3.4 Pembuatan Larutan Getah Pepaya
Sebanyak 600 g getah buah pepaya dimasukkan ke dalam wadah yang sesuai, kemudian encerkan getah buah pepaya dengan aquades sampai 10 L
tambahkan 15 gram sabun colek kedalam larutan, cukupkan dengan aquades hingga volume 15 L. Larutan tersebut diamkan selama 24 jam lalu saring, Didapat
larutan getah buah pepaya 15 L larutan stock 40000 ppm Utami, 2008.
3.5 Pengujian Efek Toksisitas
Pengujian efek toksisitas meliputi penyiapan hewan percobaan, penyiapan larutan getah buah pepaya, percobaan pendahuluan, pengujian toksisitas LC
50
pada ikan nila, pengamatan meliputi gejala toksisitas dan kematian hewan Rudiyanti, 2010.
3.5.1 Uji Pendahuluan
Pada tahap pendahuluan ini bertujuan untuk mencari kisaran konsentrasi kritis bahan uji yang akan digunakan untuk uji toksisitas LC
50
. Hewan uji sebanyak 6 kelompok. Setiap kelompok terdiri dari 10 ekor ikan dan dimasukkan
ke dalam akuarium yang berisi 15 L air dengan konsentrasi bahan uji adalah 0 ppm kontrol, 1 ppm, 10 ppm, 100 ppm, 1000 ppm, dan 10000 ppm. Selama
percobaan berlangsung hewan uji diberi makan. Pengamatan dilakukan selama 7 hari dengan 2 kali pengulangan. Hewan uji yang mati pada waktu pengamatan
segera dikeluarkan dari media uji untuk menghindari kemungkinan perubahan kualitas air yang bukan disebabkan oleh bahan uji. Amati pula tingkah laku hewan
uji dalam wadah yang diberi perlakuan Rumampuk, dkk., 2010.
Tabel 3.1 Konsentrasi Uji Pendahuluan Kelompok
Jumlah Ikan Konsentrasi ppm
Kontrol 10
1 10
1 2
10 10
3 10
100 4
10 1000
5 10
10000 Keterangan :
a. kelompok kontrol diberi air 0 ppm b. kelompok 1 akuarium yang diberikan konsentrasi GBP 1 ppm
c. kelompok 2 akuarium yang diberikan konsentrasi GBP 10 ppm d. kelompok 3 akuarium yang diberikan konsentrasi GBP 100 ppm
e. kelompok 4 akuarium yang diberikan konsentrasi GBP 1000 ppm f. kelompok 5 akuarium yang diberikan konsentrasi GBP 10000 ppm
Setelah diberikan bahan uji kemudian diamati gejala toksisitas dan dilihat jumlah kematian hewan yang terjadi. Kemudian ditentukan dosis yang akan
digunakan sebagai acuan untuk melakukan uji toksisitas LC
50
. 3.5.2
Penentuan Nilai LC
50
Setelah tujuh konsentrasi getah buah pepaya diketahui, maka dipilih tujuh konsentrasi yang berbeda, yaitu : 0 ppm, 4 ppm, 20 ppm, 100 ppm, 500 ppm, 2500
ppm, dan 12500 ppm. Ketujuh konsentrasi tersebut selanjutnya digunakan dalam penentuan LC
50
Dinnel, 1994. Hewan uji sebanyak 10 individu dimasukkan ke dalam setiap wadah
percobaan 7 wadah uji yang berisi 15 L air dan bahan uji dengan konsentrasi yang telah ditentukan, setiap perlakuan dilakukan tiga kali ulangan.
Selama percobaan berlangsung hewan uji diberi makan. Pengamatan dilakukan pada hari ke-1 sampai hari ke-7 dan yang mati dicatat. Hewan uji
diamati pada tiap konsentrasi dan dihitung secara kumulatif dalam tiap hari.
Tabel 3.2 Konsentrasi Penentuan LC
50
Kelompok Jumlah Ikan
Konsentrasi ppm 1
10 2
10 4
3 10
20 4
10 100
5 10
500 6
10 2500
7 10
12500 Keterangan :
a. kelompok 1 akuarium yang diberi konsentrasi 0 ppm b. kelompok 2 akuarium yang diberi konsentrasi GBP 4 ppm
c. kelompok 3 akuarium yang diberi konsentrasi GBP 20 ppm d. kelompok 4 akuarium yang diberi konsentrasi GBP 100 ppm
e. kelompok 5 akuarium yang diberi konsentrasi GBP 500 ppm f. kelompok 6 akuarium yang diberi konsentrasi GBP 2500 ppm
g. kelompok 7 akuarium yang diberi konsentrasi GBP 12500 ppm 3.6
Pengamatan
Pengamatan terhadap hewan uji dilakukan selama 7 hari dengan pengulangan sebanyak 3 kali, pengamatan yang dilakukan berupa gejala toksisitas
dan kematian hewan uji.
3.6.1 Gejala Toksisitas
Kategori