KROMATOGRAFI GAS 1. INSTRUMENTASI KROMATOGRAFI GAS

196 Injektor Cara masuknya sampel Ada berbagai cara sampel dimasukkan ke dalam kolom. Sebagian besar kromatografi gas dilengkapi dengan jenis injektor yang bisa memasukkan cairan langsung ke dalam kolom menggunakan jarum suntik. Tipe injektor yang digunakan tergantung jenis kolom yang dipakai. Tabel 18.1. Perbandingan kolom konvensional dan kolom kapiler Parameter Konvensional Kolom Kapiler Panjang Diameter interna l Tekanan Kecepatan Aliran Total Plat efektif Plat efektif Kapasitas Ketebalan Film Sampel Maksimum 1 – 6 m 2 – 4 mm 10 – 40 psi 10 – 60 mlmenit 5000 2 meter Kolom 2500 id 2 mm 10 ug peak 1 – 10 um 2 uL 2 mm id 5 – 100 m 0,2 – 0,7 mm 3 – 10 psi 0,5 – 15 ml menit 150000 50 meter Kolom 3000 id 0,25 mm 50 ug peak 0,05 – 1,0 um 0,01 uL Tipe kolom dan operasi menentukan desain dan operasi dari sistem pemasukan sampel dan detektor yang digunakan. Injektor kolom kapiler mempunyai beberapa perbedaan fundamental dari injektor konvensiona.l Hal ini disebabkan oleh perbedaan karakteristik kolom. Seperti pada Tabel 11.1, volume maksimum sampel yang dapat dimasukkan pada pipa kapiler adalah 0,01 ul. Gambar 12.5. GC Pneumatik Capillary GC. Gambar 18.4. GC Pneumatik Capillary GC 197 Oleh karena itu sampel yang dimasukkan harus memiliki reproducibly. Hal ini bisa dilakukan dengan menggunakan alat yang dinamakan Splitter Gambar 18.5. Gambar 18.5. Injektor pada kolom konvensional dan kolom kapiler Jumlah komponen yang dipisah ditentukan dari split valve dan ditentukan dari split ratio : kolom pada split jumlah syringe n menggunaka dengan an diinjeksik yang jumlah Ratio Split = Sekat pembersih septum purge diperlukan untuk menghindari kontaminasi sampel dengan materi yang berasal dari sekat. Sampel Gas Metode yang mudah untuk memasukkan gas-gas adalah lewat katup sampling gas. Volume gas dapat divariasikan tergantung pada ukuran loop. Loop tambahan dapat dijadikan satu untuk menjebak 198 sampel dengan pendinginan. Pemanasan pada loop kemudian bisa melepaskan sampel. Gambar 18.6. Katup sampling pada GC Sampel Padat Sampel padat misalnya; parfum dalam bentuk bedak atau serpihan sampel dapat dikemas dalam kapsul dan pecah di injektor. Sampel gelaskaca dapat dihancurkan sebelum diinjeksikan sedangkan campuran yang memiliki titik lebur rendah dapat dilelehkan untuk pelepasan sampel. Sampel padat dapat juga dipirolisis dan komponen yang bersifat padatan dibuang. Metode ini digunakan untuk sidik jari Kolom Kolom dapat dibuat dari berbagai jenis material,seperti stainless steel, aluminium, tembaga, gelas dan paduan silika. Sebagian besar sistem kolom modern terbuat dari gelas atau paduan silika. Kolom konvensional dibuat dari material pendukung yang dilapisi fase diam dari berbagai pembebanan yang dikemas di dalam kolom. Kolom kapiler terdiri dari tabung kapiler panjang yang didalamnya dilapisi dengan fase diam fase diam dapat juga direkatkan langsung pada permukaan silika. Sebagian besar kolom kapiler terbuat dari paduan silika yang dilapisi polimer di bagian luarnya. Paduan silika sangat mudah pecah sedangkan lapisan polimer tersebut bertindak sebagai pelindungnya. 199 Tipe Kolom dan Pengoperasian Kolom Kolom dimana pemisahan terjadi, memiliki dua tipe dasar yaitu Kolom kemasan konvensional dan Kolom kapiler atau Kolom tabung terbuka. Kolom dapat dioperasikan dengan dua cara , yaitu : secara isotermal temperatur konstan dan temperatur terprogram variabel peningkatan temperatur dan waktu ditahan pada temperatur konstan.

a. Operasi Isotermal

Pada operasi isotermal, temperatur kolom dijaga konstan. Batas temperatur maksimum dan minimum dipengaruhi stabilitas dan karakter fisik fase diam. Batas bawah ditentukan oleh titik beku dan batas atas ditentukan oleh “bleed” dari fase diam. Bleed adalah fase diam masuk ke detektor. Secara umum pada mode operasional ini, injektor dioperasikan 30 o C diatas temperatur komponen dengan titik didih maksimum kolom kemasan konvensional.

b. Operasi temperatur terprogram TPGC

Pada kromatografi gas temperatur terprogram, temperatur oven dikendalikan oleh sebuah program yang dapat mengubah tingkatan pemanasan yang terjadi antara 0,25 o C sampai 20 o C. Sebuah oven massa rendah mengijinkan pendinginan dan pemanasan cepat dari kolom yang dapat ditahan sampai 1 o C dari temperatur yang diperlukan. Pada operasi temperatur terprogram diperlukan pengendali aliran untuk memastikan kesetabilan aliran gas. Kestabilan aliran sangat diperlukan untuk mencapai stabilitas hasil detektor yang baik yang ditunjukan pada garisbawahbaseline datar yang stabil. Fase diam harus stabil secara termal melewati range temperatur yang lebar. Bleed dapat diganti dengan menjalankan dua kolom yang identik secara tandem, satu untuk pemisahan komponen dan yang lain untuk melawan “bleed”. 200 Detektor Untuk mendeteksi komponen yang terpisah dari kolom , diperlukan alat pendeteksi. Pada kolom kapiler penambahan gas make up gas digunakan untuk menghilangkan komponen yang terpisah dari bagian akhir kolom ke dalam detektor untuk mengurangi efek “dead volume” dan kecepatan aliran yang rendah. Sebuah detektor yang ideal seharusnya: a. Mempunyai sensitifitas yang tinggi untuk mengenali unsur dalam bentuk gas. 1 volume terlarut : 1000 volume pelarut b. Mempunyai respon yang linear terhadap jumlah unsur dengan cakupan yang luas. c. Tidak bergantung pada kondisi operasi, seperti : kecepatan alir. d. Mempunyai stabilitas baseline yang baik. e. Mudah perawatannya f. Mempunyai volume internal yang kecil resolusi puncak g. Mempunyai respon yang cepat untuk menghindari gugusan puncak h. Murah dan dapat dipercaya. Ada dua tipe detektor, yaitu detektor integral dan differensial.. Sebagian besar kromatografi gas dikerjakan dengan menggunakan analisis elusi dengan memanfaatkan detektor differensial, yang menghasikan deretan puncak yang terpisah. Detektor differensial banyak digunakan dalam kromatografi. Respon terhadap konsentrasi bahanlarutan dalam fase bergerak ditampilkan dalam sekejap. Respon detektor yang ditampilkan secara grafik adalah kromatogram diferensial

18.4.2. PEMILIHAN FASE GERAK

Gas Pembawa sebagai fase gerak akan membawa komponen sampel melalui kolom menuju detektor. Gas pembawa harus inert, kering dan murni. Pemilihan gas pembawa ini tergantung