16
6. Penyimpanan Dingin Stirred Yoghurt Campuran
Stirred yoghurt dibuat berdasarkan formulasi terbaik yang diperoleh pada tahap sebelumnya. Yoghurt ini kemudian disimpan di lemari pendingin dengan suhu 10
o
C 5
o
C selama sebulan 32 hari. Analisis total BAL, jumlah Pediococcus, total kapang-khamir, dan
pH dilakukan setiap 4 hari sekali.
C. METODE ANALISIS
1. Analisis Mikrobiologi
1.1. Total BAL Bakteri Asam Laktat Harrigan 1998
Sebanyak 1 ml sampel dipipet ke dalam 9 ml larutan pengencer sehingga diperoleh tingkat pengenceran 10
-1
. Selanjutnya dibuat pengenceran 10
-2
-10
-7
atau sesuai kebutuhan. Kocok setiap pengenceran dengan vorteks. Diambil 1 ml dari tingkat pengenceran yang
diinginkan ke dalam cawan petri steril duplo. Pemupukan dilakukan pada pengenceran 10
-5
-10
-8
atau sesuai kebutuhan. Masing-masing cawan yang telah diberi contoh dituangi dengan media MRSA 12-15 ml. Campurkan contoh dan agar dengan menggerakkan
cawan sedemikian rupa sehingga campuran tersebar merata dan biarkan hingga memadat. Cawan diinkubasi pada suhu 37
o
C selama 48 jam. Koloni yang tumbuh dihitung sebagai total BAL. Perhitungan koloni yang tumbuh setelah 48 jam mengacu pada perhitungan
Angka Lempeng Total ALT BAM-FDA 2001:
N =
� � +� � �
Keterangan:
N : jumlah mikroba cfuml
∑C : jumlah koloni dari semua cawan 25-250 koloni
n1 : jumlah cawan pada pengenceran pertama
n2 : jumlah cawan pada pengenceran kedua
d : tingkat pengenceran pertama yang dihitung
1.2. Jumlah P. pentosaceus modifikasi Dabour et al. 2009
Sebanyak 1 ml sampel dipipet ke dalam 9 ml larutan pengencer sehingga diperoleh tingkat pengenceran 10
-1
. Selanjutnya dibuat pengenceran 10
-2
-10
-7
atau sesuai kebutuhan. Kocok setiap pengenceran dengan vorteks. Diambil 1 ml dari tingkat pengenceran yang
diinginkan ke dalam cawan petri steril duplo. Pemupukan dilakukan pada pengenceran 10
-5
-10
-8
atau sesuai kebutuhan. Masing-masing cawan yang telah diberi contoh dituangi dengan media PSM Pediococci Selective Agar +A sebanyak 12-15 ml. Medium PSM
+A merupakan medium MRSA yang ditambahkan antibiotik 50,000 Ul nystatin dan 1 mgl ampicillin. Campurkan contoh dan agar dengan menggerakkan cawan sedemikian
rupa sehingga campuran tersebar merata dan biarkan hingga memadat. Cawan diinkubasi pada suhu 37
o
C selama 48 jam. Koloni yang tumbuh dihitung sebagai total P.