BAB 5 KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan
Analisis RAPD dengan menggunakan 4 primer acak terseleksi pada 31 aksesi markisa dari Sumatera Utara menghasilkan polimorfisme yang cukup tinggi
yaitu 73 pita polimorfik 98. Markisa Passiflora spp. mengelompok pada masing-masing wilayah pengkoleksiannya. Koefisien kemiripan genetik markisa
berkisar antara 0,80 sampai 0,97. Markisa dengan spesies yang sama tetapi forma berbeda P. edulis f. membentuk satu kelompok yang berbeda dan terpisah
dengan spesies lainnya P. lingularis dan P. quadrangularis. Hubungan genetik markisa antara kabupaten HUMBAHAS dan kabupaten Simalungun relatif lebih
dekat dibandingkan kabupaten Karo. Kedekatan jarak geografis wilayah pengkoleksian dan kesamaan jenis markisa warna buah tidak menjamin
kedekatan hubungan genetik antar wilayah markisa ungu berdasarkan penanda RAPD. Hal ini mengindikasikan bahwa setiap spesies dalam genus yang sama
memiliki genetik yang berbeda. Dengan demikian adanya variasi genetik yang tinggi pada setiap tanaman markisa yang diuji memiliki potensi untuk
dilakukannya program pemuliaan markisa demi mendapatkan markisa yang lebih berkualitas.
5.2 Saran
Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui keanekaragaman genetik tanaman markisa dengan menggunakan primer yang berbeda atau dengan
menggunakan teknik marka yang berbeda.
DAFTAR PUSTAKA
Afifah, E,N. 2012. Penggunaan Penanda Molekuler Untuk Mempercepat Dan Mempermudah Perbaikan Kualitas Tanaman Teh Camellia sinensis L.
O. Kuntze. Makalah Seminar Budidaya Pertanian. Yogyakarta: Universitas Gadjah Mada.
Anggereini, E. 2008. Random Amplified Polymorphic DNA RAPD, Suatu Metode Analisis DNA Dalam Menjelaskan Berbagai Fenomena Biologi.
Biospecies. 12: 73-76. Ashari, S. 1995. Hortikultur Aspek Budidaya. UI-press. Jakarta.
Aulia, I. 2014. Pengaruh Pemberian 2,4-D dan Frekuensi Subkultur Terhadap Perubahan Genetik Kalus dari Bunga Betina Kelapa Sawit Elaeis
guineensis Jacq.. [Skripsi]. Medan: Universitas Sumatera Utara. Azrai, M. 2005. Ulasan Pemanfaatan Marka Molekuler dalam Proses Seleksi
Pemuliaan Tanaman. Jurnal Agro Biogen. 11: 26-37. Bardakci, F. 2001. Random Amplified Polymorphic DNA RAPD Markers.
Turk J Biol. 25: 185-196. Bellon G, Faleiro F.G, Junqueira K.P, Junqueira N.T.V. 2007. Genetic
Variability of Wild and Commercial Passion Fruit Passiflora edulis Sims. Accessions Using RAPD Markers. Rev. Bras. Frutic Jaboticabal.
29: 124-127.
Anonim. 2004. [BPPHP] Buletin Teknopro Hortikultura Direktorat Pengolahan dan Pemasaran Hasil Hortikultura. Edisi 70.
Crochemore, M.L., Molinari, H. B. C., and Vieira, L. G. E. 2003. Genetic Diversity in Passion Fruit Passiflora spp. Evaluated by RAPD
Markers. An International Journal. 46:521-524. Danarto, S., Affianto, A., Bantara, J., Adi, N.J., Sanyoto, R. 2012. Produksi
Agroforesty. Indonesia Foresty and Governance Institute. pp 21-28. Doyle, J.J., and Doyle J.L. 1990. Isolation of Plant DNA from Fresh Tissue.
Focus 12:13-15. Erlich, H.A. 1989. Polymerase Chain Reaction. Journal of Clinical Imunology.
96:34-47. Fajardo, D., Angel. F., Grum, M., Tohme, J., and Lobo, M. 1998. Genetic
Variation Analysis of The Genus Passiflora L. Using RAPD Markers. Euphytica Kluwer Academic Publisher. 101: 341-347.
Grattapaglia, D., J. Chaparro, P. Wilcox., S. McCord, D. Werner., H. Amerson., S. McKeand, F. Bridgwater., R. Whetten., D.O’Malley, and R. Sederoff.
1992. Mapping in Woody Plants with RAPD markers; Application to Breeding in Forestry and Horticulture. In,
Application of RAPD Technology to Plant Breeding. Joint Plant breeding Symposia Society of
America, Madison, WI. Halimas, A.W. 2014. Studi Morfologi dan Anatomi Beberapa Aksesi Markisa
Koleksi Balai Penelitian Tanaman Buah Kebun Percobaan Berastagi Sumatera Utara. [Skripsi]. Medan; Universitas Sumatera Utara.
Hamrick JL, Godt MJW. 1989. Allozyme Diversity in Plant Species. In: Brown AHD, Clegg MT, Kahler AL, Weir BS
.eds. Plant Population Genetics, Breeding, and Germplasm. Resources. Sinauer
Associates, Sunderland. pp 43–63. Hannum, S. 2001. Hubungan Genetik Empat Populasi Kelapa Genjah
Berdasarkan Penanda RAPD Random Amplified Polymorphic DNA. [Tesis]. Bogor: Institut Pertanian Bogor.
Harahap, A.S. 2014. Keragaman Genetik Aren Asal Sulawesi Tenggara Brdasarkan Penanda RAPD Random Amplified Polymorphic DNA.
[Tesis]. Medan: Universitas Sumatera Utara. Haris, T.N. 1994. Development and Germination Studies of The Sugar Palm
Arenga pinnata Merr Seed. [Disertasi]. Malaysia: Universitas Putra Malaysia.
Irawan, B. 2008. Genetika Molekuler. Air Langga University Press. Surabaya. Javornik, B., and Kump, B. 1993. Random Amplified Polymorphic DNA
RAPD Markers in Buckwheat. Fagopyrum. 13:35-39. Julisaniah, N. I., Sulistyowati, L., and Sugiharto, A.N. 2008. Analisis
Kekerabatan Mentimun Cucumis sativus L. Menggunakan Metode RAPD-PCR dan Isozim. Biodiversitas. 92:99-102.
Karmila. 2013. Analisis Kelayakan Financial Usaha Tani Markisa Konyal Passiflora ligularis di Desa Arosuka Kecamatan Gunung Talang
Kabupaten Solok Provinsi Sumatera Barat. [Skripsi]. Bengkulu: Universitas Bengkulu.
Karsinah, Silalahi. F.H., and Mashur, A. 2007. Eksplorasi dan Karakterisasi Plasma Nutfah Tanaman Markisa. J. Hort. 174-.297-306.
Kumar, N.S., and Gurusubramanian G., 2011. Random Amplified Polymorphic DNA RAPD Markers and Its Application. Journal Sci Vis. 11 3: 116-
124. Lade, B.D., Patil, A.S., and Paikrao, H.M. 2014. Efficient Genomic DNA
Extraction Protocol from Medicinal Rich Passiflora foetida Containing
High Level of Polysaccharide and Polyphenol. India: Department of Biotechnology. Sant Gadge Baba Amravati University.
Langga, I.F., Restu, M., and Kusv.rinanti, T. 2012. Optimalisasi Suhu dan Lama Inkubasi Dalam Ekstraksi DNA Tanaman Bitti Vitex cofassus Reines
Serta Analisis Keragaman Genetik Dengan Teknik RAPD-PCR. J. Sains Teknologi. 123:265-276.
[LITBANG] Markisa Asam Passiflora edulis Sims Buah Eksotik Kaya Manfaat. 2010. Iptek Hortikultura. 6:30-34.
Linacero, R., J. Rueda dan A.M. Vazquaes. 1998. Quantification of DNA. Pages 18-21 dalam Karp, A., P.G, Issac, dan D.S Ingram Eds.. Molecular
Tools for Screening Biodiversity: Plants and Animals. Chapman and Hall. London, Weinheim, New York, Tokyo, Melbourne, Madras.
Lopes, S. C . 1991. Citogenetica do Maracuja, Passiflora spp. In: Sao Jose AR ed A cultura do maracuja no Brasil Funep. Funep, Jaboticabal. pp
201–209. Martin, F.W., Nakasone, H.Y. 1970. The Edible Species of Passiflora. Economic
Botanic. 24:333-343. Nasution, M. A., Nur, B. G., Razak, Z. 2011. Keragaman Genetik Beberapa
Aksesi Markisa Berdasarkan Penanda Inter Simple Sequence Repeat ISSR. J. Agrivigor. 102:157-156.
Nuraida, D. 2012. Pemuliaan Tanaman Cepat dan Tepat Melalui Pendekatan Marka Molekuler. El-Hayah. 22:97-102.
OP. Sharma. 1993. Plant Taxonomy. Tata Mc-craw-Hill Publishing Company Limited. New Delhi.
Roslim, D.I.A., Hartana, Suharsono. 2003. Hubungan Genetika Populasi Kelapa Dalam Banyuwangi, Lubuk Pakam, dan Paslaten Berdasarkan Analisis
RAPD Random Amplified Polymorphic
DNA. Jurnal Nature
Indonesia. 61: 5-110. Rukmana, H. R. 2003. Usaha Tani Markisa. Kanisius. Yogyakarta,
Sambrook, J., Fritsch, E.F., and The Maniatis. 1989. Molecular Cloning A Laboratory Manual. Spring Harbor Laboratory Press. Vol. 2.
Santos F.L., Olliveira, E.J., Silva, A.S., Carvalho, F.M., Costa, J.L., Pasua, J.G. 2011. ISSR Markers as a Tool for The Assessment of Genetic Diversity
in Passiflora. Biochem Genet. Sunarjono, H. 1997. Pengenalan Jenis Tanaman Buah-buahan Indonesia. Sinar
Baru. Bandung.
Suranto. 2002. Cluster Analysis of Ranuculus Species. Biodiversitas. 31: 201- 206.
Syafaruddin and Santoso, T.J. 2011. Optimasi Teknik Isolasi dan Purifikasi DNA yang Efesien dan Efektif Pada Kemiri Sunan Reutalis trisperma
Blanco airy Shaw. Jurnal Littri. 171:11-17. Tenriulo A., E. Suryati., A. Parengrengi ,dan Rosmiat. 2001. Ekstraksi DNA
Rumput Laut Kappaphycus alvarezii Dengan Metode Fenol Kloroform.
Viana, A., Souza, M., Araujo., Correa R., and Ahnert, D. 2003. Genetic Diversity in Passiflora Species Determined by Morphological and Molecular
Characteritics. Bio. Plant. 54:535-538. Viana, A.P., Percira, T.N.S., Periera, M.G., Souza, M.M., Maldonado, J.F.M.,
and Junior, A.T.A. 2006. Genetic Diversity in Yellow Passion Fruit Population. Crop Breeding and Applied Biotechnology. 6:87-89.
Anonim. 2008. Perkembangan Marka Molekuler untuk Seleksi Tanaman. [Warta Biogen] Marina Chemica Acta 22. Universitas Hasanuddin.
Weeden, N.F., Timmerman, G.M., Hemmat, M., Kneen, B.E., and Lodhi, M.A. 1992. Mapping in Woody Plants with RAPD markers; Application to
Breeding in Forestry and Horticulture. In, Application of RAPD
Technology to Plant Breeding. Joint Plant breeding Symposia Society of America, Madison, WI.
Williams, J.G.K., A.R. Rubelik, K.J. Livak, J.A. Rafalski and S.V. Tingey. 1990. DNA Polymorphism. Amplified by Artitrary Primers are Useful As
Genetic Markers. Nucleic Acids Res. 18:6531-6535. Yasminingsih, N.A. 2009. Analisis Keragaman Genetik Jarak Pagar Jatropha
curcas L. Berdasarkan Penanda Molekuler RAPD Random Amplified Polymorphic DNA. [Tesis]. Surakarta: Universitas Sebelas Maret.
Lampiran 1. Koleksi 31 Aksesi Tanaman Markisa di Sumatera Utara
No. NO KODE
JENIS DESAKELURAHAN
KECAMATAN KABUPATEN
LAHANKEBUN
1 MUH1
Ungu JANJI HUTA NAPA
PARLILITAN HUMBAHAS
Menjalar pada kopi 2
MUH2 Ungu
JANJI HUTA NAPA PARLILITAN
HUMBAHAS Menjalar pada kopi
3 MUH3
Ungu PUSUK BUHIT
PARLILITAN HUMBAHAS
Menjalar pada batang kayu 4
MLH1 Konyal
PUSUK BUHIT PARLILITAN
HUMBAHAS Menjalar pada kopi
5 MUH4
Ungu PUSUK 2 SIMANINGGIR
PARLILITAN HUMBAHAS
Menjalar pada pohon besar 6
MKT1 Kuning
HARIANJA PANGARIBUAN
TAPANULI UTARA Menjalar pada kopi
7 MKT2
Kuning PARSIBARUNGAN
PANGARIBUAN TAPANULI UTARA
Menjalar pada semak belukar 8
MKT3 Kuning
SABUNGAN NI HUTA 2 SIPAHUTAR
TAPANULI UTARA Menjalar pada semak belukar
9 MFT1
F1 ONNANRUNGGU 1
SIPAHUTAR TAPANULI UTARA
Menjalar pada semak belukar 10
MMT1 Merah
PARDOMUAN NAINGGOLAN PAHAE JAE
TAPANULI UTARA Menjalar pada semak belukar
11 MUK1
Ungu BARUS JAHE
BARUS JAHE KARO
Menjalar pada pacak kayu 12
MUK2 Ungu
PARTUMBUKEN BARUS JAHE
KARO Menjalar pada pacak kayu
13 MUK3
Ungu DOLOK RAKYAT
DOLOK RAKYAT KARO
Menjalar pada pacak kayu 14
MUK4 Ungu
KABAN KABAN JAHE
KARO Menjalar pada tanaman jeruk
15 MUK5
Ungu LAUCIMBA
KABAN JAHE KARO
Menjalar pada tanaman jeruk 16
MUK6 Ungu
BUNURAYA TIGA PANAH
KARO Menjalar pada tanaman kopi
17 MUK7
Ungu SEBERAYA
TIGA PANAH KARO
Menjalar pada tanaman jeruk 18
MUK8 Ungu
LINGGA SIMPANG 4
KARO Menjalar pada batang kayu
19 MUK9
Ungu KUTAMBELIN
JUHAR KARO
Menjalar pada tanaman pagar 20
MLK1 Konyal
AEK HOTANG MEREK
KARO Menjalar pada pacak kayu
21 MFK1
F1 TONGKOH
BERASTAGI KARO
Menjalar pada pacak kayu 22
MMK1 Merah
TONGKOH BERASTAGI
KARO Menjalar pada pacak kayu
23 MKK1
Kuning TONGKOH
BERASTAGI KARO
Menjalar pada pacak kayu 24
MGK1 Giant
TONGKOH BERASTAGI
KARO Menjalar pada pacak kayu
25 MUS1
Ungu NAGORI UJUNG BAWANG
DOLOK SILAU SIMALUNGUN
Menjalar pada tanaman kopi 26
MUS2 Ungu
DESA BAWANG DOLOK SILAU
SIMALUNGUN Menjalar pada tanaman kopi
27 MUS3
Ungu DESA TAMBAK BAWANG
DOLOK SILAU SIMALUNGUN
Menjalar pada tanaman jeruk 28
MUS4 Ungu
DESA TANJUNG DOLOK SILAU
SIMALUNGUN Menjalar pada tanaman kopi
29 MUS5
Ungu DESA PANRIBUAN
DOLOK SILAU SIMALUNGUN
Menjalar pada tanaman kopi 30
MUS6 Ungu
DESA NEGRI DOLOK SILAU KAHEAN
SIMALUNGUN Menjalar pada tanaman pagar
31 MW1
Liar -
- -
-
Lampiran 2. Hasil Pengukuran Kuantitas DNA dengan Menggunakan Nanophotometer
Kode Sampel Kemurnian A260280
Konsentrasi ngµl
MUH1
1,600 404
MUH2
1,758 455
MUH3
1,554 2552
MLH1
1,879 840
MUH4
1,886 937
MKT1
1,789 783
MKT2
1,643 805
MKT3
1,700 42,5
MFT1
1,890 88
MMT1
1,749 2253
MUK1
1,563 1709
MUK2
1,965 1988
MUK3
1,368 885
MUK4
1,570 800
MUK5
1,840 290
MUK6
1,794 1904
MUK7
1,924 1080
MUK8
1,888 209
MUK9
1,709 3211
MLK1
1,807 2233
MFK1
1,617 3490
MMK1
1,518 295
MKK1
1,422 1362
MGK1
1,882 1222
MUS1
1,578 334
MUS2
1,794 904
MUS3
1,998 785
MUS4
1,739 981
MUS5
1,778 869
MUS6
1,878 379
MW1
1,687 539
Lampiran 3. Gambar Hasil Amplifikasi DNA Markisa berdasarkan Teknik RAPD
A. Primer OPA 04
M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
M 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26
M 27
28 29
30 31
250 500
750 1000
1500
250 500
750 1000
1500
500 750
1000
250 1500
B. Primer OPB 08 M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
M 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26
M 27
28 29
30 31
500 750
1000
250 1500
500 750
1000
250 1500
500 750
1000
250 1500
C. Primer OPB 18 M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
M 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26
M 27
28 29
30 31
500 750
1000
250 1500
500 750
1000
250 1500
500 750
1000
250 1500
Lampiran 4. Matriks Kemiripan Genetik Markisa Ungu Passiflora edulis
AKSESI MUH1
MUH2 MUH3
MUH4 MUK1
MUK2 MUK3
MUK4 MUK5
MUK6 MUK7
MUK8 MUK9
MUS1 MUS2
MUS3 MUS4
MUS5 MUS6
MW1 MUH1
1.00
MUH2 0.97
1.00
MUH3 0.86
0.86 1.00
MUH4
0.91 0.88
0.80 1.00
MUK1
0.74 0.72
0.69 0.78
1.00
MUK2
0.76 0.73
0.70 0.80
0.96 1.00
MUK3 0.74
0.72 0.69
0.76 0.89
0.93 1.00
MUK4 0.73
0.70 0.68
0.74 0.88
0.89 0.96
1.00
MUK5 0.76
0.76 0.73
0.74 0.85
0.86 0.85
0.84 1.00
MUK6 0.72
0.69 0.64
0.70 0.76
0.77 0.78
0.80 0.85
1.00
MUK7 0.73
0.70 0.68
0.72 0.82
0.81 0.82
0.81 0.86
0.88 1.00
MUK8 0.76
0.73 0.68
0.74 0.85
0.84 0.85
0.86 0.86
0.88 0.92
1.00
MUK9
0.76 0.76
0.76 0.72
0.82 0.81
0.82 0.81
0.81 0.77
0.84 0.84
1.00
MUS1
0.78 0.76
0.78 0.77
0.72 0.73
0.74 0.73
0.70 0.64
0.68 0.73
0.70 1.00
MUS2
0.77 0.74
0.74 0.78
0.70 0.72
0.73 0.69
0.69 0.62
0.66 0.69
0.69 0.93
1.00
MUS3
0.76 0.73
0.76 0.80
0.72 0.73
0.74 0.70
0.68 0.58
0.65 0.68
0.68 0.95
0.96 1.00
MUS4 0.78
0.76 0.76
0.82 0.74
0.76 0.77
0.73 0.70
0.61 0.68
0.70 0.68
0.92 0.96
0.97 1.00
MUS5 0.77
0.74 0.72
0.78 0.73
0.74 0.76
0.72 0.72
0.62 0.69
0.72 0.72
0.88 0.89
0.91 0.88
1.00
MUS6 0.74
0.72 0.69
0.76 0.70
0.72 0.73
0.69 0.69
0.62 0.66
0.69 0.69
0.85 0.89
0.88 0.85
0.97 1.00
MW1 0.84
0.81 0.76
0.85 0.74
0.76 0.72
0.70 0.73
0.69 0.70
0.70 0.70
0.70 0.69
0.68 0.70
0.69 0.66
1.00
Lampiran 5. Matriks Kemiripan Genetik Markisa Passiflora sp.
AKSESI MUH1
MUH2 MUH3
MLH1 MUH4
MKT1 MKT2
MKT3 MFT1
MMT1 MUK1
MUK2 MUK3
MUK4 MUK5
MUK6 MUK7
MUK8 MUK9
MUH1 1.00
MUH2 0.97
1.00
MUH3
0.95 0.95
1.00
MLH1 0.86
0.84 0.84
1.00
MUH4 0.91
0.88 0.85
0.85 1.00
MKT1
0.89 0.86
0.84 0.84
0.91 1.00
MKT2 0.86
0.84 0.81
0.81 0.88
0.97 1.00
MKT3 0.80
0.77 0.74
0.74 0.81
0.91 0.91
1.00
MFT1 0.88
0.85 0.82
0.82 0.92
0.91 0.91
0.84 1.00
MMT1 0.86
0.84 0.81
0.86 0.85
0.89 0.86
0.82 0.91
1.00
MUK1 0.74
0.72 0.72
0.74 0.78
0.74 0.72
0.65 0.78
0.77 1.00
MUK2 0.76
0.73 0.73
0.73 0.80
0.76 0.73
0.66 0.80
0.78 0.96
1.00
MUK3 0.74
0.72 0.72
0.72 0.76
0.72 0.72
0.65 0.78
0.77 0.89
0.93 1.00
MUK4 0.73
0.70 0.70
0.70 0.74
0.70 0.70
0.64 0.77
0.76 0.88
0.89 0.96
1.00
MUK5 0.76
0.76 0.76
0.73 0.74
0.73 0.70
0.64 0.77
0.78 0.85
0.86 0.85
0.84 1.00
MUK6 0.72
0.69 0.69
0.66 0.70
0.72 0.69
0.62 0.73
0.72 0.76
0.77 0.78
0.80 0.85
1.00
MUK7
0.73 0.70
0.70 0.70
0.72 0.73
0.70 0.66
0.74 0.76
0.82 0.81
0.82 0.81
0.86 0.88
1.00
MUK8 0.76
0.73 0.73
0.73 0.74
0.73 0.73
0.64 0.74
0.73 0.85
0.84 0.85
0.86 0.86
0.88 0.92
1.00
MUK9 0.76
0.73 0.73
0.76 0.74
0.73 0.70
0.66 0.74
0.76 0.88
0.86 0.88
0.86 0.84
0.80 0.86
0.89 1.00
MLK1
0.77 0.77
0.77 0.77
0.76 0.74
0.72 0.68
0.73 0.74
0.78 0.77
0.76 0.74
0.80 0.70
0.77 0.77
0.82
MFK1 0.69
0.69 0.69
0.69 0.70
0.66 0.66
0.59 0.68
0.66 0.78
0.77 0.76
0.74 0.77
0.70 0.74
0.80 0.82
MMK1 0.66
0.66 0.66
0.66 0.68
0.64 0.64
0.57 0.68
0.66 0.78
0.77 0.78
0.77 0.82
0.78 0.82
0.85 0.85
MKK1
0.68 0.68
0.68 0.68
0.69 0.68
0.68 0.61
0.69 0.68
0.80 0.78
0.80 0.78
0.81 0.72
0.78 0.84
0.84
MGK1 0.76
0.73 0.73
0.70 0.72
0.73 0.73
0.69 0.74
0.73 0.82
0.81 0.80
0.78 0.78
0.74 0.73
0.76 0.84
MUS1 0.78
0.76 0.81
0.81 0.77
0.76 0.73
0.66 0.74
0.76 0.72
0.73 0.74
0.73 0.70
0.64 0.68
0.73 0.76
MUS2
0.77 0.74
0.77 0.77
0.78 0.74
0.72 0.65
0.73 0.74
0.70 0.72
0.73 0.69
0.69 0.62
0.66 0.69
0.74
MUS3 0.76
0.73 0.78
0.78 0.80
0.73 0.70
0.64 0.72
0.73 0.72
0.73 0.74
0.70 0.68
0.58 0.65
0.68 0.73
MUS4 0.78
0.76 0.78
0.78 0.82
0.76 0.73
0.66 0.74
0.76 0.74
0.76 0.77
0.73 0.70
0.61 0.68
0.70 0.73
MUS5 0.77
0.74 0.74
0.80 0.78
0.74 0.72
0.65 0.73
0.74 0.73
0.74 0.76
0.72 0.72
0.62 0.69
0.72 0.77
MUS6 0.74
0.72 0.72
0.77 0.76
0.72 0.69
0.62 0.70
0.72 0.70
0.72 0.73
0.69 0.69
0.62 0.66
0.69 0.74
MW1 0.77
0.74 0.74
0.77 0.78
0.74 0.72
0.68 0.73
0.74 0.70
0.72 0.73
0.72 0.72
0.65 0.69
0.72 0.72
AKSESI MUK9
MLK1 MFK1
MMK1 MKK1
MGK1 MUS1
MUS2 MUS3
MUS4 MUS5
MUS6 MW1
MUH1 MUH2
MUH3 MLH1
MUH4 MKT1
MKT2 MKT3
MFT1 MMT1
MUK1 MUK2
MUK3 MUK4
MUK5 MUK6
MUK7 MUK8
MUK9 1.00
MLK1 0.82
1.00
MFK1
0.82 0.84
1.00
MMK1 0.85
0.78 0.92
1.00
MKK1 0.84
0.82 0.82
0.85 1.00
MGK1
0.84 0.77
0.72 0.72
0.76 1.00
MUS1 0.76
0.74 0.66
0.64 0.68
0.68 1.00
MUS2 0.74
0.73 0.65
0.62 0.66
0.66 0.93
1.00
MUS3
0.73 0.72
0.64 0.61
0.65 0.65
0.95 0.96
1.00
MUS4 0.73
0.74 0.66
0.64 0.68
0.65 0.92
0.96 0.97
1.00
MUS5 0.77
0.70 0.68
0.65 0.69
0.69 0.88
0.89 0.91
0.88 1.00
MUS6
0.74 0.68
0.65 0.62
0.66 0.66
0.85 0.89
0.88 0.85
0.97 1.00
MW1 0.72
0.70 0.65
0.65 0.66
0.64 0.88
0.86 0.85
0.88 0.84
0.81 1.00
Lampiran 6. Pembuatan Larutan Stok dan Buffer A. Pembuatan Larutan Stok
•
Tris HCL 1 M pH 8.0 100 ml : Timbang Tris sebanyak 12,114 g.
Masukkan Tris ke dalam Erlenmeyer dan ditambahkan 80 ml aquades. Aduk campuran larutan sampai homogen, selanjutnya ditambah 4,2 ml
HCL pekat sedikit demi sedikit sampai pH mencapai 8, kemudian volume ditepatkan dengan aquades hingga 100 ml. Larutan disterilkan dengan
autoklaf. •
EDTA 0,5 M pH 8.0 100 ml : Timbang EDTA sebanyak 18,612 g dan
NaOH 2.0 g. Masukkan kedalam Erlenmeyer dan ditambah 80 ml aquades. Selanjutnya, ditambahkan HCL pekat sedikit demi sedikit sampai pH 8,
kemudian volume ditepatkan dengan aquades hingga 100 ml. Larutan disterilkan dengan autoklaf.
•
NaCl 5 M 100 ml : Timbang NaCl sebanyak 29,22 g. Masukkan
kedalam Erlenmeyer dan ditambahkan aquades hingga larutan mendekati 100 ml dan diaduk. Kemudian volume ditepatkan dengan dengan aquades
hingga 100 ml. Larutan disterilkan dengan autoklaf.
B. Pembuatan Larutan Bufer
•
CTAB 2 100 ml
CTAB 2 = 2 g CTAB
20 mM EDTA = 8 ml EDTA 0,5 M pH 8.0
100 mM Tris-HCl = 10 ml Tris-HCl 1 m pH 8.0 1,4 M NaCl
= 56 ml NaCl 5 M 0,2 PVP
= 2 g PVP 0,2 β-merkaptotanol
•
Buffer TAE 50 X 100 ml
Tris = 24,2 g
Asam Asetat Glacial = 5,7 ml
EDTA 0,5 M pH 8.0 = 10 ml
Aquades ditambahkan hingga volume larutan 100 ml
•
Buffer TAE 1 X 1000 ml
Buffer TAE 50 X = 20 ml Aquades
= 980 ml •
Kloroform Isoamilalkohol 24:1 50 ml
Kloroform = 48 ml
Isoamilalkohol = 2 ml
Lampiran 7. Jenis Markisa yang Dikoleksi di Sumatera Utara a. Markisa Konyal
Passiflora ligularis
b. Markisa ErbisGiant Passiflora quadrangularis