Analisa Spektroskopi FT-IR Pembuatan Media Mueller Hinton Agar MHA Suspensi Bakteri Uji Sifat Antibakteri Minyak Atsiri Daun Bunga Tahi Ayam

Injection Mode : Split Flow Control Mode : Pressure Pressure : 12 kPa Total Flow : 81,5 mLmin Column Flow : 0,51 mLmin Linear Velocity : 26 cmsec Purge Flow : 0,3 mLmin Split Ration : 158,4 Equilibrium Time : 0,5 min GCMS-QP2010 Ion Source Temperature : 250 o C Interface Temperature : 215 o C Solvent Cut Time : 1 min Detector Gain Mode : Relative Detector Gain : 0,00 kV MS Start Time : 1,20 End Time : 38 min ACQ Mode : Scan Event Time : 0,50 sec Scan Speed : 1250 Start mz : 28 End mz : 600

3.3.3.2 Analisa Spektroskopi FT-IR

Minyak atsiri dioleskan pada plat KBr hingga terbentuk lapisan tipis transparan dan diukur spektrumnya dengan alat spektrofotometer FT-IR model I.R-420. Universitas Sumatera Utara 3.3.4 Pengujian Sifat Antibakteri Minyak Atsiri Daun Bunga Tahi Ayam 3.3.4.1 Pembuatan Media Nutrien Agar NA dan Subkultur Bakteri Dimasukkan 4 gram media NA ke dalam gelas Erlenmeyer, dilarutkan dengan 200 mL aquadest yang diikuti dengan pemanasan dan pengadukan, lalu disterilkan di dalam autoklaf pada suhu 121 o C selama 15 menit. Dituang kedalam cawan petri, dibiarkan media memadat. Digoreskan bakteri Basillus subtilis yang berasal dari isolat secara aseptik kedalam media yang sudah memadat. Diinkubasi selama 24 jam pada suhu 35 o C. Dilakukan dengan cara yang sama terhadap bakteri Escherchia coli dan Salmonella sp.

3.3.4.2 Pembuatan Media Mueller Hinton Agar MHA

Dimasukkan 7,6 gram media MHA ke dalam gelas Erlenmeyer, dilarutkan dengan 200mL aquadest yang diikuti dengan pemanasan dan pengadukan lalu disterilkan di dalam autoklaf pada suhu 121 o C selama 15 menit.

3.3.4.3 Suspensi Bakteri

Dimasukkan 10mL aquadest yang telah disterilkan kedalam tabung reaksi kemudian ditambahkan Basillus subtilis, yang sudah disubkultur ke dalam aquadest dengan menggunakan jarum ose yang sudah steril. Dimasukkan bakteri hingga kekeruhan aquadest sama dengan kekeruhan standar mcfarland. Dilakukan dengan cara yang sama terhadap bakteri Eschercia coli dan Salmonella sp

3.3.4.4 Uji Sifat Antibakteri Minyak Atsiri Daun Bunga Tahi Ayam

Dimasukkan 0,1mL suspensi Basillus subtilis, kedalam media MHA yang sebelumnya telah dibiarkan memadat didalam cawan petri lalu diratakan dengan menggunakan hockey stick dan dibiarkan sesaat. Dimasukkan kertas Cakram yang telah dibasahi oleh minyak atsiri daun bunga tahi ayam Tagetes erecta L kedalam cawan petri yang telah berisi bakteri dan diinkubasi selama 24 jam pada suhu 35 o C. Setelah itu diukur zona bening yang ada disekitar kertas cakram dengan menggunakan jangka sorong. Dilakukan perlakukan yang sama terhadap bakteri Eschercia coli dan Salmonella sp Universitas Sumatera Utara

3.3.5 Uji Sifat Antioksidan Minyak Atsiri Daun Bunga Tahi Ayam Dengan Metode DPPH