Perhitungan Kesetaraan Larutan Pentiter 2,6-Diklorofenol Indofenol Penyiapan Larutan Sampel Penetapan Kadar Vitamin C dari Larutan Sampel

18

3.5.1.3 Larutan NaHCO

3 Dilarutkan 84 mg NaHCO 3 dalam 100 mL air Ditjen POM RI, 1995.

3.5.2 Perhitungan Kesetaraan Larutan Pentiter 2,6-Diklorofenol Indofenol

Ditimbang seksama 50 mg asam askorbat BPFI, dipindahkan ke dalam labu tentukur 100 mL, kemudian dilarutkan dengan larutan asam metafosfat-asetat LP, dicukupkan sampai garis tanda. Dipipet 1 mL, dimasukkan kedalam erlenmeyer dan ditambahkan larutan asam metafosfat-asetat 6 mL. Dititrasi segera dengan larutan 2,6-diklorofenol indofenol hingga warna merah muda mantap tidak kurang dari 5 detik. Dilakukan titrasi blanko menggunakan 7 mL asam metafosfat-asetat dan dititrasi dengan larutan 2,6-diklorofenol indofenol hingga warna merah muda mantap. Kadar larutan baku 2,6-diklorofenol indofenol dinyatakan dengan kesetaraan dalam mg asam askorbat Ditjen POM RI, 1995; Gandjar dan Rohman, 2009. Menurut Ditjen POM RI 1995, perhitungan kesetaraan dilakukan dengan rumus : Kesetaraan mg = Va x W x kadar Vc x Vt − Vb Keterangan: Va = Volume aliquot mL W = Berat vitamin C mg Vt = Volume titrasi mL Vb = Volume blanko mL Vc = Volume labu tentukur mL

3.5.3 Penyiapan Larutan Sampel

Buah sirsak yang mentah dan matang masing-masing dicuci hingga bersih. Lalu buah sirsak dikupas dan dipisahkan dari bijinya. Timbang sekitar 100 g daging buah sirsak lalu dimasukkan ke dalam blender, ditambahkan 20 mg asam Universitas Sumatera Utara 19 metafosfat asetat setelah itu diblender. Kemudian diambil sebanyak 10 g, masukkan ke dalam labu tentukur 100 ml. Selanjutnya tambahkan asam metafosfat-asetat hingga garis tanda lalu homogenkan. Selanjutnya disaring dengan menggunakan kertas saring, filtrat pertama dibuang ± 20 mL Ditjen POM RI, 1995.

3.5.4 Penetapan Kadar Vitamin C dari Larutan Sampel

Dipipet 2 mL larutan sampel lalu dimasukkan ke dalam erlenmeyer kemudian ditambah 5 mL asam metafosfat-asetat. Dititrasi dengan larutan 2,6- diklorofenol indofenol sampai terbentuk warna merah muda yang mantap sebagai titik akhir titrasi. Dilakukan penetapan blanko Ditjen POM RI, 1995. Menurut Long 2000, kadar vitamin C dapat dihitung dengan rumus : Kadar vitamin C mgg = Vt −Vb x Kesetaraan x Vl Vp x Bs Keterangan: Vt = Volume titrasi mL Vb = Volume blanko mL Vl = Volume labu tentukur mL Vp = Volume pemipetan mL Bs = Berat sampel g Contoh perhitungan dapat dilihat pada Lampiran 7 halaman 37. 3.5.5 Validasi 3.5.5.1 Uji Perolehan Kembali Recovery