21
3.2. Prosedur Penelitian
3.2.1. Pengambilan Sampel
Sampel berupa kulit buah sukun dan buah jambu biji diperoleh dari 1 lokasi yaitu Simpang Bupati, Stabat . Tanaman Sukun dengan spesies Artocarpus communis dan
Tanaman Jambu Biji dengan spesies Psidium guajava L.
3.2.2. Pembuatan Larutan
3.2.2.1.Pembuatan H
2
SO
4
1,25 N
Di masukkan 8,5 ml H
2
SO
4P
dalam labu takar 250 ml kemudian diencerkan dengan akuades sampai garis tanda.
3.2.2.2.Pembuatan NaOH 1,25 N
Dilarutkan 12,5 g NaOH dengan akuades kemudian dimasukkan kedalam labu takar 250 ml dan diencerkan garis tanda.
3.2.2.3.Pembuatan Larutan NaOH 3
Dilarutkan 3 g NaOH dengan akuades kemudian dimasukkan kedalam labu takar 100 ml dan diencerkan sampai garis tanda.
3.2.2.4.Pembuatan Larutan HCl 30
Dimasukkan 203 ml HCl 37 dalam labu takar 250 ml kemudian diencerkan dengan akuades sampai garis tanda.
3.2.2.5.Pembuatan pereaksi Benedict
Dengan bantuan pemanasan, dilarutkan 173 g Na-sitrat dan 100 g Na
2
CO
3
dalam 800 ml air . Disaring lalu ditambahkan aquades sampai volume larutan 850 ml
Larutan I.Dilarutkan 17,3 g CuSO
4
.5H
2
O dalam 100 ml air dipanaskan bila perlu . Bila larutan diatas sudah dingin maka dengan perlahan – lahan ditambahkan kedalam
larutan I . Kemudian ditambahkan dengan akuades sampai 1 liter.
Universitas Sumatera Utara
22
3.2.2.6.Larutan Glukosa 20 mg100 ml
Sebanyak 20 mg glukosa anhidrat dilarutkan dengan akuades dalam labu takar 100 ml sampai garis tanda dan dikocok sampai homogen.
3.2.2.7.Larutan pereaksi Nelson
Nelson A :
Dilarutkan12,50000 g Natrium karbonat anhidrat, 12,5000 g garam Rochelle K-Na- Tartrat, 10 g Natrium Bikarbonat dan 100 g Natrium Sulfat anhidrat dalam 300 ml
akuades dan diencerkan sampai 500 ml.
Nelson B :
Dilarutkan 7,5000 g CuSO
4.
5H
2
O dalam 50 ml akuades dan ditambahkan 1 tetes asam sulfat pekat.
Pereaksi Nelson dibuat dengan cara mencampur 25 bagian larutan Nelson A dan I bagian Nelson B. Pencampuran dilakukan setiap kali akan digunakan.
3.2.2.8.Larutan Arsenomolibdat
Dilarutkan 25 g ammonium molibdat dalam 450 ml aquades dan ditambahkan 25 ml H
2
SO
4
p .Dilarutkan pada tenpat yang lain 3 g Na
2
HAsO
4.
7H
2
O dalam 25 ml akuades kemudian dituangkan larutan ini kedalam larutan yang pertama.
Disimpan dalam botol, berwarna coklat dan diinkubasi pada suhu 37
o
C selama 24 jam. Larutan pereaksi ini dapat digunakan setelah masa inkubasi dan berwarna kuning.
Universitas Sumatera Utara
23
3.2.3.Cara Kerja
3.2.3.1.Isolasi selulosa dan Penentuan Kadar Selulosa dari Kulit Buah Sukun
Sebanyak 100 g kulit buah sukun dikeringkan pada suhu 80 C. Kulit buah sukun yang
telah kering kemudian dihaluskan. Kulit buah sukun yang telah halus kemudian ditimbang. Setelah itu ditambahkan 500 ml etanol. Lalu, ditambahkan 500 ml H
2
SO
4
1,25 N direfluks selama 30 menit lalu disaring. Residu dicuci dengan akuades panas sampai pH netral. Residu ditambahkan 500 ml NaOH 1.25 N dan direfluks selama 30
menit. Residu dicuci dengan akuades panas sampai pH netral. Dikeringkan dioven pada suhu 110
C selama 1 jam. Diambil 5 g selulosa kering kemudian diabukan dalam tanur pada suhu 600
C selama 3 jam lalu ditimbang.
3.2.3.2. Hidrolisis kulit sukun ● Ditimbang 5 g selulosa dimasukkan kedalam labu erlenmeyer kemudian ditambah 4
ml HCl 30 ,didiamkan di penangas air selama 30 menit. ● Lalu ditambahkan 200 ml akuades dan dipanaskan di atas api selama 1 jam lalu
didinginkan. ● Ditambah NaOH 3 hingga pH netral lalu di saring. Sebanyak 1 ml filtrat
dimasukkan kedalam tabung reaksi kemudian ditambahkan 5 ml larutan benedict dan dipanaskan sampai terbentuk endapan merah bata.
3.2.3.3. Pengukuran Panjang Gelombang Maksimum Larutan Glukosa Standar. ● Ditimbang 20 mg glukosa standar dan dilarutkan dengan akuades sampai volume
100 ml larutan glukosa 0,2 mgml. Dipipet 25 ml larutan lalu diencerkan dengan akuades sampai volume 100 ml larutan glukosa 0,05 mgml.
● Dipipet 1 ml larutan glukosa 0,05 mgml kedalam tabung reaksi, lalu ditambahkan 1 ml pereaksi Nelson lalu ditutup dengan kapas dan dipanaskan pada waterbath
sampai mendidih selama 30 menit lalu didinginkan.
Universitas Sumatera Utara
24 ● Lalu di tambahkan 1 ml larutan arsenomolibdat lalu dikocok hingga semua endapan
larut. Ditambahkan 7 ml akuades lalu dikocok hingga homogen. ● Diukur serapan panjang gelombang pada 400 – 800 nm. diperoleh panjang
gelombang maksimum.
3.2.3.5.Penyiapan Kurva Standar Glukosa ● Disiapkan larutan glukosa standar dalam beberapa tabung reaksi dengan konsentrasi
bertingkat dari 0,010 – 0,050 mgml. ● Ditambahkan 1 ml larutan Nelson kemudian dipanaskan hingga mendidih selama
30 menit dan didinginkan. ● Ditambahkan 1 ml larutan arsenomolibdat lalu dikocok. Ditambahkan 7 ml akuades
lalu dikocok hingga homogen. ● Diukur serapannya pada panjang gelombang 761 nm.
● Dibuat kurva standar yang menunjukkan hubungan antara konsentrasi gula standar
dan absorbansi.
3.2.3.6.Analisa Kandungan Glukosa Sampel ● Dipipet 1 ml filtrat hasil hidrolisa kulit buah sukun lalu diencerkan dalam labu ukur
50 ml dan diambil 1 ml untuk dianalisa. Ditambahkan 1 ml larutan Nelson kemudian dipanaskan hingga mendidih selama 30 menit dan didinginkan.
● Ditambahkan 1 ml larutan arsenomolibdat lalu dikocok. Ditambahkan 7 ml akuades lalu dikocok hingga homogen.
● Diukur serapannya pada panjang gelombang 761 nm sehingga dapat dihitung kadar gula reduksinya.
3.2.3.7.Pembuatan Manisan Jambu Biji ● Buah jambu biji ,setelah disortasi dicuci hingga bersih , lalu kulitnya di kupas.
● Potong buah jambu biji sesuai selera. ● Rendam potongan buah dalam larutan kapur 10 selama 1 jam
Universitas Sumatera Utara
25 ● Tiriskan dan cuci dengan air dingin yang mengalir
● Setelah ditiriskan , buah direndam dalam larutan gula yang terlebih dahulu direbus
dengan berbagai konsentrasi gula yang berbeda 1:0 , 1:1 , 1:2 , 1:3
3.2.3.8.Penentuan Nilai Organoleptik
Uji ini meliputi warna, rasa, bau dan tekstur yang ditentukan dengan uji kesukaan oleh 15 orang panelis, dimana para panelis bukan perokok dan sebelum mencicipinya
diharuskan minum air putih terlebih dahulu. Uji ini ditentukan dengan skala hedonik, sebagai berikut:
Uji Kesukaan Skala hedonik Skala Numerik
Amat sangat suka 5
Sangat suka 4
Suka 3
Kurang suka 2
Tidak suka 1
Universitas Sumatera Utara
26
3.3. Bagan Penelitian 3.3.1. Isolasi Selulosa dan Penentuan Kadar Selulosa dari Kulit Buah Sukun
Kategori