UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Fase gerak yang digunakan adalah metanol, etil asetat, dan toluen dengan perbandingan 5:40:55 Masing-masing larutan standar ditotolkan sebanyak 10
l, 30
l,50 l, dan 70 l, sedangkan untuk larutan uji digunakan 20 l. Setelah dieluasi dan dikeringkan diudara, plat dideteksi dengan menggunakan UV 365 nm
European Pharmacopoeia Comission,2005. Untuk pengukuran kadar sinensetin dilakukan dengan menggunakan alat TLC-Scanner 3 yang dilengkapiprogram
winCATS Camag.
3.3.4 Skrining Fitokimia
1. Identifikasi golongan alkaloid
Sebanyak 0,5 gram esktrak dilarutkan dalam larutan HCl encer kemudian disaring. Kedalam filtrat ditambahkan 2 ml larutan ammonia. Kemudian
ditambahkan kloroform 5ml dan dikocok perlahan-lahan untuk mengekstraksi basa alkaloid. Lapisan kloroform diambil lalu diekstraksi
dengan 10 ml asam asetat, kemudian dibagi menjadi 2 bagian. Pada pembagian pertama ditambahkan reagen Mayer dan bagian kedua
ditambahkan reagen Dragendorff. Terbentuknya warna krem dengan reagen meyer dan endapan coklat kemerahan dengan reagen Dragendorff
menunjukkan adanya senyawa golongan alkaloid Ayoolaet al.,2008. 2.
Identifikasi golongan flavonoid 0,5 gram ekstrak ditambah 50 ml air panas, dididihkan selama 5 menit dan
disaring, filtrat yang digunakan sebagai larutan percobaan. 5 ml larutan percobaan ditambahkan sedikit serbuk magnesium, 1 ml asam klorida
pekat dan 2 ml amilalkohol, dikocok dengan kuat dan dibiarkan memisah, terbentuknya warna orange, merah, kuning pada lapisan amilalkohol
menunjukkan adanya senyawa flavonoid Wijono,2003. 3.
Identifikasi golongan saponin 0,5 gram ekstrak dimasukkan ke dalam tabung reaksi dimasukkan ke
dalam tabung reaksi dan ditambahkan aquadest, larutan dikocok secara vertikal selama 3-5 menit. Terbentuknya busa yang stabil selama 30 menit
menunjukkan adanya senyawa golongan saponin Farnsworth,1966.
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
4. Identifikasi golongan tannin
0,5 gram ekstrak dididihkan dalam 10 ml aquadest dalam tabung reaksi, lalu disaring. Kemudian ke dalam filtrat ditambahkan 3 tetes larutan FeCl
3
. Terbentuk warna hijau kecoklatan atau biru kehitaman menunjukkan
adanya tannin Ayoolaet al.,2008. 5.
Identifikasi golongan steroid dan triterpenoid 0,5 gram ekstrak ditambahkan 2 ml kloroform, kemudian 2 tetes asam
asetat anhidrat dan 1 tetes asam sulfat pekat pereaksi Libermann- Burchard. Jika terbentuk warna hijau kehitaman menunjukkan golongan
steroid dan jika terbentuk warna merah yang cepat hilang menunjukkan adanya senyawa golongan triterpenoid Ayoolaet al.,2008.
3.3.5Penyiapan Hewan Uji
Sebelum digunakan untuk penelitian, hewan diaklimatisasi selama 2 minggu agar dapat menyesuaikan diri dengan lingkungan baru. Selama
diaklimatisasi, tikus diberikan minum dan makanan standar serta mengontrol kesehatan dan berat badan tikus.
3.3.6 Rancangan Penelitian
