3.3. Prosedur Penelitian
3.3.1. Penyediaan Sampel
Sampel yang diteliti adalah 1050 gram daun tumbuhan sambiloto Andrographis
paniculata Burm.f. Ness yang diperoleh dari areal pertanaman Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara.
3.3.2. Uji Skrining Fitokimia
Dilakukan uji pendahuluan terhadap daun tumbuhan sambiloto Andrographis paniculata
Burm.f. Ness untuk membuktikan adanya senyawa alkaloida yang terdapat di
dalamnya. Uji pendahuluan secara kualitatif dengan reaksi warna.
Prosedur : -
Dimasukkan 10 gram daun tumbuhan sambiloto Andrographis paniculata
Burm.f. Ness yang telah dikeringkan dan dipotong-potong kecil ke dalam
erlenmeyer -
Ditambahkan metanol secukupnya -
Didiamkan selama 1 malam -
Disaring -
Dibagi ekstrak metanol ke dalam 4 tabung reaksi -
Ditambahkan masing-masing pereaksi a.
Tabung I : dengan pereaksi Meyer menghasilkan larutan berwarna
kekeruhan b.
Tabung II : dengan pereaksi Wagner menghasilkan endapan berwarna
cokelat c.
Tabung III : dengan pereaksi Bouchardat menghasilkan endapan berwarna cokelat
d. Tabung IV : dengan pereksi Daragendorf menghasilkan endapan berwarna
merah kecokelatan
3.3.3. Pengadaan Ekstrak Kloroform Daun Tumbuhan Sambiloto
Daun tumbuhan sambiloto yang telah dikeringkan dan dipotong-potong kecil ditimbang sebanyak 1050 gram, kemudian dimaserasi dengan metanol sebanyak 7 liter selama ± 48
jam, kemudian disaring dan dipekatkan dengan menggunakan alat rotarievaporator sehingga terbentuk ekstrak pekat metanol. Ekstrak pekat metanol tersebut dipartisi
berulang-ulang dengan menggunakan n-heksan sebanyak 10 kali. Lalu diambil lapisan metanol dan dipekatkan. Kemudian diasamkan dengan menggunakan asam asetat 2
hingga mencapai pH=4 sambil diaduk. Lalu didiamkan selama 1 malam, kemudian dibasakan dengan NH
4
OH
p
sampai pH=10 sambil diaduk dan didiamkan selama 1 malam. Lalu diekstraksi partisi dengan menggunakan kloroform sebanyak 3 kali, lapisan
kloroform ditampung kemudian dipekatkan dengan menggunakan rotarievaporator sehingga diperoleh ekstrak pekat kloroform sebagai alkaloida total sebanyak 0,537 gram.
3.3.4. Analisis Kromatografi Lapis Tipis
Kategori