Metode Penetapan Kadar Protein 1. Metode Bicinchoninic Acid BCA Microplate Reader

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta Tripsin adalah suatu enzim proteolitik pemecah protein yang mengkatalisis pemutusan ikatan peptida hanya pada sisi karboksil residu lisin dan arginin Yuwono, 2005. 17 UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

BAB 3 METODE PENELITIAN

3.1. Kerangka Penelitian

Alga segar Alga ukuran kecil 1cm Serbuk alga Ekstrak alga Supernatan ekstrak kasar alga  Dibersihkan  Dipotong  Ditimbang  Dimasukan kedalam lumpang  Ditambahkan nitrogen cair  Digerus  Diekstraksi secara maserasi kinetik dengan stirer magnetik  Buffer PBS pH 7.  Suhu 4 ͦC  Selama 8 jam  Disaring  Disentrifugasi  Suhu 4 o C  Kecepatan 10.000 rpm  Selama 30 menit Uji kadar protein total Uji aktivitas hemaglutinasi  Native  Dengan perlakuan tripsin  Dimasukan ke conical tube  Disimpan dalam lemari pendingin -20 o C  Dicairkan  Dimasukan ke tabung Eppendorf Eritrosit Eritrosit manusia A,B dan Analisis UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

3.2. Waktu dan Tempat Penelitian

Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Bioteknologi, Balai Besar Riset Pengolahan Produk dan Bioteknologi Kelautan dan Perikanan, Badan Litbang Kelautan dan Perikanan – Departemen Kelautan dan Perikanan RI. Waktu penelitian dilakukan bulan Februari sampai dengan Agustus 2015. 3.3. Alat dan Bahan 3.3.1. Alat Alat yang digunakan dalam penelitian ini meliputi: timbangan analitik Mettler PE 360 dan Adventurer, gunting, lumpang, alu, wadah plastik, sudip, batang pengaduk, alat sentrifugasi dingin Beckman coulter avanti J-26Xpi, Centurition Scientific dan Hettich, microplate reader Thermo Scientific Multiskan GO, pH meter Thermo Orion 420, biosafety cabinet Faster BH-EN 2004, inkubator Lab- line Instrument, vortex Thermolyne, stirer magnetik Thermo Scientific, pipet serologi sekali pakai Nunc, conical tube, mikropipet, microtiter 96 well U-plates, dan tabung eppendorf, alat-alat gelas Pyrex. 3.3.2. Bahan 3.3.2.1 Sampel Tumbuhan Sampel tumbuhan yang digunakan dalam penelitian ini adalah 9 spesies alga koleksi Balai Besar Riset Pengolahan Produk dan Bioteknologi Kelautan dan Perikanan, Badan Litbang Kelautan dan Perikanan-Departemen Kelautan dan Perikanan RI hasil sampling dari perairan pantai di Manado Indonesia. Adapun 9 sampel alga masih dalam bentuk kode yaitu M 21, M 22, M 26, M 27, M 28, M 29, M 30, M 31 dan M 32.

3.3.2.2 Klasifikasi Tumbuhan Dari 9 sampel 2 diantaranya yaitu :

a. Kode M-21-2-14 Alga Hijau Halimeda macroloba

FilumDivisio : Chlorophyta