 x µg/ml 4,2171 =

= 8422,829 µg/g = 842, 2829 mg/100g

Kadar rata-rata sampel sebelum di tambah larutan baku (CA) = 763, 6688 mg/100g Kadar rata-rata sampel setelah di tambah larutan baku (CF) = 842, 2829 mg/100g Maka % Perolehan Kembali Kalsium = CF-CA

C*A

x 100% = mg/100g 79,8387 mg/100g 6688) 763, -2829 (842, x 100%

= 98,46 %

B. Perhitungan Uji Perolehan Kembali Kadar Natrium dalam Daun Salam Berat sampel rata-rata uji recovery = 10,0202 gram

C*A =

����������� ���� ���� �� ����� ℎ���

����� ������ ���� −���� x ml yang di tambahkan

= 1000 µg/ml

10,0202 � x 0,3 mL = 29,939 µg/g

= 2,9939 mg/100 g

1. Berat sampel yang ditimbang (W) = 10,0254 gram Absorbansi (Y) = 0,0303

Lampira 16. (Lanjutan)

Persamaan regresi: Y = 0,0451143 X + 0,0005728 X= 0,0303 − 0,0005728

0,0451143 = 0,6589 µg /ml

Konsentrasi Natrium setelah ditambahkan larutan baku = 0,6589 µg /ml

(g) Sampel Berat n pengencera Faktor x (ml) Volume x (µg/ml) i Konsentras (µg/g) Natrium

Kadar =

g 10,0254 100 x ml 50 x µg/ml 0,6589 =

= 328,615 µg/g = 32,8615 mg/100g

Kadar rata-rata sampel sebelum di tambah larutan baku (CA) = 30,0925 mg/100g Kadar rata-rata sampel setelah di tambah larutan baku (CF) = 32,8615 mg/100g Maka % Perolehan Kembali Natrium = CF-CA

C*A

x 100% = mg/100g 2,9939 mg/100g 30,0925) -(32,8615 x 100%

= 92,48 %

2. Berat sampel yang ditimbang (W) = 10,0217 gram Absorbansi (Y) = 0,0304

Persamaan regresi: Y = 0,0451143 X + 0,0005728 X= 0,0304 − 0,0005728

0,0451143 = 0,6611 µg /ml

Konsentrasi Natrium setelah ditambahkan larutan baku = 0,6611 µg /ml

Lampiran 16. (Lanjutan)

(g) Sampel Berat n pengencera Faktor x (ml) Volume x (µg/ml) i Konsentras (µg/g) Natrium

Kadar =

g 10,0217 100 x ml 50 x µg/ml 0,6611 =

= 329, 834µg/g = 32, 9834 mg/100g

Kadar rata-rata sampel sebelum di tambah larutan baku (CA) = 30,0925 mg/100g Kadar rata-rata sampel setelah di tambah larutan baku (CF) = 32,9834 mg/100g Maka % Perolehan Kembali Natrium = CF-CA

C*A

x 100% = mg/100g 2,9939 mg/100g 30,0925) -(32,9834 x 100%

= 96,55 %

3. Berat sampel yang ditimbang (W) = 10,0135 gram Absorbansi (Y) = 0,0305

Persamaan regresi: Y = 0,0451143 X + 0,0005728 X= 0,0305 − 0,0005728

0,0451143 = 0,6633 µg /ml

(g) Sampel Berat n pengencera Faktor x (ml) Volume x (µg/ml) i Konsentras (µg/g) Natrium

Kadar =

g 10,0135 100 x ml 50 x µg/ml 0,6633 =

= 331,203 µg/g = 33,1203 mg/100g

Lampiran 16. (Lanjutan)

Kadar rata-rata sampel sebelum di tambah larutan baku (CA) = 30,0925 mg/100g Kadar rata-rata sampel setelah di tambah larutan baku (CF) = 33,1203 mg/100g Maka % Perolehan Kembali Natrium = CF-CA

C*A

x 100% = mg/100g 2,9939 mg/100g 30,0925) -(33,1203 x 100%

= 101,13 %

C. Perhitungan Uji Perolehan Kembali Kadar Magnesium dalam Daun Salam

Berat sampel rata-rata uji recovery = 10,0202 gram Kadar larutan standar yang ditambahkan (C*A):

C*A =

����������� ���� ���� �� ����� ℎ���

����� ������ ���� −���� x ml yang di tambahkan

= 1000 µg/ml

10,0202 � x 1,4 mL = 139,717 µg/g

= 13,9717 mg/100 g

1. Berat sampel yang ditimbang (W) = 10,0254 gram Absorbansi (Y) = 0,6377

Persamaan regresi: Y = 0,404057142 X + 0,012061904 X= 0,6377 − 0,012061904

0,404057142 = 1,5484 µg /ml

Konsentrasi Magnesium setelah ditambahkan larutan baku = 1,5484 µ g /ml

Lampiran 16. (Lanjutan)

(g) Sampel Berat n pengencera Faktor x (ml) Volume x (µg/ml) i Konsentras (µg/g) Magnesium

Kadar =

g 10,0254 200 x ml 50 x µg/ml 1,5484 =

= 1544,477 µg/g = 154,4477 mg/100g

Kadar rata-rata sampel sebelum di tambah larutan baku (CA) = 139,9747 mg/100g Kadar rata-rata sampel setelah di tambah larutan baku (CF) = 154,4477 mg/100g Maka % Perolehan Kembali Magnesium = CF-CA

C*A

x 100% = mg/100g 13,9717 mg/100g 139,9747) -(154,4477 x 100%

= 103,59 %

2. Berat sampel yang ditimbang (W) = 10,0217 gram Absorbansi (Y) = 0,6374

Persamaan regresi: Y = 0,404057142 X + 0,012061904 X= 0,6374 − 0,012061904

0,404057142 = 1,5476 µg /ml

(g) Sampel Berat n pengencera Faktor x (ml) Volume x (µg/ml) i Konsentras (µg/g) Magnesium

Kadar =

g 10,0217 200 x ml 50 x µg/ml 1,5476 =

= 1544,248 µg/g = 154,4248 mg/100g

Lampiran 16. (Lanjutan)

Kadar rata-rata sampel sebelum di tambah larutan baku (CA) = 139,9747 mg/100g Kadar rata-rata sampel setelah di tambah larutan baku (CF) = 154,4248 mg/100g Maka % Perolehan Kembali Magnesium = CF-CA

C*A

x 100% = mg/100g 13,9717 mg/100g 139,9747) -(154,4248 x 100%

= 103,42 % 3. Berat sampel yang ditimbang (W) = 10,0135 gram Absorbansi (Y) = 0,6387

Persamaan regresi: Y = 0,404057142 X + 0,012061904 X= 0,6387 − 0,012061904

0,404057142 = 1,5509 µg /ml

Konsentrasi Magnesium setelah ditambahkan larutan baku = 1,5509 µ g /ml

(g) Sampel Berat n pengencera Faktor x (ml) Volume x (µg/ml) i Konsentras (µg/g) Magnesium

Kadar =

10,0135g 200 x ml 50 x µg/ml 1,5509 =

= 1548,809 µg/g = 154,8809 mg/100g

Kadar rata-rata sampel setelah di tambah larutan baku (CF) = 154,8809 mg/100g Maka % Perolehan Kembali Magnesium = CF-CA

C*A

x 100% =

mg/100g 13,9717

mg/100g 139,9747)

-(154,8809

x 100%

= 106,69 %

Lampiran 17. Perhitungan Uji Presisi Kadar Mineral Kalsiun, Natrium dan Magnesium dalam Daun Salam

1. Perhitungan Uji Presisi Kadar Kalsium

No % Kadar Perolehan Kembali(Xi) (Xi-X ₎ (Xi-X ₎2

1 98,33 -0,37 0,1369

2 99,30 0,6 0,36

3 98,46 0,24 0,0576

∑ 296,09 0,5545

X 98,70

SD =

( )

1 -n

X -Xi 2

∑

=

1 3 0,5545

− = 0,5265 RSD = x

X SD

_ 100%

= 100%

70 , 98

5265 , 0

x

= 0,5334 %

2. Perhitungan Uji Presisi Kadar Natrium

1 92,48 -4,24 17,9776

2 96,55 -0,17 0,0289

3 101,13 4,41 19,4481

∑ 290,16 37,4546

X 96,72

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

= 1 3 37,4546 −

Lampiran 17. (Lanjutan) = 4,3275

RSD = x X SD

_ 100%

= 100%

72 , 96 3275 , 4 x

= 4,47 %

3. Perhitungan Uji Presisi Kadar Magnesium

No % Kadar Perolehan Kembali(Xi) (Xi-X ₎ (Xi-X ₎2

1 103,59 -0,98 0,9604

2 103,42 -1,15 1,3225

3 106,69 2,12 4,4944

∑ 313,7 6,7773

X 104,57

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

= 1 3 6,7773 − = 1,840830 RSD = SD_{_} x100%

= 100% 57

, 104

840830 ,

1

x

= 1,7603 %

Lampiran 18. Perhitungan Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ) pada Kalsium, Natrium dan Magnesium

1. Perhitungan batas deteksi dan batas kuantitasi mineral kalsium Y = 0,04407X + 0,0037

Slope = 0,04407

No

Konsentrasi (µg /ml)

(X)

Absorbansi

(Y) Yi Y-Yi (Y-Yi)

2 1 0,0000 0,0000 _{0,0037 -0,0037 0,00001369} 2 2,0000 0,0975 _{0,09184 0,00566 0,0000320356} 3 4,0000 0,1764 _{0,17998 -0,00358 0,0000128164} 4 6,0000 0,2716 _{0,26812 0,00348 0,0000121104} 5 8,0000 0,3566 _{0,35626 0,00034 0,0000001156} 6 10,0000 0,4426 _{0,4444 -0,0018 0,00000324}

∑ 30 _0,000074008

SB=

(

)

2

2

− −

∑

n

Yi Y

=

4 8 0,00007400 = 0,0043014

Batas deteksi (LOD) =

slope SB x

3 =

0,04407 0,0043014 3 x

= 0,2928 µg/ml Batas kuantitasi (LOQ) =

slope SB x

10 =

0,04407 0,0043014 10 x

= 0,9760 µg/ml

2. Perhitungan batas deteksi dan batas kuantitasi mineral Natrium Y = 0,04511X + 0,0005

Slope = 0,04511

No

Konsentrasi (µg /ml)

(X)

Absorbansi

(Y) Yi Y-Yi (Y-Yi)

2

1 0,0000 0,0000 _{0,0005 -0,0005 0,00000025}

2 0,2000 0,0099 _{0,009522 0,000378 0,000000142884} 3 0,4000 0,0186 _{0,018544 0,000056 0,000000003136} 4 0,6000 0,0284 _{0,027566 0,00834 0,000000695556} 5 0,8000 0,0369 _{0,36588 0,000312 0,000000097344} 6 1,0000 0,0450 _{0,4561 -0,00061 0,0000003721}

∑ _{0,00000156102}

SB=

(

)

2

2

− −

∑

n

Yi Y

=

4

102 0,00000156 = 0,00062470

Batas deteksi (LOD) =

slope SB x

3 =

0,04511 0,00062470 3 x

Batas kuantitasi (LOQ) =

slope SB x

10 =

0,04511 0,00062470 10 x

= 0,1385 µg/ml

3. Perhitungan batas deteksi dan batas kuantitasi mineral magnesium Y = 0,40405X + 0,0120

Slope = 0,40405

No

Konsentrasi (µg /ml)

(X)

Absorbansi

(Y) Yi Y-Yi (Y-Yi)

2

1 0,000 0,0000 _{0,0120 -0,0120 0,000144}

2 0,500 0,2229 _{0,214025 0,008875 0,000078765625} 3 1,000 0,4284 _{0,41605 0,01235 0,0001525225} 4 1,500 0,6065 _{0,618075 -0,011575 0,000133980625}

5 2,000 0,8317 _{0,8201 0,0116 0,00013456}

6 2,500 1,0133 _{1,022125 -0,008825 0,000077880625}

∑ _{0,000721709375}

SB=

(

)

2

2

− −

∑

n

Yi Y

=

4

9375 0,00072170 = 0,01343232

Batas deteksi (LOD) =

slope SB x

3 =

0,40405 0,01343232 3 x

Batas kuantitasi (LOQ) =

slope SB x

10 =

0,40405 0,01343232 10 x

= 0,3324 µg/ml

Lampiran 19. Pengujian Beda Nilai Rata-Rata Kadar Kalsium dalam Sampel Daun Salam Segar dan Daun Salam Rebus

No Daun Salam Segar Daun Salam Rebus

1 X1 = 763,6688 X2 = 678,5113

2 S1 = 0,6404 S2 = 1,4596

Dilakukan uji F dengan taraf kepercayaan 95% untuk mengetahui apakah variasi kedua populasi sama (σ1 = σ2) atau berbeda (σ1 ≠ σ2).

H0 : σ1 = σ2 H1 : σ1 ≠ σ2

- Nilai kritis F yang diperbolehkan dari tabel (F 0,05/2, (3,3)) adalah = 15,44 - Daerah kritis penolakan: hanya jika F0 ≥ 15,44

F0= S12 S22

F0=

0,64042 1,45962

F0=0,41011216 2,13043216 F0 = 0,1925

- Dari hasil uji ini menunjukkan H0 diterima dan H1 ditolak sehingga

disimpulkan bahwa σ1 = σ2.

- Kemudian dilanjutkan dengan uji beda rata -rata menggunakan distribusi t. - Simpangan bakunya adalah:

Sp =

�

�

(n₁− 1)S12� + �(n2− 1)S22� n₁+ n₂−2

=

�

�(4 − 1) 0,41011216� + �(4 − 1) 2,13043216� 4 + 4 − 2

=

�

7,62163296

6 = 1,12706

- H0 : µ1 = µ 2 H1 : µ1≠ µ 2

- Dengan menggunakan taraf kepercayaan 95% dengan nilai α = 5% t0,05/2 = ± 2,4469 untuk df = 4 + 4– 2 = 6

- Daerah kritis penerimaan: – 2,4469 ≤ t0≤ 2,4469 - Daerah kritis penolakan: t0< – 2,4469 dan t0>2,4469 to =

�X�1- X�2�

����1 n1

� �+ �1� �_n2

=(763,6688−678,5113 ) 1,12706 �1 4⁄ + 1 4⁄ =106,8540

- Karena t0 = 106,8540 > 2,4469 maka hipotesis H0 ditolak. Berarti terdapat perbedaan yang signifikan rata-rata kadar kalsium dalam daun salam segar dan daun salam rebus.

Lampiran 20. Pengujian Beda Nilai Rata-Rata Kadar Natrium dalam Sampel Daun Salam Segar dan Daun Salam Rebus

No Daun Salam Segar Daun Salam Rebus

1 X1 = 30,0925 X2 = 24,5324

2 S1 = 0,107274 S2 = 0,060169

Dilakukan uji F dengan taraf kepercayaan 95% untuk mengetahui apakah variasi kedua populasi sama (σ1 = σ2) atau berbeda (σ1 ≠ σ2).

H0 : σ1 = σ2 H1 : σ1 ≠ σ2

- Nilai kritis F yang diperbolehkan dari tabel (F 0,05/2, (3,3)) adalah = 15,44 - Daerah kritis penolakan: hanya jika F0≥ 15,44

F0=S1 2

S22

F0=

0,1072742 0,0601692

F0= 0,011507711 0,003620308561 F0 = 3,1786

- Dari hasil uji ini menunjukkan H0 diterima dan H1 ditolak sehingga

disimpulkan bahwa σ1 = σ2.

- Kemudian dilanjutkan dengan uji beda rata -rata menggunakan distribusi t. - Simpangan bakunya adalah:

Sp =

�

�

(n₁− 1)S12� + �(n2− 1)S22� n₁+ n₂−2

=

�

�(4 − 1) 0,011507711� + �(4 − 1) 0,003620308561� 4 + 4 − 2

=

�

0,045384058

6 = 0,08697

- H0 : µ1 = µ 2 H1 : µ1≠ µ 2

- Dengan menggunakan taraf kepercayaan 95% dengan nilai α = 5% t0,05/2 = ± 2,4469 untuk df = 4 + 4– 2 = 6

- Daerah kritis penerimaan: – 2,4469 ≤ t0≤ 2,4469 - Daerah kritis penolakan: t0< – 2,4469 dan t0>2,4469 to =

�X�1- X�2�

����1 n1

� �+ �1� �_n2

=(30,0925−24,5324 ) 0,08697 �1 4⁄ + 1 4⁄ = 90,4124

- Karena t0 = 90,4124 > 2,4469 maka hipotesis H0 ditolak. Berarti terdapat perbedaan yang signifikan rata-rata kadar natrium dalam daun salam segar dan daun salam rebus.

Lampiran 21. Pengujian Beda Nilai Rata-Rata Kadar Magnesium dalam Sampel Daun Salam Segar dan Daun Salam Rebus

No Daun Salam Segar Daun Salam Rebus

1 X1 = 139,9747 X2 = 121,4183

2 S1 = 0.018854 S2 = 0,0390477

Dilakukan uji F dengan taraf kepercayaan 95% untuk mengetahui apakah variasi kedua populasi sama (σ1 = σ2) atau berbeda (σ1 ≠ σ2).

H0 : σ1 = σ2 H1 : σ1 ≠ σ2

- Nilai kritis F yang diperbolehkan dari tabel (F 0,05/2, (3,3)) adalah = 15,44 - Daerah kritis penolakan: hanya jika F0≥ 15,44

F0=S1 2

S22

F0=

0.0188542 0,03904772

F0=0,000355473316 0,001524722875 F0 = 0,23319

- Dari hasil uji ini menunjukkan H0 diterima dan H1 ditolak sehingga

disimpulkan bahwa σ1 = σ2.

- Kemudian dilanjutkan dengan uji beda rata -rata menggunakan distribusi t. - Simpangan bakunya adalah:

Sp =

�

�

(n₁− 1)S12� + �(n2− 1)S22� n₁+ n₂−2

=

�

�(4 − 1) 0,000355473316� + �(4 − 1) 0,001524722875� 4 + 4 − 2

=

�

0,005640588573

6 = 0,03066

- H0 : µ1 = µ 2 H1 : µ1≠ µ 2

- Dengan menggunakan taraf kepercayaan 95% dengan nilai α = 5% t0,05/2 = ± 2,4469 untuk df = 4 + 4– 2 = 6

- Daerah kritis penerimaan: – 2,4469 ≤ t0≤ 2,4469 - Daerah kritis penolakan: t0< – 2,4469 dan t0>2,4469 to =

�X�1- X�2�

����1 n1

� �+ �1� �_n2

=(139,9747−121,4183 ) 0,03066 �1 4⁄ + 1 4⁄ = 855,926

- Karena t0 = 855,926 > 2,4469 maka hipotesis H0 ditolak. Berarti terdapat perbedaan yang signifikan rata-rata kadar magnesium dalam daun salam segar dan daun salam rebus.

DAFTAR PUSTAKA

Agoes, H. A. (2010). Tanaman Obat Indonesia. Jakarta: Salemba Medika. Hal. 25-26.

Almatsier, S. (2004). Prinsip Dasar Ilmu Gizi. Jakarta: PT. Gramedia Pustaka Utama. Hal. 228, 230, 235, 246 - 247.

Anhar, S. (2006). Kandungan Magnesium Pada Biomassa Tanaman Acacia

mangium Willd dan Pada Podsolik Merah Kuning di HPHTI PT Musi

Hutan Persada, Sumatera Selatan. Skripsi. Fakultas Kehutanan Institut Pertanian Bogor. Hal. 2.

Anonim. (2008). Taksonomi Koleksi Tanaman Obat Kebun Tanaman Obat

Citeureup. Jakarta: Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik

Indonesia. Hal. 39.

Ditjen POM RI. (1979). Farmakope Indonesia. Edisi Ketiga. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Hal. 650, 737.

Ditjen POM RI. (1995). Farmakope Indonesia. Edisi IV. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Hal. 1135,1172,1183.

Ermer, J. dan McB. Miller, J. H. (2005). Method Validation in Pharmaceutical

Analysis. Weinheim: Wiley-VchVerlag GmbH & Co. KGaA. Hal. 171.

Harmita. (2004). Petunjuk Pelaksanaan Validasi Metode dan Cara Perhitungannya. Review Artikel. Majalah Ilmu Kefarmasian. Hal. 117-119, 121-122, 127-128, 130.

Harris, D. C. (2010). Quantitative Chemical Analysis. Eighth Edition. New York: W. H. Freeman and Company. Hal. 455.

Isaac, R. A. (1990). Metals in Plants. Dalam: Helrich, K. (1990). Official Methods

Of The Association of Official Analytical Chemist. Edisi Kelima belas.

Virginia: Association of Official Analytical Chemist International. Hal. 42 Khopkar, S. M. (1990). Basic Concepts of Analytical Chemistry. Penerjemah:

Saptoraharjo, A., dan Nurhadi, A. (2008). Konsep Dasar Kimia Analitik. Jakarta: UI-Press. Hal. 275, 283.

Kristianingrum, S. (2012). Kajian Berbagai Proses Destruksi Sampel dan Efeknya. Prosiding Seminar Nasional Penelitian, Pendidikan dan

penerapan MIPA. Fakultas MIPA, Universitas Negeri Yogyakarta.

Kartasapoetra, G dan Marsetyo, H. (2008). Ilmu Gizi: Korelasi Gizi, Kesehatan

Lajuck, P. (2012). Ekstrak Daun Salam (Eugenia Poliantha) Lebih Efektif Menurunkan Kadar Kolesterol Total dan LDL Dibandingkan Statin Pada Penderita Dislipidemia. Tesis. Program Pascasarjana Universitas Udayana Denpasar. Hal. 34.

Nuratmi, B., Winarno, M. W dan Sundari, S. (1999). Khasiat Daun Salam (Eugenia polyantha Wight) Sebagai Antidiare Pada Tikus Putih. Media

Litbangkes Edisi Khusus “Obat Asli Indonesia”. Vol. 7 (3&4) : 14-17.

Rohman, A. (2007). Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta: Pustaka Pelajar. Hal. 298, 305-306, 311-312, 319-321.

Rosmarkam, A dan Yuwono, N. W. (2002). Ilmu Kesuburan Tanah. Yogyakarta: Kanisius. Hal. 31dan 60.

Salamah, E., Purwaningsih, S dan Kurnia, R. (2012). Kandungan Mineral Remis (Corbicula javanica) Akibat Proses Pengolahan. Jurnal Akuatika. Vol 3 (1): 74-83.

Sinaga, R.M. (2009). Pengetahuan Pengobat Tradisional Tentang Penyakit dan Cara Pembuatan Obat Tradisional. Tesis. Sekolah Pascasarjana Universitas Sumatera Utara. Hal. 16.

Svehla, G. (1979). Vogel’s Textbook of Macro and Semimicro Qualitative

Inorganic Analysis. Bagian I. Penerjemah: L. Setiono dan Hadyana

Pudjaatmaka. (1990). Analisis Anorganik Kualitatif Makro dan Semimikro. Jakarta: Penerbit Kalman Media Pustaka. Hal. 301,311.

Sudjana. (2005). Metode Statistika. Cetakan II. Edisi VI. Bandung: Tarsito. Hal. 168, 227, 249.

Sundari, D., Almasyhuri., dan Lamid, A. (2015). Pengaruh Proses Pemasakan Terhadap Komposisi Zat Gizi Bahan Pangan Sumber Protein. Media

Litbangkes. Vol 25 (4): 235-242.

Surbakti, S. (2010). Asupan Bahan Makanan dan Gizi Bagi Atlet Renang. Jurnal

Ilmu Keolahragaan. Fakultas Ilmu Keolahragaan UNIMED Medan Vol

8(2) : 108-122.

United States Department of Agriculture America. (2014). Nutrient Database for

Standard Reference Release 28 Basic Report 02004, Spices, bay leaf.

Diakses: 04 Juni

Winarno, F.G. (1992). Kimia Pangan dan Gizi. Jakarta: PT Gramedia Pustaka Utama. Hal. 154, 156.

BAB III

METODE PENELITIAN

Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah metode penelitian deskriptif, yang bertujuan menggambarkan suatu keadaan secara sistematis yaitu untuk mengetahui perbedaan kadar mineral kalsium, natrium dan magnesium antara daun salam segar dan daun salam rebus.

3.1 Tempat dan Waktu Penelitian

Penelitian dilakukan di Laboratorium Penelitian Fakultas Farmasi dan Laboratorium Kimia Farmasi Kualitatif Universitas Sumatera Utara pada bulan Maret – Mei 2016.

3.2 Alat-Alat

Alat yang digunakan pada penelitian ini adalah alat-alat gelas (Pyrex dan Oberol), hotplate (BOECO Germany), kertas saring Whatman No. 42, Krus porselen, neraca analitik (AND GF-200), Spektrofotometer Serapan Atom dengan nyala udara-asetilen dengan lampu katoda Ca, Na dan Mgdan tanur (stuart). 3.3 Bahan-Bahan

3.3.1 Sampel

Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah daun salam yang berasal dari pekarangan rumah yang terletak di Jalan Bunga Teratai, Pasar II, Kelurahan PB Selayang 2, Kecamatan Medan Selayang, Kota Medan, Sumatera Utara.

3.3.2 Pereaksi

Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini berkualitas pro analisis keluaran E. Merck yaitu asam nitrat 65% v/v, asam pikrat 1% b/v, asam sulfat 98% v/v, Natrium Hidroksida, larutan baku kalsium 1000 μg/mL, larutan baku kalsium natrium1000 μg/mL dan larutan baku magnesium 1000 μg/mL kecuali akua demineralisata (Laboratorium Penelitian Fakultas Farmasi USU).

3.4 Identifikasi Sampel

Identifikasi sampel daun salam dilakukan di Herbarium Medanense, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sumatera Utara. 3.5 Pembuatan Pereaksi

3.5.1 Larutan HNO3 (1:1)

Asam Nitrat 65% v/v sebanyak 100 mL diencerkan dengan 100 mL aqua demineralisata (Ditjen POM, 1979).

3.5.2 Larutan H2SO4 1 N

Sebanyak 2,7 mL larutan asam sulfat 98% diencerkan dengan aquades hingga 100 mL (Ditjen POM RI, 1995).

3.5.3 Larutan asam pikrat 1% b/v

Sebanyak 1 gram asam pikrat dilarutkan dalam akuabides hingga 100 mL (Ditjen POM RI, 1979).

3.5.4 Larutan Kuning Titan 0,1% b/v

Dilarutkan 0,1 g titan yellow dalam 100 mL akua demineralisata (Ditjen POM RI,1979).

3.5.5 Larutan NaOH 2 N

Sebanyak 4 gram natrium hidroksida dilarutkan dalam akua demineralisata hingga 50 mL (Ditjen POM RI, 1979).

3.6 Prosedur Penelitian 3.6.1 Pengambilan Sampel

Metode pengambilan sampel dilakukan dengan cara sampling purposif yang dikenal juga sebagai sampling pertimbangan dimana sampel ditentukan atas pertimbangan bahwa populasi sampel adalah homogen dan sampel yang diambil mempunyai karakteristik yang sama dengan sampel yang sedang diteliti (Sudjana, 2005).

3.6.2 Penyiapan Sampel

Daun salam sebanyak 1000 gram, dibersihkan dari pengotornya kemudian di siram dengan akua demineralisata dan ditiriskan sampai air cuciannya kering, kemudian masing-masing dibagi menjadi 500 gram untuk yang segar dan direbus, sampel segar kemudian dihaluskan dengan blender. Sedangkan untuk sampel direbus, dilakukan perebusan selama 7 menit pada suhu 80 - 100°C, kemudian ditiriskan air rebusannya, selanjutnya dihaluskan dengan blender (tidak ditentukan kadar airnya).

3.6.3 Proses Destruksi

Sampel yang telah dihaluskan masing-masing ditimbang sebanyak 10 gram dimasukkan ke dalam krus porselen, diarangkan diatas hotplate pada suhu 100°C sampai sampel menjadi arang dan kering (± selama 6 jam), diabukan dalam tanur dengan temperatur awal 100oC dan perlahan-lahan temperatur dinaikkan hingga suhu 500oC dengan interval 25oC setiap 5 menit, dilakukan selama 48 jam

hingga sampel menjadi abu yang berwarna putih, kemudian dibiarkan hingga dingin didalam desikator. Abu yang diperoleh ditambahkan 5 ml HNO3 (1:1), diuapkan pada hotplate sampai kering, dimasukkan kembali dalam tanur dengan temperatur awal 100oC dan perlahan-lahan temperatur dinaikkan hingga suhu 500oC dengan interval 25oC setiap 5 menit, dilakukan selama 1 jam dan dibiarkan hingga dingin didalam desikator (suhu ± 27ºC) (Isaac, 1990).

3.6.4 Pembuatan Larutan Sampel

Sampel yang telah didestruksi dilarutkan dalam 5 mL HNO3 (1:1), lalu dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 mL dan krus porselen dibilas dengan aqua demineralisata sebanyak 3 kali, kemudian cukupkan hingga tanda. Kemudian saring dengan menggunakan kertas Whatman no.42 dan 5 mL filtrat pertama dibuang untuk menjenuhkan kertas saring, kemudian filtrat selanjutnya ditampung dalam botol. Filtrat ini digunakan sebagai larutan sampel untuk analisis kuantitatif. Perlakuan yang sama diulang sebanyak enam kali untuk masing-masing sampel.

3.6.5 Analisis Kualitatif 3.6.5.1 Kalsium

Uji kristal kalsium dengan asam sulfat 1N

Larutan sampel hasil destruksi sebanyak 1 - 2 tetes diteteskan pada object

glass kemudian ditetesi dengan larutan asam sulfat 1N terbentuk endapan putih

lalu diamati di bawah mikroskop. Jika terdapat kalsium akan terlihat kristal berbentuk jarum (Svehla, 1979).

3.6.5.2 Natrium

Uji kristal natrium dengan asam pikrat 1% b/v

Larutan zat diteteskan 1 - 2 tetes pada object glass kemudian ditetesi dengan larutan asam pikrat 1% b/v, dibiarkan ± 5 menit lalu diamati di bawah mikroskop. Jika terdapat natrium, akan terlihat kristal berbentuk jarum halus tersusun di pinggir (Svehla, 1979).

3.6.5.3 Magnesium

Kedalam tabung reaksi dimasukkan 2 mL larutan sampel, ditambah 5-6 tetes NaOH 2 N dan 3 tetes pereaksi Titan yellow( 0.1% b/v). Dihasilkan endapan atau larutan warna merah (Svehla, 1979).

3.6.6 Pemeriksaan Kuantitatif

3.6.6.1 Pembuatan Kurva Kalibrasi Kalsium

Larutan baku kalsium (konsentrasi 1000 µg/mL) dipipet sebanyak 2,5 mL dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 mL dan dicukupkan hingga garis tanda dengan menggunakan aqua demineralisata (larutan induk baku II konsentrasi 50 µg/mL). Larutan untuk kurva kalibrasi kalsium dibuat dengan memipet larutan baku induk II sebanyak 1; 2; 3; 4; dan 5 mL dilarutkan dalam labu tentukur 25 mL dan dicukupkan sampai garis tanda menggunakan aqua demineralisata hingga diperoleh konsentrasi berturut-turut (2; 4; 6;8; dan 10 µ g/mL) dan diukur pada panjang gelombang 422,7 nm dengan nyala udara-asetilen.

3.6.6.2 Pembuatan kurva kalibrasi natrium

Larutan baku natrium (1000 μg/mL) sebanyak 0,5 mL dimasukkan kedalam labu tentukur 50 mL lalu diencerkan dengan akua demineralisata hingga garis tanda. Dari larutan tersebut (10 μg/mL) dipipet masing-masing 0,5 mL; 1,0

mL; 1,5 mL; 2,0 mL; dan 2,5 mL dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 mL dan diencerkan dengan akua demineralisata hingga garis tanda sehingga diperoleh larutan dengan konsentrasi 0,2 μg/mL; 0,4 μg/mL; 0,6 μg/mL; 0,8 μg/mL; dan 1 μg/mL, lalu dilakukan pengukuran pada panjang gelombang 589,0 nm dengan tipe nyala udara-asetilen.

3.6.6.3 Pembuatan Kurva Kalibrasi Magnesium

Dipipet larutan baku magnesium(1000 μg/mL) sebagai LIB I (larutan induk baku I) sebanyak 2,5 mL, dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 mL dan dicukupkan dengan akua demineralisata hingga garis tanda(konsentrasi 50 μg/mL) digunakan sebagai LIB II (larutan induk baku II). Dari larutan LIB II tersebut (50 μg/mL) dipipet masing-masing0,25 mL; 0,5 mL; 0,75 mL; 1,0 mL dan 1,25 mL, kemudian dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 mL dan dicukupkan dengan akua demineralisata hingga garis tanda sehingga diperoleh konsentrasi berturut-turut 0,5 μg/mL; 1,,0 μg/mL; 1,5 μg/mL; 2,0 μg/mL dan 2,5 μg/mL. Kemudian diukur kurva kalibrasi magnesiumpada panjang gelombang 285,2 nm dengan tipe nyala udara-asetilen.

3.6.6.4 Penetapan kadar Kalsium

Larutan sampel hasil destruksi masing-masing dipipet sebanyak 0,25 mL dimasukkan ke dalam labu tentukur 100 mL dan dicukupkan dengan aqua demineralisata hingga garis tanda (faktor pengenceran 400 kali). Lalu diukur absorbansinya pada panjang gelombang 422,7 nm. Nilai absorbansi yang diperoleh berada dalam rentang kurva kalibrasi larutan baku kalsium. Konsentrasi kalsium dalam sampel ditentukan berdasarkan persamaan garis regresi dari kurva kalibrasi.

3.6.6.5 Penetapan kadar natrium

Larutan sampel hasil destruksi dipipet sebanyak 0,5 mL dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 mL dan diencerkan dengan akua demineralisata hingga garis tanda (faktor pengenceran 100 kali). Larutan diukur absorbansinya dengan spektrofotometer serapan atom pada panjang gelombang 589,0 nm dengan tipe nyala udara-asetilen. Nilai absorbansi yang diperoleh harus berada dalam rentang kurva kalibrasi larutan baku natrium. Konsentrasi natrium dalam sampel dihitung berdasarkan persamaan garis regresi dari kurva kalibrasi.

3.6.6.6 Penetapan Kadar Mineral Magnesium

Dipipet masing-masing larutan sampel sebanyak 0,5 mL, dimasukkan ke dalam labu tentukur 100 mL (faktor pengenceran = 200 kali) dan dicukupkan dengan akua demineralisata hingga garis tanda. Lalu diukur absorbansinya dengan menggunakan spektrofotometer serapan atom yang telah dikondisikan dan diatur metodenya, dimana pengujian kadar magnesium dilakukan pada panjang gelombang 285,2 nm. Nilai absorbansi yang diperoleh harus berada dalam rentang kurva kalibrasi larutan baku magnesium. Konsentrasi magnesium dalam sampel ditentukan berdasarkan persamaan garis regresi dari kurva kalibrasi.

3.6.7 Perhitungan Kadar Kalsium, Natrium, dan Magnesium dalam Sampel Menurut Rohman (2007), Kadar kalsium, natrium dan magnesium dalam sampel dapat dihitung dengan cara sebagai berikut:

Kadar (µg/g) =C × V × Fp W

Keterangan:

C = Konsentrasi logam dalam larutan sampel (μg/mL) V = Volume larutan sampel (mL)

Fp = Faktor pengenceran W = Berat sampel (g)

3.6.8 Analisis Data Secara Statistik

Menurut (Sudjana, 2005), kadar yang diperoleh dari hasil pengukuran masing-masing larutan sampel dianalisis secara statistik dengan cara mengitung standar deviasi menggunakan rumus sebagai berikut:

��=�∑(Xi−X�)

2

n−1

Keterangan:

Xi = Kadar sampel

X � = Kadar rata-rata sampel n = Jumlah pengulangan

Kadar yang diperoleh dari hasil pengukuran masing-masing ke enam larutan sampel, diuji secara statistik dengan uji t.

Untuk mengetahui data ditolak atau diterima dilakukan dengan uji t yang dapat dihitung dengan rumus:

t_hitung = |Xi − X�| SD

√n

Hasil pengujian atau nilai thitung yang diperoleh ditinjau terhadap tabel distribusi t, apabila thitung > ttabel maka data tersebut ditolak.

Untuk menentukan kadar suatu zat di dalam sampel dengan interval kepercayaan 95%, α = 0.01, dk = n-1, dapat digunakan rumus:

μ=��±�₍1 2�,��)

SD⁄√n

μ = kadar logam

X �= kadar rata-rata sampel

t = harga t tabel sesuai dengan dk = n-1 α = tingkat kepercayaan

SD = standar deviasi n = jumlah pengulangan 3.6.9 Validasi Metode

3.6.9.1 Uji Perolehan Kembali (Recovery)

Uji perolehan kembali atau recovery dilakukan dengan metode adisi (penambahan baku). Dalam metode adisi dengan menambahkan sejumlah larutan standar dengan konsentrasi tertentu pada sampel yang diperiksa, lalu dianalisis. Persen perolehan kembali ditentukan dengan menentukan berapa persen analit yang ditambahkan dapat ditemukan. Larutan baku yang ditambahkan yaitu, 8 mL larutan baku kalsium (konsentrasi 1000 μg/mL), 0,3 mL larutan baku natrium (konsentrasi 1000 μg/mL), dan 1,4 mL larutan baku magnesium (konsentrasi 1000 μg/mL).

Sampel yang telah dihaluskan ditimbang secara seksama sebanyak 10 g di dalam krus porselen, lalu ditambahkan 8 mL larutan baku kalsium (konsentrasi 1000 μg/mL), 0,3 mL larutan baku natrium (konsentrasi 1000 μg/mL), dan 1,.4 mL larutan baku magnesium (1000 μg/mL) kemudian dilanjutkan dengan prosedur destruksi kering seperti yang telah dilakukan sebelumnya. Menurut Harmita (2004), persen perolehan kembali dapat dihitung dengan rumus di bawah ini:

Persen Perolehan Kembali = ��−��

�_�∗

�

100%

Keterangan:

CA = Kadar logam dalam sampel sebelum penambahan baku CF = Kadar logam dalam sampel setelah penambahan baku C∗A = Kadar larutan baku yang ditambahkan

3.6.9.2 Uji Keseksamaan (Presisi)

Uji keseksamaan atau presisi diukur sebagai simpangan baku relatif atau koefisien variasi. Keseksamaan atau presisi merupakan ukuran yang menunjukkan derajat kesesuaian antara hasil uji individual ketika suatu metode dilakukan secara berulang untuk sampel yang homogen. Nilai simpangan baku relatif yang memenuhi persyaratan menunjukkan adanya keseksamaan metode yang dilakukan (Harmita, 2004).

Menurut Harmita (2004), rumus untuk menghitung simpangan baku relatif adalah:

RSD = SD

X� × 100%

Keterangan :

�̅ : Kadar rata-rata sampel SD : Standard Deviation

RSD : Relativ Standard Deviation

3.6.9.3 Penentuan Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi

Batas deteksi merupakan jumLah terkecil analit dalam sampel yang dapat dideteksi yang masih memberikan respon signifikan. Sebaliknya, batas kuantitasi

merupakan kuantitas terkecil analit dalam sampel yang masih dapat memenuhi kriteria cermat dan seksama.

Menurut Harmita (2004), batas deteksi dan batas kuantitasi ini dapat dihitung dengan rumus sebagai berikut:

Simpangan Baku: �∑( Y−Yi )2

n−2

Batas Deteksi (LOD): 3 ×SB

Slope

Batas Kuantitatif (LOQ): 10 ×SB

Slope

2.5.3.1 Pengujian Beda Nilai Rata-Rata

Menurut Sudjana (2005), sampel yang dibandingkan adalah independen dan jumlah pengamatan masing-masing lebih kecil dari 30 dan varians (σ) tidak diketahui sehingga dilakukan uji F untuk mengetahui apakah varians kedua populasi sama (σ1 = σ 2) atau berbeda (σ1 ≠ σ 2) dengan menggunakan rumus:

Fo = �1

2

�22 Keterangan:

Fo = Beda nilai yang dihitung

S1 = Standar deviasi sampel daun salam segar (mg/100g)

S2 = Standar deviasi sampel daun salam yang direbus (mg/100g)

Apabila dari hasilnya diperoleh Fo tidak melewati nilai kritis F maka dilanjutkan uji dengan distribusi t dengan rumus:

to = �X�1- X�2�

���\_�1₁+1

�2

Sp =

�

(�1−1)�1

2_{+(�2−1)�2}2

Keterangan :

X1 = kadar rata-rata sampel daun salam segar (mg/100g) X2 = kadar rata-rata sampel daun salam rebus (mg/100g) Sp = simpangan baku (mg/100g)

n1 = jumlah pengulangan sampel daun salam segar n2 = jumlah pengulangan sampel daun salam rebus S1 = Standar deviasi sampel daun salam segar (mg/100g) S2 = Standar deviasi sampel daun salam rebus (mg/100g)

Dan jika Fo melewati nilai kritis F maka dilanjutkan uji dengan distribusi t dengan rumus:

to = �X�1- X�2�

���\�_�12₁+�22

�2

Keterangan :

X1 = kadar rata-rata sampel daun salam segar (mg/100g) X2 = kadar rata-rata sampel daun salam rebus (mg/100g) Sp = simpangan baku (mg/100g)

n1 = jumlah pengulangan sampel daun salam segar n2 = jumlah pengulangan sampel daun salam rebus S1 = Standar deviasi sampel daun salam segar (mg/100g) S2 = Standar deviasi sampel daun salam rebus (mg/100g)

Kedua sampel dinyatakan berbeda apabila to yang diperoleh melewati nilai kritis t, dan sebaliknya.

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Analisis Kualitatif

Hasil identifikasi secara kualitatif digunakan untuk mengetahui ada atau tidaknya mineral kalsium, natrium dan magnesium dalam sampel. Data dapat dilihat pada Tabel 4.1 dan Lampiran 4, halaman 45.

Tabel 4.1 Hasil analisis kualitatif pada sampel daun salam yang telah di destruksi

No Mineral Pereaksi Hasil Reaksi Hasil

1 Kalsium Asam Sulfat 1N Kristal jarum +

2 Natrium Asam Pikrat 1% b/v Kristal jarum

halus + 3 Magnesium Titan Yellow dan NaOH

Endapan merah teran

g

+ Keterangan : + : Mengandung mineral

Berdasarkan Tabel 4.1, larutan sampel yang diperiksa mengandung mineral kalsium, natrium dan magnesium. Sampel positif mengandung mineral kalsium dengan penambahan asam sulfat 1 N akan membentuk Kristal jarum, juga dengan penambahan asam pikrat 1% b/v menghasilkan kristal jarum halus dari natrium , dengan penambahan titan yellow 0,1% b/v dalam keadaan basa menghasilkan endapan berwarna merah terang positif untuk magnesium.

4.2 Analisis Kuantitatif

4.2.1 Kurva Kalibrasi Kalsium, Natrium dan Magnesium

Kurva kalibrasi kalsium, natrium dan magnesium diperoleh dengan cara mengukur serapan dari larutan baku ketiganya pada panjang gelombang masing-masing. Hasil pengukuran kurva kalibrasi untuk ketiganya di peroleh persamaan

garis regresi yaitu Y = 0,0440785X + 0,0037175 untuk kalsium, Y = 0,0451143X + 0,0005728 untuk natrium dan Y = 0,4040571X + 0,0120619 untuk magnesium.

Kurva kalibrasi larutan kalsium, natrium dan magnesium dapat dilihat pada Gambar 4.1-4.3.

Gg

Gambar 4.1 Kurva Kalibrasi Larutan Standar Kalsium

Gambar 4.2. Kurva Kalibrasi Larutan Standar Natrium

Gambar 4.2 Kurva Kalibrasi Larutan Standar Natrium Y = 0,0440785X + 0,0037175

Y = 0,0451143X + 0,0005728

Konsentrasi(µg/ml)

Gambar 4.3 Kurva Kalibrasi Larutan Standar Magnesium

Berdasarkan kurva di atas diperoleh hubungan yang linear antara konsentrasi dengan serapan, dengan koefisien korelasi (r) kalsium 0,9997, natrium 0,9995 dan magnesium 0,9995. Nilai r ≥ 0,97 menunjukkan adanya korelasi linier yang menyatakan adanya hubungan antara X (konsentrasi) dan Y (Absorbansi) (Ermer dan Miller, 2005). Data hasil pengukuran serapan larutan baku kalsium, natrium dan magnesium serta perhitungan persamaan garis regresinya dapat dilihat pada Lampiran 7– Lampiran 9, halaman 49– 54.

4.2.2 Kadar Kalsium, Natrium dan Magnesium dalam sampel

Pada pengukuran sampel yang dilakukan secara Spektrofotometri Serapan Atom, dilakukan pengenceran sebesar 400 kali untuk kalsium, 100 kali untuk natrium dan 200 kali untuk magnesium. Hal ini dilakukan karena sampel memiliki kadar mineral yang tinggi agar diperoleh nilai serapan yang berada dalam rentang kalibrasi. Konsentrasi kalsium, natrium dan magnesium dalam sampel ditentukan berdasarkan persamaan garis regresi kurva kalibrasi larutan baku kalsium, natrium

Y = 0,4040571X + 0,0120619

dan magnesium. Data dan contoh perhitungan dapat dilihat pada lampiran 10 – Lampiran 11, halaman 55 – 61.

Analisis dilanjutkan dengan perhitungan statistik (perhitungan dapat dilihat pada lampiran 12 – lampiran14, halaman 62-76. Hasil analisis kuantitatif mineral kalsium, natrium dan magnesium dalam sampel dapat dilihat pada Tabel 4.2 berikut ini :

Tabel 4.2 Kadar Mineral Kalsium, Natrium dan Magnesium dalam Sampel No Sampel Kadar Kalsium

(mg/100g)

Kadar Natrium (mg / 100g)

Kadar Magnesium (mg/100 g) 1 Daun Salam

Segar

763,6688 ± 1,019138

30,0925 ±0,170694 139, 9747 ± 0,03 2 Daun Salam

Rebus

678,5113 ± 2,3226173

24,5324 ± 0,095739

121,4183 ±0,062133 Persentase

penurunan (%)

11,15 18,48 13,25

Berdasarkan Tabel 4.2, kemudian dihitung berapa besar persentase penurunan kadar dari masing-masing mineral pada sampel yaitu penurunan kadar kalsium, natrium dan magnesium pada daun salam (perhitungan dapat dilihat pada Lampiran 15, halaman 77).

Berdasarkan hasil penetapan kadar mineral kalsium, natrium dan magnesium yang tercantum pada Tabel 4.2, daun salam segar mengandung mineral kalsium, natrium dan magnesium lebih tinggi dibandingkan dengan daun salam rebus. Hal ini kemungkinan karena kalsium, natrium dan magnesium pada daun salam rebus banyak terlarut selama proses perebusan karena sebagian besar logam kalsium, natrium dan magnesium pada daun salam segar terikat dalam bentuk kompleks yang larut dalam air. Jadi, saat direbus kadar mineral kalsium, natrium dan magnesium yang terdapat didalamnya berkurang. Menurut (Salamah,

dkk., 2012), kelarutan mineral dapat meningkat atau menurun tergantung pada prosesnya, dimana proses pemasakan dapat mengakibatkan terjadinya pemutusan interaksi mineral dengan komponen pangan lain seperti protein, kaarbohidrat, lemak, serat vitamin dan komponen kimia lainnya

Berbeda dari literatur yang menyatakan bahwa kadar mineral kalsium 834 mg/100g, Natrium 23 mg/100 g serta magnesium 120 mg/100 g (United States

Department of Agriculture America , 2014), penelitian ini justru menghasilkan

kadar kalsium lebih rendah serta kadar natrium dan magnesium lebih tinggi dibandingkan dengan kadar kalsium, natrium dan magnesium pada literatur. Hal ini dapat dipengaruhi oleh beberapa faktor seperti tempat tumbuh tanaman, kesuburan tanaman, perlakuan terhadap tanaman dan iklim (Rosmarkam dan Yuwono, 2002).

Pada penelitian ini, kadar kalsium yang diperoleh belum mewakili kadar kalsium yang sebenarnya didalam sampel. Hal ini dikarenakan dalam penelitian tidak dilakukan penambahan senyawa penyangga seperti Sr dan La. Penambahan senyawa penyangga tersebut perlu dilakukan sebab di dalam sampel mengandung gugusan pengganggu seperti fosfat, dimana jika fosfat bertemu dengan kalsium akan membentuk kalsium fosfat (garam fosfat). Garam-garam fosfat merupakan senyawa refaktorik (sukar diuraikan di dalam nyala api) yang akan menyebabkan terjadinya disosiasi yang tidak sempurna atau akan mengurangi jumlah atom netral yang ada dalam nyala. Dengan demikian, dengan penambahan senyawa penyangga ini maka ion fosfat akan terikat dan tidak akan membentuk kalsium fosfat yang bersifat refaktorik (Rohman, 2007).

Dari hasil penetapan kadar mineral kalsium, natrium dan magnesiumyang dilakukan tidak mewakili jumlah kandungan mineral yang seharusnya terdapat pada daun salam rebus. Hal ini disebabkan penimbangan sampel hasil perebusan tidak dilakukan dalam kondisi sampel telah kering atau tidak mengandung air rebusan lagi sehingga kemungkinan kadar mineral yang diperoleh merupakan bagian kadar sisa campuran hasil rebusan. Penimbangan seharusnya dilakukan sebelum perebusan sehingga diperolehlah kadar mineral yang seharusnya. Hasil kadar recovery yang diperoleh juga tidak mewakili kadar yang seharusnya dikarenakan metode recovery yang dilakukan kurang sempurna. Hal ini disebabkan penimbangan untuk uji recovery dilakukan setelah penetapan kadar sampel, seharusnya penimbangan untuk uji recovery dilakukan bersamaan ketika penimbangan untuk penetapan kadar pada sampel.

Perebusan dilakukan selama 7 menit terhitung setelah air rebusan mendidih. Proses perebusan dihentikan setelah air rebusan yang tersisa tinggal setengah dari jumlah semula. Menurut Sinaga (2009), bila tidak ada ketentuan lain maka perebusan dianggap selesai bila air rebusan tersisa setengah dari jumlah air semula. Perebusan dilakukan menggunakan panci alumunium yang kemungkinan dapat menyebabkan kontaminasi logam dari panci alumunium, seharusnya lebih baik menggunakan panci yang terbuat dari periuk tanah atau periuk keramik. 4.2.3 Uji Perolehan Kembali (recovery)

Hasil uji perolehan kembali (recovery) kadar kalsium, natrium dan magnesium setelah penambahan masing-masing larutan baku dapat dilihat pada Lampiran 16 halaman 78-85.

Persen perolehan kembali (recovery) kadar mineral kalsium, natrium dan magnesium dalam sampel dapat dilihat pada Tabel 4.3 berikut ini

Tabel 4.3 Persen Uji Perolehan Kembali (recovery) Kadar Mineral Kalsium, Natrium dan Magnesium dalam sampel

No Mineral

Persen perolehan Kembali (%)

Syarat Rentang persen recovery

(%)

1 Kalsium 98,70

80-120

2 Natrium 96,72

3 Magnesium 104,57

Berdasarkan Tabel 4.3 diatas menunjukkan adanya kecermatan kerja yang memuaskan pada saat pemeriksaan kadar kalsium, natrium dan magnesium dalam sampel. Hasil yang diperoleh dari uji perolehan kembali memberikan ketepatan pada pemeriksaan kadar mineral dalam sampel. Suatu metode dikatakan teliti jika nilai perolehan kembalinya antara 80-120% (Ermer dan McB. Miller, 2005). 4.2.4 Simpangan Baku Relatif

Nilai simpangan baku dan simpangan baku relatif kalsium, natrium dan magnesium dalam sampel dapat dilihat pada Tabel 4.4, sedangkan perhitungannya dapat dilihat pada Lampiran17, halaman 86-87.

Tabel 4.4 Nilai simpangan Baku dan Simpangan Baku Relatif Kalsium, Natrium dan Magnesium dalam Sampel

No Mineral Simpangan Baku Simpangan Baku Relatif

1 Kalsium 0,5265 0,5334

2 Natrium 4,3275 4,47

3 Magnesium 1,8408 1,7603

Berdasarkan Tabel 4.4 diatas dapat dilihat nilai simpangan baku (SD) dan simpangan baku relatif untuk masing-masing mineral. Nilai simpangan baku relatif (RSD) untuk analit dengan kadar part per million (ppm) adalah tidak lebih

3.6.6.6 Penetapan Kadar Magnesium ... 24

3.6.7 Perhitungan Kadar Kalsium, Natrium dan Magnesium dalam Sampel ... 24

3.6.8 Analisis Data Secara Statistik ... 25

3.6.9 Validasi Metode ... 26

3.6.9.1 Uji Perolehan Kembali (recovery) ... 26

3.6.9.2 Uji Keseksamaan (presisi) ... 27

3.6.9.3 Penentuan Batas Deteksi dan Kuantitasi ... 27

3.6.9.4 Pengujian Beda Nilai Rata-Rata ... 28

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 30

4.1 Analisis Kualitatif ... 30

4.2 Analisis Kuantitatif ... 30

4.2.1 Kurva Kalibrasi Kalsium, Natrium dan Magnesium... 30

4.2.2 Kadar Kalsium, Natrium dan Magnesium dalam Sampel ... 32

4.2.3 Uji Perolehan Kembali (Recovery) ... 35

4.2.4 Simpangan Baku Relatif... 36

4.2.5 Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi ... 37

4.2.6 Pengujian Beda Nilai Rata-Rata Kadar Kalsium, Natrium, dan Magnesium pada Sampel Daun Salam Segar dan Daun Salam Rebus... 37

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 39

5.1 Kesimpulan ... 39

5.2 Saran ... 39

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

4.1 Hasil Analisis Kualitatif Kalsium, Natrium dan Magnesium pada Daun Salam ... 30 4.2 Kadar Mineral Kalsium, Natrium dan Magnesium dalam

Sampel... . 33 4.3 Persen Uji Perolehan Kembali (Recovery) Kadar Mineral

Kalsium, Natrium dan Magnesium dalam Sampel ... . 36 4.4 Nilai Simpangan Baku dan Simpangan Baku Relatif Kalsium,

Natrium dan Magnesium dalam Sampel ... 36 4.5 Batas deteksi dan Batas Kuantitasi Kalsium, Natrium dan

Magnesium .... ... . 37 4.6 Hasil Uji Beda Nilai Rata-Rata Kadar Kalsium, Natrium dan

Magnesium pada Sampel Daun Salam Segar dan Daun Salam Rebus ... . 38

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

2.1 Gambar Sistem Peralatan Spektrofotometer Serapan Atom ... 12

4.1 Gambar Kurva Kalibrasi Larutan Standar Kalsium ... 31

4.2 Gambar Kurva Kalibrasi Larutan Standar Natrium ... 31

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1 Hasil Identifikasi Daun Salam... 42

2 Gambar Sampel yang di gunakan... 43

3 Gambar alat yang digunakan ... 44

4 Hasil analisis kualitatif ... 45

5 Bagan Alir Proses Destruksi Kering ... 46

6 Bagan Alir Pembuatan Larutan Sampel ... 48

7 Data Hasil Pengukuran Absorbansi Larutan Standar Kalsium dan Perhitungan Persamaan Garis Regresi Kalsium ... 49

8 Data Hasil Pengukuran Absorbansi Larutan Standar Natrium dan Perhitungan Persamaan Garis Regresi Natrium ... 51

9 Data Hasil Pengukuran Absorbansi Larutan Standar Magnesium dan Perhitungan Persamaan Garis Regresi Magnesium ... 53

10 Hasil Analisis Kadar Kalsium, Natrium dan Magnesium dalam Sampel ... 55

11 Contoh Perhitungan Kadar Kalsium, Natrium dan Magnesium dalam Sampel ... 58

12 Perhitungan Statistik Kadar Kalsium pada Sampel ... 62

13 Perhitungan Statistik Kadar Natrium pada Sampel ... 67

14 Perhitungan Statistik Kadar Magnesium pada Sampel ... 72

15 Persentase Penurunan Kadar Kalsium, Natrium dan Magnesium dalam Daun Salam Segar dan Daun Salam Rebus ... 77

16 Perhitungan Uji Akurasi Kadar Kalsium, Natrium dan Magnesium dalam Sampel Daun Salam... 78

17 Perhitungan Uji Presisi Kadar Mineral Kalsium, Natrium dan Magnesium dalam Daun Salam... 86 18 Perhitungan Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi

(LOQ) Kalsium, Natrium dan Magnesium... 88 19 Pengujian Beda Nilai Rata-Rata Kadar Kalsium dalam Sampel

Daun Salam Segar dan Daun Salam Rebus... 91 20 Pengujian Beda Nilai Rata-Rata Kadar Natrium dalam Sampel

Daun Salam Segar dan Daun Salam Rebus... 93 21 Pengujian Beda Nilai Rata-Rata Kadar Magnesium dalam

Sampel Daun Salam Segar dan Daun Salam Rebus... 95 22 Tabel Uji Distribusi t... 97 23 Tabel Uji Distribusi f... 98

DAFTAR GAMBAR DALAM LAMPIRAN

Gambar Halaman

1 Pohon Salam ... 43

2 Daun Salam ... 43

3 Daun Salam ... 43

4 Alat Spektrofotometer Serpan Atom Hitachi Z-2000 ... 44

5 Alat Tanur ... 44

6 Kristal Kalsium Sulfat ... 45

7 Kristal Natrium Pikrat ... 45