Karakterisasi Simplisia dan Skrining Fitokimia Serta Uji Efek Antiinflamasi Ekstrak Etanol Daun Sembukan (Paederia foetida L) Terhadap Tikus Putih Jantan

Lampiran 3. Gambar Tumbuhan Daun Sembukan

Lampiran 4.Simplisiadan Serbuk Simplisia DaunSembukan

Lampiran 5. Hasil Mikroskopik Daun Sembukan

Gambar Mikroskopik daun segar dan simplisia daun sembukan perbesaran 10 x 40

Keterangan:

1. Rambutpenutupbentukbintang 2. Stomata tipeparasitik

3. Kristal kalsiumoksalatbentukjarum

1

2

Lampiran 6. Perhitungan Hasil Karakteristik Simplisia Daun Sembukan 1. PerhitunganPenetapan Kadar Air Simplisia

a. Sampel 1

Beratsampel = 5,022 g

Volume air = 0,2 mL

Kadar air = 0,2

5,022x100%

= 3,89 % b. Sampel 2

Beratsampel = 5,001 g

Volume air = 0,3 mL

Kadar air = 0,3

5,001x100%

= 5,79 % c. Sampel 3

Beratsampel = 5,004 g

Volume air = 0,25mL

Kadar air = 0,25

5,004x100%

= 4,98%

Kadar air rata – rata = 3,89%+5,79%+4,98%

3

= 4,98%

2. Perhitungan Penetapan Kadar Sari Larut dalam Air Kadar air =volume air (mL)

berat sampel (g)

x

100%

Kadar sari larut air

=

berat sari

berat simplisia

x

100

Lampiran 6. (lanjutan) 2. Kadar sari larut air II

Berat sampel = 5,018g

Berat sari = 0,111 g

Kadar sari larut air = 0.111

5,018 x 100

20

x

100% = 11,06%

3. Kadar sari larutair III

Berat sampel = 5,021 g

Berat sari = 0,122 g

Kadar sari larut air = 0,122

5,012 x 100

20

x 100% = 12,17%

Kadar sarilarut air rata-rata=13,28% +11,06%+12,17%

3 = 12,17 %

3. PerhitunganPenetapan Kadar Sari LarutdalamEtanol

a. Kadar sari yang larut dalam etanol I

Berat sampel = 5,002 g

Berat sari = 0,357 g

Kadar sari yang larutdalametanol = 0,57

5,002 x 100

20 x 100%

= 35,68% b. Kadar sari yang larutdalametanol II

Berat sampel = 5,010 g

Berat sari = 0,435 g

Kadar sariyang larutdalametanol = 0,435

5,010x 100

20 x 100%

= 43,41 % Kadar sari larut etanol

=

berat sari

berat simplisia

x

100

Lampiran 6. (lanjutan)

c. Kadar sari larut dalam etanol III

Beratsampel = 5,008 g

Berat sari = 0,374 g

Kadar sari yang larutdalametanol = 0,374

5,008x 100

20x 100%

= 37,34 % Kadar sari yang larutdalametanol rata – rata = 35,68%+43,41%+37,34%

3 = 38,81%

4. PerhitunganPenetapan Kadar Abu Total

a. Sampel I

Berat sampel = 2,001 g

Berat abu = 0,194 g

Kadar abu = 0,194 g

2,001 gx 100% = 9,69 %

b. Sampel II

Berat sampel = 2,005 g

Berat abu = 0,149 g

Kadar abu = 0,149 g

2,005 gx 100% = 7,43 %

c. Sampel II

Kadar abu total = berat abu

Lampiran 6. (lanjutan)

Kadar abu total rata-rata = ����� ���� (������ �+������ ��+������ ���)

3

= 9,69 %+7,43 %+4,74 %

3 = 7,28 %

5. Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Asam

a. Sampel I

Berat sampel = 2,001 g

Berat abu = 0,004 g

Kadar abu = 0,004 g

2,001 g x 100% = 0,19 %

b. Sampel II

Berat sampel = 2,005 g

Berat abu = 0,010 g

Kadar abu = 0,010 g

2,005 gx 100% = 0,49 %

c. Sampel III

Berat sampel = 2,004 g

Berat abu = 0,006 g

Kadar abu = 0,006 g

2,004 gx 100% = 0,29 %

Kadar abu total rata-rata = ����� ���� (������ �+������ ��+������ ���)

3

Kadar abu tida klarut asam rata-rata=0,19 % + 0,49 % + 0,29 %

3 = 0,32%

Kadar abutidaklarutasam = Berat abu

Lampiran 7.Bagan Alur Uji Pendahuluan

Dibersihkan dari pengotor Dicuci dibawah air mengalir hinggabersih, tiriskan Ditimbang berat basah Dikeringkandalamlemari pengering

Ditimbangberatnya Dihaluskanmenjadiserbuk dengan blender

Ditimbangserbuknya Daun Sembukan segar

Simplisia Daun Sembukan

Serbuk Simplisia

Karakterisasi Simplisia Skrining Fitokimia

Pemeriksaan makroskopik, mikroskopik dan penetapan :

1. Kadar air

2. Kadar sari larut air

Pemeriksaan : 1. Glikosida 2. Saponin

Lampiran 8.Bagan Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Sembukan

Dimasukkan kedalam sebuah bejana

Ditambahkan pelarut etanol 96% sebanyak 75 bagian

Direndam selama 5 hari terlindung dari cahaya, sambal sering diaduk

Disaring dengan kertas saring

Dicuci ampas dengan etanol 96 %

Disaring dengan kertas saring hingga diperoleh 100 bagian

Dipindahkan kedalam bejana tertutup

Dibiarkan ditempat sejuk dan terlindung dari Cahaya selama 2 hari

Dienap tuangkan atau saring

Dipekatkan dengan rotary evaporator pada suhu 400 C dan dikeringkan dengan hairdryer

Maserat I Ampas

Serbuk simplisia Daun sembukan

Ekstrak kental

Maserat II

Lampiran 9. Bagan Kerja Antiinflamasi

Dipuasakanselama ± 18 jam,tetap diberiminum

Dibagilimakelompokdanmasing-masingdiberiperlakuansecaraperoral

30 menitkemudianmasing-masing kaki tikusdarisetiapkelompokdiinduksidengan 0,1 ml karagenan 1% secara intraplantar Diukur volume kaki

tikusdenganmencelupkan kaki tikussampaibatas yang

yangtelahditandaipadamata kaki kedalamalatpletismometer

Diukurpenambahan volume kaki tikusdengancara yang

samapadapengukuran kaki tikusmula-mula

HewanUji (tikus)

D II

Volume telapak kaki tikusmula-mula D I

D II : dosis 400 mg/kg bb D III : dosis 500 mg/kg bb

Lampiran 10. Alat Pletismometer

Lampiran 12. Telapak Kaki Tikus

Gambar Kaki tikus sebelum diinduksi λ-karagenan

Lampiran 13. Contoh Perhitungan Dosis

Tabel. Konversi Dosis Antara Jenis Hewan Dengan Manusia (Suhardjono, 1995) Mencit 20 g Tikus 200 g Marmot 400 g Kelinci 1,5 kg Kera 4 kg Anjing 12 kg Manusia 70 kg Mencit

20 kg 1,0 7,0 12,25 27,8 64,1 124,3 387,9

Tikus

200 g 0,14 1,0 1,74 3,0 9,2 17,8 56,0

Marmot

400 g 0,008 0,57 1,0 2,25 5,2 10,2 31,5

Kelinci

1,5 kg 0,04 0,25 0,44 1,0 2,4 4,5 14,2

Kera 4

kg 0,016 0,11 0,19 0,42 1,0 1,9 6,1

Anjing

12 kg 0,008 0,06 0,10 0,22 0,52 1,0 3,1

Manusi

a 70 kg 0,0026 0,018 0,031 0,07 0,16 0,32 1,0

1. PerhitunganDosisEkstrakEtanolDaunSembukan

- Dosis suspense ekstraketanol daun sembukan yang akandibuatadalah 300

mg/kg bb, 400 mg/kg bb dan 500 mg/kg bb. Berartidosis 300 mg, 400 mg dan

500 mg tersebutdiberikanuntukhewandengan 1 kg beratbadan. Karena 1

100 x 1 kg = 1

100 x 1000 g = 10 mL. Maka tiap dosis dilarutkan dalam 10,0 ml suspensi Na-CMC.

- Volume suspensi ekstrak etanol daun sembukan yang diberikan kepada tikus adalah Volume pemberian 1% dari bb tikus

- Dosis maksimum untuk manusia dewasa = 25 – 50 mg

- Konversi dosis manusia (70 kg) kedosis hewan uji tikus dikali 0,018

Pemberianlarutannatriumdiklofenak

Konversidosisuntuktikus = 50 mg x 0,018 = 0,90 mg

Maka dosis natrium diklofenak yang digunakan adalah 0,90 mg untuk tikus 200 g, sehingga dosis dalam mg/kg bb adalah :

0,90 mg

200 g =

x 1 kg

x = 0,90 mg

200 g x 1000 g

x = 4,5 mg/kg bb - Volume pemberian 1% dari bb tikus

Misal bb tikus = 200 g

Maka volume suspense natrium diklofenak yang diberikan 1

Lampiran 14.Contoh Perhitungan Persen Radang dan Persen Inhibisi Radang 1. Persen Radang

dimana: Vt = volume radang setelah waktu t Vo = volume awal kaki tikus

Misalnya: Ekstrak daun sembukan dosis 300 mg/kg bb pada menit ke-30 Diketahui : Vt = 04,59

Vo = 03,52

Persen Radang (%R)

=

04,59 - 03,52

03,52

x

100 = 30,39 % 2. Persen Inhibisi Radang

Dimana : a = Persen radang rata-rata kelompok kontrol

b = Persen radang rata-rata kelompok perlakuan yang mendapat bahan uji atau obat pembanding

Misalnya, diketahui a = 54,20 %, b = 20,60 %

Persen Inhibisi Radang (%IR)

=

54,20 - 20,60

20,60

x

100% = 61,48 %

Persen Radang (%R)

=

Vt-Vo

Vo

x

100%

Persen Inhibisi Radang (%IR)

=

a-b

Lampiran 15.Tabel Data Penelitian

Jumlah Hewan

Uji

Perlakuan

Volume Telapak Kaki Tikus Vo Menit

ke-30 Menit ke-60 Menit ke-90 Menit ke-120 Menit ke-150 Menit ke-180 Menit ke-210 Menit ke-240 Menit ke-270 Menit ke-300 Menit ke-330 Menit ke-360 1

CMC 0,5 %

03.33 04.47 04.78 04.93 05.01 05.12 05.21 05.36 05.27 05.44 05.56 05.36 05.49 2 02.81 03.71 03.99 04.10 04.21 04.27 04.38 04.48 04.59 04.37 04.35 04.29 04.20 3 03.40 04.49 04.76 04.85 04.89 04.90 04.96 04.88 05.01 05.10 05.15 04.95 04.79 4 03.74 04.65 05.07 05.12 05.18 05.22 05.36 05.44 05.54 05.36 05.49 05.47 05.28 5 03.21 04.51 04.65 04.67 04.73 04.86 04.95 05.09 05.02 05.17 04.95 05.00 05.05 1

Na. Diklofenak

03.05 03.42 03.45 03.65 03.91 04.00 03.93 03.67 03.67 03.50 03.42 03.31 03.25 2 02.87 03.28 03.40 03.50 03.64 03.71 03.70 03.69 03.65 03.55 03.47 03.23 03.08 3 03.01 03.38 03.48 03.64 03.59 03.75 03.74 03.60 03.55 03.49 03.36 03.25 03.18 4 03.22 03.42 03.53 03.77 04.24 04.25 03.98 04.03 03.90 04.81 03.74 03.61 03.41 5 03.36 03.69 03.87 03.89 04.16 04.41 04.37 04.25 04.21 04.11 03.90 03.73 03.57 1

EEDS 300 mg/kg BB

03.52 04.59 04.67 04.75 04.82 04.87 04.79 04.89 04.99 05.10 04.93 04.80 04.68 2 03.20 04.16 04.30 04.40 04.51 04.60 04.57 05.69 04.80 04.96 04.86 04.72 04.62 3 03.11 04.07 04.16 04.20 04.31 04.40 04.37 04.50 04.68 04.84 04.62 04.52 04.42 4 03.55 04.48 04.56 04.66 04.79 04.85 04.77 04.86 04.99 05.07 04.97 04.79 04.63 5 02.92 03.71 03.89 03.99 04.10 04.28 04.25 04.40 04.57 04.69 04.52 04.45 04.37 1

EEDS 400 mg/kg BB

04.10 04.67 04.88 04.91 04.87 04.91 04.79 04.82 05.00 05.10 04.90 04.78 04.65 2 03.99 04.62 04.68 04.78 04.82 04.85 04.72 04.82 05.15 05.20 04.85 04.69 04.50 3 03.30 04.07 04.15 04.23 04.31 04.35 04.37 04.54 04.74 04.80 04.52 04.30 04.10 4 03.07 03.57 03.74 03.84 03.95 04.00 04.08 04.27 04.55 04.60 04.38 04.25 04.05 5 03.32 03.92 03.82 03.99 04.20 04.30 04.27 04.42 04.58 04.67 04.52 04.32 04.10

Lampiran 15. (lanjutan)

1

EEDS 500 mg/kg BB

03.27 03.71 03.83 03.90 03.99 04.25 04.28 04.19 04.18 04.10 04.10 04.00 03.90 2 _{02.89 03.34 03.45 03.56 03.66 03.79 03.80 03.72 03.65 03.51 03.51 03.40 03.34} 3 _{03.93 04.35 04.51 04.68 04.80 04.90 04.92 04.80 04.75 04.70 04.70 04.52 04.46} 4 _{03.60 04.10 04.26 04.46 04.68 04.79 04.78 04.60 04.62 04.51 04.51 04.37 04.15} 5 _{03.98 04.45 04.67 04.80 05.01 05.17 05.20 05.10 05.02 04.80 04.80 04.70 04.63}

Lampiran 16. Tabel Data Persen Radang Jumlah Hewan Uji Perlakuan % Radang Menit ke-30 Menit ke-60 Menit ke-90 Menit ke-120 Menit ke-150 Menit ke-180 Menit ke-210 Menit ke-240 Menit ke-270 Menit ke-300 Menit ke-330 Menit ke-360 1

CMC 0,5 %

34.23 43.54 48.05 50.45 53.75 56.45 60.96 58.25 63.36 66.96 60.96 64.86

2 _{32.02 41.99 45.90 49.82 51.95 53.38 59.43 63.34 55.51 54.80 52.66 49.46}

3 _{32.05 40.00 42.64 43.82 44.11 45.88 43.52 47.35 50.00 51.74 45.58 40.88}

4 _{24.33 35.56 36.89 38.50 39.57 43.31 45.45 48.12 43.31 46.79 46.25 41.17}

5 _{40.49 44.85 45.48 47.35 51.40 54.20 58.56 56.38 61.05 54.20 55.76 57.32}

Rata – rata 32.62 41.18 43.79 45.98 48.15 50.64 53.58 54.68 54.64 54.89 52.42 50.74 SD _{± 02.78 ± 03.62 ± 04.31 ± 04.92 ± 06.04 ± 05.72 ± 08.37 ± 06.84 ± 08.24 ± 08.74 ± 07.77 ± 10.40} 1

Na. Diklofenak

12.13 13.11 19.67 28.19 31.14 28.85 20.32 20.32 14.75 12.13 09.96 06.55

2 _{14.28 18.46 21.95 26.13 29.26 28.91 28.57 27.17 23.93 20.90 12.54 07.31}

3 _{12.92 15.61 20.93 19.26 24.58 22.92 19.60 17.94 15.94 11.62 07.97 05.64}

4 _{6.21 9.62 17.08 31.67 31.98 23.60 25.15 21.11 18.32 16.14 12.11 5.90}

5 _{9.82 15.17 15.77 23.80 31.25 30.05 25.48 25.29 22.32 16.14 11.01 06.25}

Rata – rata 10.72 14.39 18.74 25.81 29.64 26.86 23.82 23.36 19.05 14.36 10.71 06.33 SD _{± 03.16 ± 03.28 ± 04.66 ± 04.35 ± 03.02 ± 03.53 ± 03.40 ± 04.21 ± 02.41 ± 02.41 ± 02.40 ± 01.43} 1

EEDS 300 mg/kg BB

30.39 32.67 34.94 36.93 38.35 36.07 38.92 41.76 44.88 40.05 36.36 32.92

2 _30.00 34.37 _{37.50 40.93} 43.75 _{42.81 46.56 50.00 55.00 51.87 47.50 44.37}

3 _30.86 33.76 _{35.04 38.58} 41.47 _{39.87 44.69 50.48 55.62 48.55 45.33 42.12}

4 26.19 28.45 _{31.26 34.92} 36.61 _{34.36 36.90 40.56 42.81 40.00 34.92 30.42}

5 _27.05 33.21 _36.64 40.41 46.55 _{45.54 50.68 56.50 60.27 54.79 52.39 49.65}

Rata – rata _{28.89 32.56 35.07 38.35 41.35 39.24 43.55 47.86 51.71 47.05 43.30 39.90} SD ± 02.12 ± 02.34 ± 02.39 ± 02.23 ± 02.61 ± 03.49 ± 04.08 ± 04.63 ± 03.59 ± 05.60 ± 06.06 ± 08.03

Lampiran 16. (lanjutan)

1

EEDS 400 mg/kg BB

13.90 19.02 18.78 17.56 19.51 21.46 21.95 24.39 19.51 17.07 16.58 13.41

2 _{15.78 17.29 20.80 20.80 21.55 26.31 29.07 30.22 21.55 19.04 17.57 12.78}

3 _{23.33 25.75 30.60 37.57 36.96 40.60 43.63 45.45 36.96 33.93 30.30 24.24}

4 _{16.28 21.82 28.66 39.08 42.67 44.95 48.20 49.83 42.67 38.43 38.43 31.92}

5 _{18.07 15.06 26.50 33.13 36.14 37.05 37.95 40.66 36.14 32.52 30.12 23.49}

Rata – rata 17.57 19.78 25.06 29.62 31.36 34.07 36.16 38.13 31.36 28.20 26.60 21.11 SD _{± 03.59 ± 04.14 ± 04.51 ± 04.80 ± 06.93 ± 07.73 ± 09.85 ± 09.86 ± 09.53 ± 10.23 ± 26.60 ± 21.16} 1

EEDS 500 mg/kg BB

13.45 17.12 19.26 22.01 29.96 30.88 28.13 27.82 25.38 19.26 22.32 19.26

2 _{15.57 19.37 23.18 26.64 31.14 31.48 28.71 26.29 21.45 23.18 17.64 15.57}

3 _{10.68 14.79 19.08 22.13 24.68 25.19 22.13 20.86 19.59 19.08 15.01 13.48}

4 _{13.88 18.33 23.88 30.04 33.05 32.77 27.77 28.33 25.27 23.88 21.38 15.27}

5 _{11.80 17.33 20.60 25.87 29.89 30.65 28.14 24.37 20.60 20.60 18.09 16.33}

Rata – rata 13.07 17.36 21.20 25.33 29.74 30.19 26.97 25.53 22.45 21.20 18.88 15.98 SD ± 01.89 ± 01.70 ± 02.22 ± 03.37 ± 03.10 ± 02.72 ± 02.91 ± 03.03 ± 03.58 ± 02.69 ± 18.88 ± 15.98

Lampiran 17. Tabel Data Persen Inhibisi Radang

Jumlah

Hewan Uji Perlakuan

% Inhibisi Radang Menit ke-30 Menit ke-60 Menit ke-90 Menit ke-120 Menit ke-150 Menit ke-180 Menit ke-210 Menit ke-240 Menit ke-270 Menit ke-300 Menit ke-330 Menit ke-360 1 Na. Diklofenak

67.09 68.19 55.08 38.69 57.79 38.50 62.07 47.23 68.81 68.46 78.11 87.08 2 61.25 55.17 49.87 43.17 39.95 42.21 49.29 47.75 50.91 56.84 66.76 82.83 3 64.94 62.09 52.20 58.11 48.95 52.11 63.41 58.08 62.92 65.51 68.96 86.91 4 83.15 76.63 60.99 31.12 50.98 36.84 53.06 61.39 51.13 66.05 73.34 88.36 5 73.35 63.16 63.98 48.23 35.09 40.65 50.57 53.74 57.52 63.14 75.02 80.64 Rata – rata 69.95 65.04 56.42 43.86 46.55 42.06 55.68 53.63 58.25 64.00 72.43 85.16 1

EEDS 300 mg/kg BB

17.55 20.66 20.21 19.68 15.63 28.77 27.36 23.62 16.78 25.12 29.01 35.06 2 18.61 16.53 14.36 10.98 06.54 19.17 13.10 08.55 06.13 03.02 07.26 12.55 3 16.27 18.01 19.98 16.09 13.87 21.26 16.59 07.68 05.21 09.23 11.49 16.98 4 28.94 30.91 28.61 24.05 21.61 33.25 31.13 25.82 20.61 25.21 31.82 40.00 5 26.61 19.35 16.32 15.85 16.07 16.82 18.19 19.82 12.36 07.17 08.41 21.48 Rata – rata 21.60 21.09 19.89 17.33 14.74 23.85 21.27 17.09 12.12 13.95 17.59 25.21 1

EEDS 400 mg/kg BB

62.28 53.81 62.13 59.15 58.98 66.78 67.22 60.75 68.34 63.52 67.62 73.57 2 57.18 58.01 54.80 51.50 50.03 63.88 61.17 51.88 64.69 59.71 65.69 74.81 3 36.70 37.46 35.64 33.44 26.37 35.97 29.88 25.74 37.08 30.90 40.84 52.22 4 55.83 47.01 44.23 37.66 27.62 35.05 27.06 17.79 28.74 20.22 24.97 37.09 5 50.97 63.42 53.91 42.36 34.33 43.50 38.16 32.26 39.68 32.43 41.19 53.70 Rata – rata 52.59 51.94 50.14 44.82 39.46 49.04 44.70 37.68 44.70 41.36 48.06 58.28 1

EEDS 500 mg/kg BB

63.51 58.42 56.01 52.13 37.77 44.45 42.36 49.12 47.26 52.55 56.42 62.04 2 57.75 52.96 47.06 42.06 35.32 43.30 41.24 51.92 43.55 59.89 65.56 69.31 3 71.02 64.08 56.42 51.87 48.74 56.29 52.98 61.85 58.96 63.37 70.69 73.43 4 62.34 55.48 45.46 34.66 31.36 45.16 38.83 48.18 42.83 52.75 58.25 69.90 5 67.98 57.91 52.95 43.73 37.92 44.43 42.79 55.43 51.54 61.48 64.68 67.81 Rata – rata 64.52 57.77 51.58 44.89 38.26 46.72 43.64 53.30 48.83 58.01 63.12 68.50

Lampiran 18. Hasil Analisis Deskriptif Persen Radang

Descriptives

N Mean

Std. Deviation

Std. Error

95% Confidence Interval for Mean

Minimum Maximum Lower

Bound

Upper Bound 30 Menit

CMC 0,5% 5 36.8600 2.78785 1.24676 33.3984 40.3216 33.15 40.49 Na. Diklofenak 5 11.0720 3.16355 1.41478 7.1439 15.0001 6.21 14.28 EEDS 300 mg/kg BB 5 28.8980 2.12357 .94969 26.2612 31.5348 26.19 30.86 EEDS 400 mg/kg BB 5 17.4720 3.59572 1.60805 13.0073 21.9367 13.90 23.33 EEDS 500 mg/kg BB 5 13.0760 1.89574 .84780 10.7221 15.4299 10.68 15.57 Total 25 21.4756 10.38467 2.07693 17.1890 25.7622 6.21 40.49 60 Menit

CMC 0,5% 5 41.1880 3.62874 1.62282 36.6823 45.6937 35.56 44.85 Na. Diklofenak 5 14.3940 3.28074 1.46719 10.3204 18.4676 9.62 18.46 EEDS 300 mg/kg BB 5 32.4920 2.34626 1.04928 29.5787 35.4053 28.45 34.37 EEDS 400 mg/kg BB 5 19.7880 4.14904 1.85551 14.6363 24.9397 15.06 25.75 EEDS 500 mg/kg BB 5 17.3880 1.70591 .76290 15.2698 19.5062 14.79 19.37 Total 25 25.0500 10.75690 2.15138 20.6098 29.4902 9.62 44.85 90 Menit

CMC 0,5% 5 43.7920 4.31243 1.92858 38.4374 49.1466 36.89 48.05 Na. Diklofenak

5 25.8100 4.66500 2.08625 20.0176 31.6024 19.26 31.67 EEDS 300 mg/kg BB 5 35.0760

2.39288 1.07013 32.1048 38.0472 31.26 37.50 EEDS 400 mg/kg BB 5 21.8300 4.51324 2.01838 16.2261 27.4339 16.58 28.18 EEDS 500 mg/kg BB 5 21.2000 2.22041 .99300 18.4430 23.9570 19.08 23.88 Total 25 29.5416 9.50644 1.90129 25.6175 33.4657 16.58 48.05 120 Menit

CMC 0,5% 5 45.9880 4.92999 2.20476 39.8666 52.1094 38.50 50.45 Na. Diklofenak 5 25.7160 4.35602 1.94807 20.3073 31.1247 20.32 31.25 EEDS 300 mg/kg BB 5 38.0100 2.23764 1.00070 35.2316 40.7884 34.92 40.93

Lampiran 18. (lanjutan)

EEDS 400 mg/kg BB 5 29.1460 6.93810 3.10281 20.5312 37.7608 19.75 35.45 EEDS 500 mg/kg BB 5 29.7440 3.10606 1.38907 25.8873 33.6007 24.68 33.05 Total 25 35.4860 9.02234 1.80447 31.7618 39.2102 19.75 53.75 180 Menit

CMC 0,5% 5 48.8440 5.72529 2.56043 41.7351 55.9529 43.31 56.45 Na. Diklofenak 5 23.7440 3.53894 1.58266 19.3498 28.1382 19.60 27.17 EEDS 300 mg/kg BB 5 38.5580 3.49515 1.56308 34.2182 42.8978 33.80 42.12 EEDS 400 mg/kg BB 5 25.8060 7.73028 3.45709 16.2076 35.4044 16.82 32.89 EEDS 500 mg/kg BB 5 26.9760 2.72981 1.22081 23.5865 30.3655 22.13 28.71 Total 25 32.7856 10.75477 2.15095 28.3462 37.2250 16.82 56.45 210 Menit

CMC 0,5% 5 53.5840 8.37836 3.74692 43.1809 63.9871 43.52 60.96 Na. Diklofenak 5 25.3480 3.40971 1.52487 21.1143 29.5817 21.11 28.85 EEDS 300 mg/kg BB 5 42.1800 4.08390 1.82638 37.1092 47.2508 36.90 46.56 EEDS 400 mg/kg BB 5 29.6280 9.85203 4.40596 17.3951 41.8609 17.56 39.08 EEDS 500 mg/kg BB 5 30.1940 2.91582 1.30400 26.5735 33.8145 25.19 32.77 Total 25 36.1868 12.06100 2.41220 31.2083 41.1653 17.56 60.96 240 Menit

CMC 0,5% 5 54.6880 6.84457 3.06099 46.1893 63.1867 47.35 63.34 Na. Diklofenak 5 22.8060 4.21804 1.88637 17.5686 28.0434 17.04 26.82 EEDS 300 mg/kg BB 5 45.3280 4.63814 2.07424 39.5690 51.0870 40.56 50.48 EEDS 400 mg/kg BB 5 34.0740 9.86313 4.41093 21.8273 46.3207 21.46 44.95 EEDS 500 mg/kg BB 5 25.5340 3.03381 1.35676 21.7670 29.3010 20.86 28.33 Total 25 36.4860 13.51319 2.70264 30.9080 42.0640 17.04 63.34 270 Menit

CMC 0,5% 5 53.9340 8.24271 3.68625 43.6993 64.1687 43.31 63.36 Na. Diklofenak 5 19.7700 2.41574 1.08035 16.7705 22.7695 17.37 23.69 EEDS 300 mg/kg BB 5 47.3380 3.59255 1.60664 42.8773 51.7987 42.81 51.12 EEDS 400 mg/kg BB 5 28.2000 9.53962 4.26625 16.3550 40.0450 17.07 38.43 EEDS 500 mg/kg BB 5 27.5940 3.58070 1.60134 23.1480 32.0400 22.13 30.83 Total 25 35.3672 14.40123 2.88025 29.4227 41.3117 17.07 63.36 300 Menit

CMC 0,5% 5 53.4900 8.74379 3.91034 42.6332 64.3468 44.70 66.96 Na. Diklofenak 5 19.7700 2.41574 1.08035 16.7705 22.7695 17.37 23.69 EEDS 300 mg/kg BB 5 46.0240 5.60539 2.50681 39.0640 52.9840 40.00 51.87 EEDS 400 mg/kg BB 5 31.3660 10.23209 4.57593 18.6612 44.0708 19.51 42.67 EEDS 500 mg/kg BB 5 22.4580 2.69903 1.20704 19.1067 25.8093 19.59 25.38 Total 25 34.6216 14.75992 2.95198 28.5290 40.7142 17.37 66.96

Lampiran 18. (lanjutan)

330 Menit

CMC 0,5% 5 51.2240 7.77223 3.47585 41.5735 60.8745 42.64 60.96

Na. Diklofenak 5 14.4440 2.40279 1.07456 11.4605 17.4275 11.47 34.92 16.58 15.01 17.42 47.50 38.43 22.32 EEDS 300 mg/kg BB

EEDS 400 mg/kg BB EEDS 500 mg/kg BB Total

5 42.2040 6.06578 2.71270 34.6723 49.7357 5 26.6000 9.32699 4.17115 15.0190 38.1810 5 18.8880 2.96740 1.32706 15.2035 22.5725

25 30.6720 15.36488 3.07298 24.3297 37.0143 11.47 60.96 360 Menit

CMC 0,5% 5 50.7380 10.40569 4.65357 6.4122 37.8176 5.6037 63.6584 9.1643 40.88 5.90 64.86 9.12 49.65 31.92 Na. Diklofenak 5 7.3840 1.43382

EEDS 300 mg/kg BB EEDS 400 mg/kg BB

5 39.9020 8.03344 3.59266 29.9272 49.8768 30.42 5 21.1680 8.07743 3.61234 11.1385 31.1975 12.78

EEDS 500 mg/kg BB 5 15.9820 2.10968 .94348 13.3625 18.6015 13.48 19.26 Total 25 27.0348 17.47496 3.49499 19.8215 34.2481 5.90 64.86

Lampiran 19. Hasil Uji Analisis Variansi (ANOVA) One Way

ANOVA

Menit ke-30

Sum of

Squares Df

Mean

Square F Sig.

Between Groups

2432,944 4 608,236 78,35

5

,000

Within Groups

155,251 20 7,763

Total 2588,195 24

ANOVA

Menit ke-60

Sum of

Squares Df

Mean

Square F Sig.

Between Groups

2578,818 4 644,705 65,04

2

,000

Within Groups

198,242 20 9,912

Total 2777,061 24

ANOVA

Menit ke-90

Sum of

Squares Df

Mean

Square F Sig.

Between Groups

1883,397 4 470,849 32,98

0

,000

Within Groups

285,539 20 14,277

Lampiran 19. (lanjutan)

ANOVA

Menit ke-120

Sum of

Squares Df

Mean

Square F Sig.

Between Groups

1798,016 4 449,504 27,168 ,000

Within Groups

330,908 20 16,545

Total 2128,924 24

ANOVA

Menit ke-150

Sum of

Squares Df

Mean

Square F Sig.

Between Groups

1512,267 4 378,067 17,130 ,000

Within Groups

441,397 20 22,070

Total 1953,664 24

ANOVA

Menit ke-180

Sum of

Squares Df

Mean

Square F Sig.

Between Groups

2277,048 4 569,262 22,820 ,000

Within Groups

498,913 20 24,946

Lampiran 19. (lanjutan)

ANOVA

Menit ke-210

Sum of

Squares Df

Mean

Square F Sig.

Between Groups

2674,961 4 668,740 16,385 ,000

Within Groups

816,263 20 40,813

Total 3491,224 24

ANOVA

Menit ke-240

Sum of

Squares Df

Mean

Square F Sig.

Between Groups

3612,001 4 903,000 23,438 ,000

Within Groups

770,551 20 38,528

Total 4382,552 24

ANOVA

Menit ke-270

Sum of

Squares Df

Mean

Square F Sig.

Between Groups

4215,451 4 1053,863 27,659 ,000

Within Groups

762,041 20 38,102

Lampiran 19. (lanjutan)

ANOVA

Menit ke-300

Sum of

Squares Df

Mean

Square F Sig.

Between Groups

4325,767 4 1081,442 23,959 ,000

Within Groups

902,762 20 45,138

Total 5228,529 24

ANOVA

Menit ke-330

Sum of

Squares Df

Mean

Square F Sig.

Between Groups

4870,818 4 1217,704 30,631 ,000

Within Groups

795,091 20 39,755

Total 5665,909 24

ANOVA

Menit ke-360

Sum of

Squares Df

Mean

Square F Sig.

Between Groups

6350,721 4 1587,680 32,459 ,000

Within Groups

978,264 20 48,913

Lampiran 20. Hasil Uji Duncan

Menit ke-30

Duncana

Jenis Perlakuan

N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3 4

Na. Diklofenak 5 11.0720

EEDS 500 mg/kg BB

5 13.0760

EEDS 400 mg/kg BB

5 17.4720

EEDS 300 mg/kg BB

5 28.8980

CMC 0,5% 5 36.8600

Sig. ,269 1,000 1,000 1,000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

Menit ke-60

Duncana

Jenis Perlakuan

N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3 4

Na. Diklofenak 5 14.3940

EEDS 500 mg/kg BB

5 17.3880 17.3880

EEDS 400 mg/kg BB

5 19.7880

EEDS 300 mg/kg BB

5 32.4920

CMC 0,5% 5 41.1880

Sig. ,148 ,242 1,000 1,000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

Lampiran 20. (lanjutan)

Menit ke-90

Duncana

Jenis Perlakuan

N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3

EEDS 500 mg/kg BB

5 21.2000

EEDS 400 mg/kg BB

5 21.8300

Na. Diklofenak 5 25.8100

EEDS 300 mg/kg BB

5 35.0760

CMC 0,5% 5 43.7920

Sig. ,082 1,000 1,000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

Menit ke-120

Duncana

Jenis Perlakuan

N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3

EEDS 500 mg/kg BB

5 25.3380

EEDS 400 mg/kg BB

5 25.3680

Na. Diklofenak 5 25.7160

EEDS 300 mg/kg BB

Lampiran 20. (lanjutan)

Menit ke-150

Duncana

Jenis Perlakuan

N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3

EEDS 400 mg/kg BB

5 29.1460

Na. Diklofenak 5 29.3360

EEDS 500 mg/kg BB

5 29.7440

EEDS 300 mg/kg BB

5 41.0480

CMC 0,5% 5 48.1560

Sig. ,851 1,000 1,000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

Menit ke-180

Duncana

Jenis Perlakuan

N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3

Na. Diklofenak 5 23.7440

EEDS 400 mg/kg BB

5 25.8060

EEDS 500 mg/kg BB

5 26.9760

EEDS 300 mg/kg BB

5 38.5580

CMC 0,5% 5 48.8440

Sig. ,345 1,000 1,000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

Lampiran 20. (lanjutan)

Menit ke-210

Duncana

Jenis Perlakuan

N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3

Na. Diklofenak 5 25.3480

EEDS 400 mg/kg BB

5 29.6280

EEDS 500 mg/kg BB

5 30.1940

EEDS 300 mg/kg BB

5 42.1800

CMC 0,5% 5 53.5840

Sig. ,270 1,000 1,000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

Menit ke-240

Duncana

Jenis Perlakuan

N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3 4

Na. Diklofenak 5 22.8060

EEDS 500 mg/kg BB

5 25.5340

EEDS 400 mg/kg BB

5 34.0740

EEDS 300 mg/kg BB

5 45.3280

CMC 0,5% 5 54.6880

Sig. ,495 1,000 1,000 1,000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

Lampiran 20. (lanjutan)

Menit ke-270

Duncana

Jenis Perlakuan

N

Subset for alpha = 0.05

1 2

Na. Diklofenak 5 19.7700

EEDS 500 mg/kg BB

5 27.5940

EEDS 400 mg/kg BB

5 28.2000

EEDS 300 mg/kg BB

5 47.3380

CMC 0,5% 5 53.9340

Sig. ,053 ,107

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

Menit ke-300

Duncana

Jenis Perlakuan

N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3

Na. Diklofenak 5 19.7700

EEDS 500 mg/kg BB

5 22.4580

EEDS 400 mg/kg BB

5 31.3660

EEDS 300 mg/kg BB

5 46.0240

CMC 0,5% 5 53.4900

Sig. ,534 1,000 ,094

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

Lampiran 20. (lanjutan)

Menit ke-330

Duncana

Jenis Perlakuan

N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3 4

Na. Diklofenak 5 14.4440

EEDS 500 mg/kg BB

5 18.8880 18.8880

EEDS 400 mg/kg BB

5 26.6000

EEDS 300 mg/kg BB

5 42.2040

CMC 0,5% 5 51.2240

Sig. ,278 ,067 1,000 1,000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

Menit ke-360

Duncana

Jenis Perlakuan

N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3 4

Na. Diklofenak 5 7.3840

EEDS 500 mg/kg BB

5 15.9820 15.9820

EEDS 400 mg/kg BB

5 21.1680

EEDS 300 mg/kg BB

DAFTAR PUSTAKA

Abriyanto.(2012). Aktivitas Antifungi Ekstrak Etanol Daun Sembukan (Paederia foetida L).Jurnal Farmasi Indonesia: vol.09 (3).

Anief, M. (1995). Ilmu Meracik Obat, Teori Dan Praktik. Cetakan V. Yogyakarta: Gadjah Mada University Press. Halaman 107.

Carlo, D,C., Mascolo, N., dan Izzo, A.A. (1999). Flavonoid: Old and New Aspects of A Class of Natural Therapeutic Drugs. Life Sciences. 65 (4): 337-353. Depkes RI. (1979). Farmakope Indonesia. Edisi III. Departemen Kesehatan

Republik Indonesia. Halaman 33.

Depkes RI. (1986). Sediaan Galenika. Jakarta: Departemen Kesehatan RI.

Halaman 8-11.

Depkes RI. (1995).Farmakope Indonesia.Edisi IV. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 7.

Depkes RI. (1995). Materia Medika Indonesia. Jilid VI. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Halaman 297-326,300-304,306.

Depkes RI. (2000). Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta: Direktorat Jenderal Pengawas Obat dan Makanan. Halaman 10-11.

Depkes RI. (2001). Inventaris Tanaman Obat Indonesia. Jilid II. Jakarta: Departemen Kesehatan dan Kesejahteraan Sosial RI Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan. Halaman 255.

Dorlan, W.A.N. (200). Kamus Kedokteran Dorland. Edisi XXXIX. Jakarta: EGC. Halaman 68.

Farnsworth, N.R. (1966). Biologycal and Phytochemical Screening of Plants.Journal of pharmaceutical science.Volume 55. Halaman 262-264 Fitriyani, A., Winarti, L., Muslichah, S., dan Nuri.(2011). Uji Antiinflamasi

Ekstrak Metanol Daun Sirih Merah (Piper crocatum Ruiz & Pav) Pada Tikus Putih.Majalah Obat Tradisional. 16(1): 35.

Ganiswarna, S.G. (1995). Farmakologi dan Terapi. Edisi IV. Jakarta: UI Press. Halaman 208-209.

Harborne, J.B. (1987). Metode Fitokimia. Bandung: Penerbit ITB Bandung. Halaman 4-7.

Hariana, A. (2011). Tumbuhan Obat dan Khasiatnya.Cetakan Ke-4.Jakarta

Juheini, F.W., Mariana, Y., dan Rusmawan, I. (1990). Efek Antiinflamasi Jahe

(Zingiber officinale. Rosc) Terhadap Radang Buatan Pada Tikus

Putih.Majalah Farmakologi dan Terapi Indonesia. 7 (1): 9-13.

Katzung, B.G. (2006). Farmakologi Dasar dan Klinik. Jakarta: EGC. Halaman 573.

Kusumaningsih, H. (2012). Uji Efek Antiinflamasi Fraksi Etil Asetat Ekstrak Etanol Daun Sembukan pada Tikus Putih.Jurnal farmasi Indonesia.10(1), Februari 2012.Halaman 2.

Linnon, B.L. (2009). Skrining Fitokimia Dan Uji Efek Antiinflamasi Ekstrak Etanol Daun Tempuyung (Sonchus arvensis L.) Terhadap Radang Pada Tikus.Skripsi. Jurusan Farmasi. USU. Medan. Halaman 53-55.

Mangoting, D., Imang, I., dan Said A. (2005).Tanaman Lalap Berkhasiat

Obat.Jakarta: Penebar Swadaya. Halaman 21.

Mansjoer, S. (2003).Mekanisme Obat Anti Radang.Media Farmasi Indonesia. 7(1): 35-36.

Mutschler, E. (1999). Dinamika Obat: Buku Ajar Farmakologi dan Toksikologi. Penerjemah: Mathilda Widianto dan Anna Setiadi Rianti. Edisi Ke V. Cetakan Ke III. Bandung : Penerbit ITB. Halaman 194, 208.

Nugroho, A.E. (2012). Farmakologi Obat-obat Penting Dalam Pembelajaran Ilmu

Farmasi dan Dunia Kesehatan. Yogyakarta: Pustaka Pelajar. Halaman 175,

179.

Parmar dan Prakash.(2006). Sceening Methods in Pharmacology. Ahmedabab: Alpha Science International Ltd. Halaman 213-214.

Price, S.A., dan Wilson, L.M. (2006). Patofisiologi Konsep Klinis Proses-Proses

Penyakit. Editor Huriawati Hartono, Natalia Susi, Pita Wulansari, Dewi

Asih Maha Nani. Edisi Keenam. Jakarta: EGC. Halaman 57-58.

Robbins, S.L., Kumar, V., dan Cotran, R.S. (2007). Buku Ajar Patologi. Jakarta: EGC. Halaman 35-37, 50-53.

Solikin, (2007). Potensi Jenis-jenis Herba Liar di Kebun Raya Purwodadi Sebagai Obat, Proseding: Seminar Nasional Pendidikan Biologi FKIP UNS, 21 Februari 2007, Pasuruan. Halaman 4.

Soenarto.(2007). Inflamasi. Dalam: Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam. Edisi Kelima. Editor: Aru W. Sudoyo, Bambang Setiyohadi, Idrus Alwi, Marcellus Simadibrata K dan Siti Setiati. Jakarta: Interna Publishing. Halaman 2414.

Suhardjono.(1995). Percobaan Hewan Laboratorium. Yogyakarta: UGM Press. Halaman 207.

Sularkar, A.A. (2008). In-Vivo Animal Models for Evaluation of Antiinlfamatory Activity.Article Review. 6(2):7.

Tjay, H.T., dan Rahardja, K. (2013). Obat-obat Penting (Khasiat, Penggunaan

dan Efek-efek Samping).Edisi ke VI. Jakarta: Elex Media Komputindo.

Halaman 327-330.

Trubus.(2013). 100 Plus Herbal Indonesia.Volum 11. Jakarta: PT. Niaga

Swadaya. Halaman: 182.

Vogel, H. (2008). Drug Discovery and Evaluation. Third Completely Revised Update and Enlarged Edition. Heidelberg: Springer. Halaman 1103-1104. Wilmana, P.F., dan Gan, S. (2007). Analgesik-Antipiretik, Analgesik Antiinflamasi

non Steroid dan Obat Pirai. Dalam Editor: Sulistia Gan Ganiswara.

Farmakologi dan Terapi. Edisi Ke V. Jakarta: UI Press. Halaman 240. Winarno, F.G. (1990). Teknologi Pengolahan Rumput Laut. Cetakan I. Jakarta:

Pustaka Sinar Harapan. Halaman 73.

Winter, C.A., Risley, E.A., dan Nuss, G.W. (1962). Carrageenin-Induced Oedema In The Hind Paw of Rat as an Assay to Inflamatory Drugs. Proc Soc Exp

Biol Med. 111 : 544-547.

World Health Organization (WHO).(1998). Quality Control Methods For

BAB III

METODE PENELITIAN

Metode penelitian ini meliputi penyiapan daun sembukan, identifikasi daun sembukan, pembuatan simplisia, pemeriksaan karakterisasi simplisia, pemeriksaan skrining fitokimia, pembuatan ekstrak etanol daun sembukan dengan cara maserasi, penyiapan hewan percobaan dan pengujian efek antiinflamasi dengan

metode paw edem. Data hasil penelitian dianalisis dengan one way ANOVA

(Analysis of Variance) dan dilanjutkan dengan uji Duncan untuk melihat

perbedaan nyata antar peelakuan menggunakan program SPSS (Statistic Product

and Service Solution) versi 17.0. Penelitian dilkukan di Laboratorium

Farmakognosi dan Laboratorium Farmakologi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.

3.1 Alat-alat dan Bahan 3.1.1 Alat-alat

Alat-alat yang digunakan pada penelitian ini meliputi lemari pengering, blender (Panasonic), oven (Dynamica), pletismometer (Ugo Basile cat No. 7140), neraca listrik (Vibra AJ), neraca hewan (GW-1500), mikroskop (Olympus), incubator (Gallenkamp), penangas air, rotary evaporator (Stuart), spuit, oral sonde,

diklofenak, karboksilmetilsellulosa (Na-CMC), λ-karagenan, larutan fisiologis NaCl 0,9%, air suling, etanol 96%.

3.2 Penyiapan Sampel 3.2.1 Pengumpulansampel

Pengumpulan daun sembukandilakukan secara purposif yaitu tanpa membandingkan dengan tumbuhan yang sama dari daerah lain. Daun sembukan yang digunakan adalah daun sembukan yang masih segar.Daun sembukan diambil dari Dusun Cinta Makmur, Kecamatan Bilah Hulu, Kabupaten Labuhan Batu, Sumatera Utara.

3.2.2 Identifikasi sampel

Identifikasi daun sembukan dilakukan Herbarium Bogoriense Bidang Botani Pusat Penelitian Biologi-LIPI Bogor. Tumbuhan yang diidentifikasi adalah bagian daunnya. Hasil identifikasi dapat dilihat pada Lampiran 1 halaman 49.

3.2.3 Pembuatan simplisia daun sembukan

Tumbuhan yang digunakan pada penelitian ini adalah daun sembukanyang masih segar. Daun sembukan yang telah dikumpulkan dibersihkan dari pengotor, lalu dicuci dibawah air mengalir hingga bersih kemudian ditiriskan dan ditimbang. Daun sembukan dikeringkan di lemari pengering sampai daun kering (ditandai bila diremas rapuh).Simplisia yang telah kering diblender menjadi serbuk, lalu ditimbang beratnya dan di simpan dalam wadah tertutup.

3.2.4 Pembuatan ekstrak etanol daun sembukan (EEDS)

Pembuatan ekstrak dilakukan secara maserasi dengan menggunakan pelarut etanol 96%.

Menurut Farmakope Indonesia edisi III, (1979) caranya adalah sebagai berikut: Sebanyak 10 bagian (500g) serbuk simplisia dimasukkan ke dalam sebuah bejana, dituangi dengan 75 bagian (3,75 liter) cairan penyari (etanol 96%), ditutup, dibiarkan selama 5 hari terlindung dari cahaya sambil sesekali diaduk, kemudian diserkai, diperas. Ampas diremaserasi dengan cairan penyari (etanol 96%) secukupnya hingga diperoleh 5 liter (100 bagian). Pindahkan ke bejana tertutup, dibiarkan ditempat sejuk, terlindung dari cahaya selama 2 hari. Enap tuangkan atau saring. Pemekatan ekstrak dilakukan dengan alat rotary evaporatorpada suhu 400C. Bagan alur pembuatan ekstrak etanol daun sembukan dapat dilihat pada Lampiran 8 halaman 59.

3.3Pemeriksaan Karakterisasi Simplisia Daun Sembukan

Pemeriksaan karakterisasi simplisia meliputi makroskopik, mikroskopik, penetapan kadar air, penetapan kadar sari larut air, penetapan kadar sari larut etanol, penetapan kadar abu total dan penetapan kadar abu tidak larut asam.

3.3.1 Pemeriksaan makroskopik

Pemeriksaan makroskopik dilakukan dengan mengamati bentuk, ukuran, diameter dan organoleptis dari daun sembukan segar dan simplisia daun sembukan.

Pemeriksaan mikroskopik pada serbuk simplisia daun sembukan ditaburkan di atas kaca objek yang telah ditetesi dengan larutan kloralhidrat dan ditutup dengan kaca penutup, kemudian diamati di bawah mikroskop. Gambar mikroskopik dapat dilihat pada Lampiran 5 halaman 53.

3.3.3 Penetapan kadar air

Alat terdiri dari labu alas bulat 500 mL, pendingin, tabung penyambung, tabung penerima 5 mL berskala 0,05 mL, alat penampung dan pemanas listrik. Cara kerja :

1. Penjenuhan toluen

Sebanyak 200 mL toluen dan 2 mL air suling dimasukkan ke dalam labu alas bulat, dipasang alat penampung dan pendingin, kemudian didestilasi selama 2 jam. Toluen dibiarkanmendingin selama 30 menit dan dibaca volum air pada tabung penerima dengan ketelitin 0,05 mL (WHO, 1998).

2. Penetapan kadar air simplisia

Sebanyak 5 g serbuk simplisia yang telah ditimbang seksama dimasukkan ke dalam labu yang berisi toluen yang telah dijenuhkan, kemudian labu dipanaskan hati-hati selama 15 menit.Setelah toluen mendidih, kecepatan tetesan diatur 2 tetes tiap detik sampai sebagian besar air terdestilasi, kemudian kecepatan tetesan dinaikkan hingga 4 tetes tiap detik.Setelah semua air terdestilasi, bagian dalam pendingin dibilas dengan toluen.Destilasi dilanjutkan selama 5 menit, kemudian tabung penerima dibiarkan mendingin pada suhu kamar. Setelah air dan toluena memisah sempurna, volume air dibaca dengan ketelitian 0,05 mL. Selisih kedua volume air yang dibaca sesuai dengan kandungan air yang terdapat dalam bahan

yang diperiksa.Kadar air dihitung dalam persen(WHO, 1998). Perhitungan kadar air dapat dilihat pada Lampiran 6 halaman 54.

3.3.4 Penetapan kadar sari larut dalam air

Sebanyak 5 g serbuk simplisia dimaserasi selama 24 jam dalam 100 mL air-klorofom ( 2,5 mL air-klorofom dalam air suling sampai 1 liter) dan labu bersumbat dikocok sesekali sampai 6 jam pertama, kemudian dibiarkan selama 18 jam, kemudian disaring. Sejumlah 20 mL filtrat pertama diuapkan sampai kering dalam cawan peguap yang berdasar rata yang telah dipanaskan dan ditara. Sisa dipanaskan pada suhu 1050C sampai bobot tetap. Kadar sari larut etanol dihitung dalam persen (Depkes, RI., 2000). Perhitungan kadar sari larut dalam air dapat dilihat pada Lampiran 6 halaman 54.

3.3.5 Penetapan kadar sari larut etanol

Sebanyak 5 g serbuk simplisia dimaserasi selama 24 jam dalam 100 mL etanol 96% dan labu bersumbat dikocok sesekali sampai 6 jam pertama, kemudian dibiarkan selama 18 jam, kemudian disaring. Sejumlah 20 mL filtrat pertama diuapkan sampai kering dalam cawan peguap yang berdasar rata yang telah dipanaskan dan ditara. Sisa dipanaskan pada suhu 1050C sampai bobot tetap. Kadar sari larut etanol dihitung dalam persen (Depkes RI, 2000). Perhitungan kadar sari larut etanol dapat dilihat pada Lampiran 6 halaman 55.

abu total dihitung dalam persen (Depkes, RI., 2000). Perhitungan kadar abu total dapat dilihat pada Lampiran 6 halaman 56.

3.3.7 Penetapan kadar abu tidak larut dalam asam

Abu yang diperoleh dalam penetapan kadar abu didihkan dalam 25 mL asam klorida encer selama 5 menit, bagian yang tidak larut dalam asam dikumpulkan, disaring melalui kertas saring bebas abu lalu dipijar sampai bobot tetap, kemudian didinginkan dan ditimbang . Kadar abu yang tidak larut dalam asam dihitung dalam bentuk persen (Depkes, RI., 2000). Perhitungan kadar abu tidak larut asam dapat dilihat pada Lampiran 6 halaman 57.

3.4 Skrining Fitokimia 3.4.1 Pemeriksaan alkaloida

Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 0,5 g kemudian ditambahkan 1 mL asam klorida 2 N dan 9 mL air suling, dipanaskan di atas penangas air selama 2 menit, didinginkan lalu disaring. Filtrat dipakai untuk percobaan berikut:

a. filtrat sebanyak 3 tetes ditambahkan 2 tetes larutan pereksi Mayer akan terbentuk endapan berwarna putih atau kuning.

b. filtrat sebanyak 3 tetes ditambahkan 2 tetes larutan pereksi Bouchardat akan terbentuk endapan berwarna coklat-hitam.

c. filtrat sebanyak 3 tetes ditambahkan 2 tetes larutan pereksi Dragendorff akan terbentuk endapan berwarna merah atau jingga.

Alkaloida dinyatakan positif jika terjadi endapan atau paling sedikit dua atau tiga dari percobaan di atas (Depkes, RI., 1995).

3.4.2 Pemeriksaan flavonoida

Sebanyak 10 g serbuk simplisia ditambahkan 10 mL air suling, dididihkan selama 5 menit dan disaring dalam keaadaan panas. Filtrat yang diperoleh diambil 5 mL, ditambahkan 0,1 g serbuk magnesium, 1 mL asam klorida pekat dan 2 mL amil alkohol, dikocok dan dibiarkan memisah. Flavonoid positif jika terjadi warna merah kuning atau jingga pada lapisan amil alkohol (Farnsworth, 1996)

3.4.3 Pemeriksaan tanin

Sebanyak 0,5 g sampel disari dengan 10 mL air suling, disaring lalu filtratnya diencerkan dengan air suling sampai tidak berwarna. Diambil 2 mL larutan lalu ditambahkan 1 sampai 2 tetes pereaksi besi (III) klorida. Terjadi warna biru atau hijau kehitaman menunjukkan adanya tanin (Farnsworth, 1996).

3.4.4 Pemeriksaan glikosida

Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 3 g kemudian disari dengan 30 mL campuran 7 bagian volume etanol 96% dan 3 bagian volume air suling, selanjutnya ditambahkan 10 mL HCl 2 N, direfluks selama 10 menit, didinginkan dan disaring. Pada 30 mL filtrat ditambahkan 25 mL air suling dan 25 mL timbal (II) asetat 0,4 M, dikocok, didiamkan selama 5 menit lalu disaring. Filtrat disari sebanyak 3 kali, tiap kali dengan 20 mL campuran 3 bagian volume kloroform dan 2 bagian volume isopropanol. Diambil lapisan air kemudian ditambahkan 2 mL air dan 5 tetes pereaksi Molisch, ditambahkan hati-hati 2 mL asam sulfat pekat terbentuk cincin

3.4.5 Pemeriksaan saponin

Sebanyak 0,5 g sampel dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan ditambahkan 10 mL air suling panas, didinginkan kemudian dikocok kuat-kuat selama 10 detik, timbul busa yang mantap tidak kurang dari 10 menit setinggi 1-10 cm. Ditambahkan 1 tetes larutan asam klorida 2 N, bila buih tidak hilang menunjukkan adanya saponin (Depkes, RI., 1995).

3.4.6 Pemeriksaan steroida/triterpenoida

Sebanyak 1 g sampel dimaserasi dengan 20 mLn-heksan selama 2 jam, lalu disaring. Filtrat diuapkan dalam cawan penguap. Pada sisa dalam cawan penguap ditambahkan 2 tetes asam asetat glasial dan 1 tetes asam sulfat pekat. Timbulnya warna biru atau biru hijau menunjukkan adanya steroid, sedangkan warna merah, merah muda atau ungu menunjukkan adanya triterpenoid(Harborne, 1987).

3.5 Uji Efek Antiinflamasi

Pengujian efek antiinflamasi ini terdiri dari beberapa tahap, yaitu penyiapan hewan percobaan, penyiapan bahan, dan pengujian efek antiinflamasi.

3.5.1 Pembuatan suspensi Na CMC 0,5 %

Sebanyak 500 mg Na CMC ditaburkan kedalam lumpang berisi air suling panas sebanyak 10 mL, ditutup dan dibiarkan selama 15 menit, kemudian digerus hingga diperoleh massa yang transparan, lalu diencekan dengan air suling dimasukkan ke dalam labu tentukur dicukupkan hingga 100 mL (Anief, 1995).

3.5.2 Pembuatan suspensi natrium diklofenak dosis 4,5 mg/kg bb

Sebanyak 4,5 mg serbuk natrium diklofenak digerus, kemudian ditambahkan sedikit suspensi Na-CMC 0,5% digerus sampai homogen, dimasukkan ke dalam labu tentukur 10 mL, dicukupkan sampai garis tanda dengan suspensi Na-CMC 0,5%.

3.5.3 Pembuatan suspensi ekstrak etanol daun sembukan (EEDS) dosis 300 mg/kg bb, 400 mg/kg bb dan 500 mg/kg bb

Ditimbang masing-masing 300 mg/kg bb, 400 mg/kg bb dan 500 mg/kg bb ekstrak etanol daun sembukan, kemudian dimasukkan ke dalam lumpang ditambahkan sedikit suspensi Na-CMC digerus sampai homogen. Dimasukkan ke dalam labu tentukur 10 mL, dicukupkan sampai garis tanda. Perhitungan dosis ekstrak etanol daun sembukan dapat dilihat pada lampiran 13 halaman 64.

3.5.4 Pembuatan larutan λ-karagenan 1%

Ditimbang sebanyak 100 mg λ-karagenan, digerus sampai homogen dengan larutan NaCl 0,9%, kemudian dimasukkan ke dalam labu tentukur 10 mL, dicukupkan dengan larutan NaCl 0,9% sampai garis tanda. Diinkubasi pada suhu 370C selama 24 jam (Linnon, 2009).

3.5.5Pembuatan larutan reservoir

Sebanyak 2 mL campuran senyawa pembasah (Ornano Imbente BBC. 97)

yang telah tersedia dalam kemasan standar dimasukkan ke dalam labu tentukur 1 L, ditambahkan 0,4 NaCl kemudian dilarutkan dengan air suling lalu dimasukkan

3.5.6Penyiapan hewan percobaan

Hewan yang digunakan pada penelitian ini adalah tikus putih jantan yang sehat sebanyak 25 ekor dengan berat badan 150-200 g. Sebelum pengujian terlebih dahulu tikus dikondisikan selama 1 minggu dalam kandang yang baik untuk menyesuaikan diri dengan lingkungannya. Hewan yang digunakan pada penelitian ini telah disetujui penggunaanya oleh Ketua Komite Etik Penelitian Hewan Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam-Universitas Sumatera Utara (Animal Research Ethics Commitees / EREC). Rekomendasi persetujuan dapat dilihat pada Lampiran 2 halaman 50.

3.5.7 Pengujian efek antiinflamasi

Sebelum pengujian tikus dipuasakan selama 18 jam (tidak makan tetapi masih tetap diberi minum). Hewan dikelompokkan kedalam 5 kelompok, yang masing-masing kelompok terdiri dari 5 ekor tikus, yaitu kelompok kontrol negatif (suspensi Na-CMC), kelompok kontrol positif (Natrium diklofenak), kelompok bahan uji ekstrak etanol daun sembukan (dosis 300, 400 dan 500 mg/kg bb).

Pada hari pengujian masing-masing tikus diberi tanda pada bagian ekor dan pada kaki kanan tikus lalu hewan ditimbang beratnya. Kemudian kaki kanan tikus dimasukkan ke dalam sel yang berisi cairan khusus yang ada pada alat pletismometer sampai cairan naik pada garis batas atas, kemudian pedal ditahan, dicatat angka pada monitor sebagai volume awal (Vo) yaitu volume kaki sebelum diberi obat dan diinduksi larutan λ- karagenan. Setelah itu masing-masing tikus diberi suspensi bahan uji secara oral sesuai dengan kelompoknya. Satu jam kemudian, masing-masing telapak kaki tikus disuntik secara intraplantar dengan 0,1 mL larutan λ -karagenan 1%. Setelah 30 menit, dilakukan pengukuran dengan

cara mencelupkan kaki tikus pada sel pletismometer yang berisi cairan khusus sampai larutan mencapai garis batas atas, dan pedal dithan. Dicatat angkapada monitor. Perubahan volume cairan yang terjadi dicatat sebagai volume telapak kaki tikus (Vt). Pengukuran dilakukan setiap 30 menit selama 360 menit. Dan tiap kali pengukuran larutan sel tetap dicukupkan sampai garis tanda atau garis merah bagian atas sel dan pada menu utama ditekan tombol nol dan juga kaki tikus dikeringkan sebelumnya (Parmar dan Prakash, 2006).

Volume radang adalah selisih volume telapak kaki tikus setelah dan sebelum

disuntikkan λ-karagenan. Pada waktu pengukuran, volume cairan pada sel

pletismometer sama setiap kali pengukuran dan tanda batas pada kaki tikus harus jelas, kaki tikus harus tercelup sampai batas yang dibuat (Juheini, dkk., 1990). Bagan kerja uji antiinflamasi dapat dilihat pada Lampiran 9 halaman 60.

3.6 Rumus Perhitungan Persentase Radang (% R) dan Persentase Inhibisi Radang (% IR)

3.6.1 Persen radang (% R)

%� =�� − ��

�� � 100%

Keterangan:

Vo = volume mula-mula

Vt = volume udem kaki pada waktu t

Contoh perhitungan persentase radang dapat dilihat pada Lampiran 16 halaman 69 dan persentase inhibisi radang dapat dilihat pada Lampiran 17 halaman 71.

3.7 Analisis Data

Data hasil penelitian dianalisis secara ststistik menggunakan analisis variansi (ANOVA) dengan program SPSS dengan tingkat kepercayaan 95% dilanjutkan dengan uji Duncan untuk mengetahui kelompok mana yang mempunyai pengaruh sama atau berbeda satu dengan yang lainnya.

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan

Hasil identifikasi tumbuhan dilakukan di Herbarium Bogoriense, Bidang Botani, Pusat Penelitian Biologi-LIPI, menyebutkan bahwa tanaman yang digunakan adalah tanaman daun sembukan Paederia foetida L, famili Rubiaceae. hasil identifikasi dapat dilihat pada Lampiran 1 halaman 49.

4.2 Hasil Karakteristik Simplisia 4.2.1 Hasil pemeriksaan makroskopik

Hasil pemeriksaan makroskopik dari daun sembukan segar menunjukkan bahwa daun sembukan memmiliki warna hijau, berbau kentut bila di remas, panjang 9-12 cm, lebar 3-4 cm. Pemeriksaan makroskopik serbuk simplisia daun sembukan dilakukan dengan melihat organoleptis simplisia berupa pemeriksaan terhadap bau, rasa, warna dari serbuk simplisia daun sembukan. Hasil pemeriksaan menunjukkan bahwa simplisia daun sembukan berwarna coklat kehitaman, rasa pahit dan berbau khas.

4.2.2 Hasil pemeriksaan mikroskopik

Hasil pemeriksaan mikroskopik dari daun segar dan serbuk simplisia daun sembukan dijumpai adanya stomata tipe parasitik, rambut penutup bentuk bintang

4.2.3 Hasil pemeriksaan karakteristik simplisia

Hasil pemeriksaan kadar air, kadar sari larut air, kadar sari larut etanol, kadar abu total dan kadar abu tidak larut asam dapat dilihat pada Tabel 3.1

Tabel 4.1Hasil pemeriksaan karakteristik simplisia daun sembukan

Penetapan kadar air bertujuan untuk memberikan batasan minimal atau rentang besarnya kandungan air didalam bahan (Depkes, RI., 2000). Kelebihan air dalam simplisia menyebabkan pertumbuhan mikroba, jamur atau serangga, serta mendorong kerusakan bahan aktif (WHO, 1998). Hasil penetapan kadar air yang diperoleh lebih kecil dari 10% yaitu 4,98%. Hal ini baik karena kelebihan air dalam simplisia akan mendorong pertumbuhan mikroba dan jamur.

Kadar sari larut air simplisia daun sembukan 12,17% dan kadar sari larut etanol simplisia daun sembukan 38,81%. Penetapan kadar sari larut air untuk mengetahui senyawa-senyawa yang dapat larut dalam air. Senyawa-senyawa yng dapat larut dalam air adalah glikosida, gula, gom, protein, enzim, zat warna, dan asam organik. Penetapan kadar sari larut etanol untuk mengetahui kadar sari yang larut dalam pelarut polar. Senyawa-senyawa yang dapat larut dalam etanol adalah glikosida, antarkinon, steroid terikat, klorofil, dan dalam jumlah sedikit yang larut yaitu lemak dan saponin (Depkes, RI., 1986).

Penetapan kadar abu total dilakukan untuk mengetahui kandungan mineral internal (abu fisiologi) dan eksternal (abu non-fisiologi) yang (Depkes, RI., 2000).

No Parameter Hasil (%)

1 Kadar air 4,98

2 Kadar sari larut dalam air 12,17

3 Kadar sari larut dalam etanol 38,81

4 Kadar abu total 7,28

Kadar abu tidak larut asam untuk menunjukkan jumlah silikat, khususunya pasir yang ada pada simplisia dengan cara melarutkan abu total dalam asam klorida (WHO, 1998). Penetapan kadar abu pada simplisia daun sembukan menunjukkan kadar abu total 7,28% dan kadar abu tidak larut asam 0,32%.

4.3 Hasil Skrining Fitokimia

Skrining fitokimia serbuk simplisia dan ekstrak etanol daun sembukan dilakukan untuk manunjukkan golongan senyawa metabolit sekunder yang terdapat didalamnya. Adapun pemeriksaan yang dilakukan terhadap simplisia dan ekstrak etanol daun sembukan adalah pemeriksaan golongan senyawa alkaloid, flavonoid, glikosida, saponin, tanin, dan steroid/triterpenoid. Hasil pemeriksaan skrining fitokimia serbuk simplisia dan ekstrak etanol daun sembukan dapat dilihat pada Tabel 4.2.

Tabel 4.2Hasil skrining fitokimia simplisia dan ekstrak etanol daun sembukan

No Skrining Hasil

Simplisia Ekstrak

1 Alkaloid - -

2 Flavonoid + +

3 Glikosida + +

4 Saponin + +

5 Tanin + +

6 Steroid/triterpenoid + +

Golongan flavonoid memberikan hasil yang positif ditandai dengan penambahan serbuk magnesium dengan HCl pekat menjadi warna kuning atau jingga. Uji identifikasi tanin menunjukkan hasil positif dengan penambahan pereaksi FeCl3 1% terjadi warna biru kehitaman (Farnsworth, 1996). Adanya

glikosida ditandai dengan terbentuknya cincin ungu dengan pereaksi Molish. Pada uji identifikasi saponin memberikan hasil positif dengan terbentuknya busa setelah dikocok kuat-kuat selama 10 menit dan dengan penambahan 1 tetes HCl 2 N buih/busa tidak hilang (Depkes, RI., 1995). Steroid/triterpenoid memberikan hasil positif dengan terbentuknya warna hijau biru setelah ditambahkan pereaksi Liebermann-Burchard (Harbone, 1987).

4.4 Hasil Pengujian Efek Antiinflamasi

Tikus uji dikelompokkan dalam 5 kelompok perlakuan, masing-masing kelompok terdiri dari 5 ekor tikus yaitu kelompok kontrol yang diberikan suspensi Na-CMC 0,5%, kelompok uji dengan 3 variasi dosis perlakuan suspensi EEDS dosis 300 mg/kg bb, suspensi EEDS dosis 400 mg/kg bb, dan suspensi EEDS dosis 500 mg/kg bb dan kelompok pembanding yang diberikan natrium diklofenak dosis 4,5 mg/kg bb.

Tikus terlebih dahulu dipuasakan ±18 jam, kemudian tikus ditimbang diberi tanda pada bagian ekor dan pergelangan kaki kanan tikus. Sebelum masing-masing kelompok diberikan ekstrak etanol daun sembukan, volume kaki tikusdiukur terlebih dahulu sebagai volume awal (Vo). Setelah itu masing-masing kelompok diberikan ekstrak etanol daun sembukan yaitu kelompok I diberikan suspensi Na-CMC 0,5%, Kelompok II diberikan suspensi natrium diklofenak 4,5

mg/kg bb, III dan IV dan kelompok V masing-masing diberi suspensi EEDS dosis 300, 400, 500 mg/kg bb secara oral. Satu jam kemudian, masing-masing telapak

kaki tikus disuntikan secara intraplantar dengan 0,1 mL larutan λ-karagenan 1%.

Pengukuran dilakukan dengan menggunakan alat pletismometer dengn prinsip pengukuran berdasarkan hukum Archhimedes, Setelah 30 menit, pengukuran dilakukan dengan cara mencelupkan kaki tikus ke dalam sel pletismometer yang berisi cairan khusus sampai larutan mencapai garis batas atas, dan pedal ditahan. Dicatat angka pada monitor. Perubahan volume cairan yang terjadi dicatat sebagai volume telapak kaki tikus (Vt). Pengukuran dilakukan setiap 30 menit selama 360 menit. Hasil pengukuran volume telapak kaki tikus dapat dilihat pada Lampiran 15 halaman 67 .

Perubahan volume kaki tikus, dapat dihitung persen radang pada kaki tikus. Selanjutnya, dibuat grafik perubahan persen radang rata- rata kaki tikus. Kelompok persen radang pada kaki tikus yang lebih kecil dari kelompok kontrol menunjukkan bahwa bahan uji mampu menekan radang yang disebabkan oleh karagenan. Hasil pengukuran persen radang yang terjadi dapat dilihat pada Gambar 4.1

Gambar 4.1 Grafik persen radang rata-rata telapak kaki tikus tiap waktu pengamatan

Pada gambar 4.1 dapat dilihat bahwa suspensi natrium diklofenak 4,5 mg/kg bb memiliki persen radang yang lebih kecil dari pada EEDS dosis 500, 400, dan 300 mg/kg bb, dan EEDS dosis 500 mg/kg bb mempunyai persen radang yang lebih kecil daripada EEDS dosis 400 dan 300 mg/kg bb. Data persen radang dapat dilihat pada Lampiran 16 halaman 69.

Pembentukan radang oleh karagenan menghasilkan peradangan akut, dan tidak menyebabkan kerusakan jaringan, meskipun radang dapat bertahan selama 360 menit dan berangsur-angsur berkurang selama satu hari.Karagenan sebagai penyebab radang dapat dipengaruhi oleh obat antiradang. Responnya terhadap obat antiinflamasi lebih peka dibandingkan dengan iritan lainnya (Juheini, dkk., 1990).

Persentase radang kaki tikus yang lebih kecil dari kontrol menunjukkan bahwa suspensi natrium diklofenak dan suspensi EEDS mampu menghambat

0 10 20 30 40 50 60

30 60 90 120 150 180 210 240 270 300 330 360

% R

ad

an

g

Waktu (Menit)

Kontrol Negatif Kontrol Positif EEDS 300 mg/kgBB EEDS 400 mg/kgBB EEDS 500 mg/kgBB

peradangan pada kaki tikus yang disebabkan karagenan. Kemampuan untuk menghambat peradangan ini yang disebut dengan inhibisi radang dapat dilihat pada Gambar 4.2

Gambar 4.2 Grafik persen inhibisi radang rata-rata telapak kaki tikus tiap waktu pengamatan

Pada gambar 4.2 dapat dilihat bahwa EEDS 300 mg/kg bb memiliki persen hambatan radang yang lebih kecil dari EEDS 400, 500 mg/kg bb dan dengan suspensi natrium diklofenak dosis 4,5 mg/kg bb, EEDS 400 mg/kg bb memiliki persen hambatan radang yang lebih kecil dari EEDS 500 mg/kg bb dan dengan suspensi natrium diklofenak 4,5 mg/kg bb, dan EEDS 500 mg/kg bb memiliki persen hambatan radang yang lebih kecil dari suspensi natrium diklofenak dosis 4,5 mg/kg bb.

Data perubahan efek antiinflamasi yang diperoleh diolah dengan ANOVA

0 10 20 30 40 50 60 70 80 90

120 150 180 210 240 270 300 330 360

%

Inhi

bi

si

R

ad

an

g

waktu (menit)

suspensi Na-CMC 0,5% sebagai pembanding negatif dan suspensi natrium diklofenak sebagai pembanding positif. Analisis variansi secara SPPS pada menit ke-30 sampai menit ke-360 menujukkan nilai signifikan atau taraf kepercayaan 0,000. Nilai ini menunjukkan perbedaan yang signifikan antara perlakuan karena nilai tersebut lebih kecil dari 0,05 dengan tingkat kepercayaan 95%. Hasil dari uji analisis variansi (ANOVA) persen radang dapat dilihat pada Lampiran 19 halaman 75.

Perhitungan selanjutnya yaitu dilakukan uji Duncan dengan menggunakan program SPSS versi 18. Untuk melihat kelompok perlakuan mana yang memiliki efek yang sama atau berbeda dan efek terkecil sampai efek yang terbesar antara satu dengan yang lainnya sehingga diperoleh susunan kelompok yang berbeda dilakukan uji Duncan. Pada uji Duncan ini, dilakukan untuk semua perlakuan dari menit ke-30 sampai menit ke-360. Uji beda rata-rata > 0,05 menunjukkan bahwa antara perlakuan tidak ada perbedaan yang signifikan dan sebaliknya bila uji beda rata-rata < 0,05 menunjukkan terdapat perbedaan yang signifikan untuk semua perlakuan dari menit ke-30 sampai menit ke-360. Hasil analisis metode Duncan

dapat dilihat pada Lampiran 20 halaman 79.

Analisis variansi terhadap perubahan volume radang digunakan untuk melihat ada tidaknya perbedaan pengaruh obat uji yakni suspensi ekstrak daun sembukan terhadap suspensi CMC 0,5% sebagai pembanding negatif dan suspensi natrium diklofenak sebagai pembanding positif.

Berdasarkan hasil analisis variansi menunjukan perbedaan yang signifikan

(α < 0,05%) antar kelompok perlakuan pada menit ke-30 sampai menit ke-360 dengan harga F hitung > F tabel. Hal ini bearti semua jenis perlakuan memberikan

pengaruh yang berbeda nyata terhadap radang telapak kaki tikus yang disebabkan oleh karagenan.

Untuk melihat kelompok perlakuan mana yang memiliki efek yang sama atau berbeda dan efek terkecil sampai dengan yang terbesar antara yang satu dengan yang lain sehingga diperoleh susunan kelompok yang berbeda dilakukan dengan metode Duncan, uji beda rata-rata > 0,05 menunjukan bahwa atar perlakuan tidak ada perbedaan yang bermakna dan sebaliknya bila uji beda rata-rata < 0,05 nenunjukan terdapat perbedaan yang bermakna untuk semua perlakuan dari menit ke-30 sampai menit ke-360.

Uji Duncan menit ke-30 menunjukan suspensi natrium diklofenak memiliki perbedaan yang tidak signifikan dengan EEDS 500 mg/kg bb, tetapi memiliki perbedaan yang signifikan dengan EEDS 300, 400 mg/kg bb dan dengan kontrol. EEDS dosis 500 mg/kg bb memiliki perbedaan yang signifikan dengan EEDS dosis 300, 400 mg/kg bb. EEDS 400 mg/kg bb memiliki perbedaan yang signifikan dengan EEDS 300 mg/kg bb dengan kontrol. EEDS 300 mg/kg bb memiliki perbedaan yang signifikan dengan kontrol.

Uji Duncan menit ke-60 menunjukan suspensi natrium diklofenak menunjukan perbedaan yang tidak signifikan dengan EEDS 500 mg/kg bb tetapi memiliki perbedaan yang signifikan dengan EEDS 400, 300 mg/kg bb. EEDS 500 mg/kg bb memiliki perbedaan signifikan dengan EEDS 400 mg/kg bb, 300 mg/kg

Uji Duncan pada menit ke-90 sampai menit ke-210 menunjukan suspensi natrium diklofenak memiliki perbedaan yang tidak signifikan dengan EEDS dosis 500, 400 mg/kg bb. EEDS dosis 500 mg/kg bb dan 400 mg/kg bb memiliki perbedaan yang signifikan dengan EEDS dosis 300 mg/kg bb dan kontrol. EEDS dosis 300 mg/kg bb memiliki perbedaan yang signifikan dengan kontrol.

Uji Duncan pada menit ke-240 menunjukan suspensi natrium diklofenak memiliki perbedaan yang tidak signifikan dengan EEDS 500 mg/kg bb, tetapi memiliki perbedaan yang signifikan dengan EEDS 400, 300 mg/kg bb dan dengan kontrol. EEDS dosis 500 mg/kg bb memiliki perbedaan yang signifikan dengan EEDS dosis 400,300 mg/kg bb. EEDS 400 mg/kg bb memiliki perbedaan yang signifikan dengan EEDS 300 mg/kg bb dengan kontrol. EEDS 300 mg/kg bb memiliki perbedaan yang signifikan dengan kontrol.

Uji Duncan pada menit ke-270 menunjukkan suspensi natrium diklofenak memiliki perbedaan yang tidak signifikan dengan EEDS dosis 400 mg/kg bb, 500 mg/kg bb. EEDS dosis 500 mg/kg bb memiliki perbedaan yang tidak signifikan dengan dosis 400 mg/kg bb tetapi memiliki perbedaan yang signifikan dengan EEDS dosis 300 mg/kg bb dan kontrol. EEDS dosis 400 mg/ kg bb memiiki perbedaan signifikan dengan EEDS dosis 300 mg/ kg bb dan kontrol. EEDS dosis 300 mg/kg bb memiliki perbedaan yang tidak signifikan dengan kontrol.

Uji Duncan pada menit ke-300 menunjukan suspensi natrium diklofenak memiliki perbedaan yang tidak signifikan dengan EEDS dosis 500 mg/kg bb tetapi memiliki perbedaan yang signifikan dengan EEDS dosiss 400, 300 mg/kg bb dan kontrol. EEDS dosis 500 mg/kg bb memiliki perbedaan yang signifikan dengan EEDS dosis 400 mg/kg bb, 300 mg/kg bb dan kontrol. EEDS dosis 400 mg/kg bb

memimiliki perbedaan yang signifikan dengan EEDS dosis 300 mg/kg bb, EEDS dosis 300 mg/kg bb memimiliki perbedaan yang tidak signifikan dengan kontrol.

Uji Duncan pada menit ke-330 sampai menit ke-360 menunjukan suspensi natrium diklofenak menunjukan perbedaan yang tidak signifikan dengan EEDS 500 mg/kg bb tetapi memiliki perbedaan yang bermakna dengan EEDS 400 mg/kg bb. EEDS 500 mg/kg bb memiliki perbedaan tidak signifikan dengan EEDS 400 mg/kg bb tetapi memiliki perbedaan yang signifikan dengan dosis 300 mg/kg bb dan kontrol. EEDS 400 mg/kg bb memiliki perbedaan yang tidak signifikan dengan EEDS 300 mg/kg bb dan kontrol. EEDS 300 mg/kg bb memiliki perbedaan yang signifikan dengan kontrol.

Berdasarkan hasil pengujian tersebut maka dapat disimpulkan bahwa EEDS dosis 500 mg/kg bb memiliki efek antiinflamasi yang bagus dan mendekati obat pembanding natrium diklofenak 4,5 mg/kg bb jika dibandingkan dosis lainnya baik dilihat dari nilai persen radang dan persen inhibisi radang antara individu maupun secara kelompok. Terlepas pada dosis berapa EEDS yang memiliki efek antiinflamasi, penelitian ini telah membuktikan secara farmakologis bahwa hewan ini memiliki efek antiinflamasi.

Berdasarkan hasil skrining fitokimia yang telah dilakukan bahwa daun sembukan mengandung metabolit sekunder yang dapat berkhasiat sebagai antiinflamasi yaitu flavanoid dan saponin, kemudian dilakukan uji antiinflamasi

pada lintasan siklooksigenase (Robinson, 1995). Flavonoid sebagai antiinflamasi terjadi melalui efek penghambatan jalur metabolisme asam arakidonat, jalur siklooksigenase, jalur lipooksigenase, pembentukan prostaglandin, pelepasan histamin. Senyawa flavonoid yang dapat berfungsi sebagai antiinflamasi adalah toksifolin, biazilin, haemaktosilin, gosipin, prosianonidin, nepritin (Carlo, dkk., 1999), sedangkan aktivitas farmakologi saponin yang telah dilaporkan memiliki aktifitas sebagai antiinflamasi, antibiotik, antifungi, antivirus, hepatoprotektor serta antiulcer (Fitriyani, dkk., 2011), sehingga diduga flavonoid, dan saponin yang memberikan efek antiinflamasi.

Berdasarkan uraian di atas dapat disimpulkan bahwa ekstrak etanol daun sembukan cukup efektif menghambat radang. Hal ini memberikan gambaran atas potensi ekstrak etanol daun sembukan yang dapat dikembangkan menjadi produk yang bermanfaat sebagai obat antiinflamasi dari bahan alam.

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan

Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan: a. Hasil karakteristik serbuk simplisia daun sembukan diperoleh kadar air 4,98%,

kadar sari larut air 12,17%, kadar sari larut etanol 38,81%, kadar abu total 7,28%, kadar abu tidak larut asam 0,32%.

b. Hasil pemeriksaan golongan senyawa metabolit sekunder yang terdapat pada simplisia daun sembukan dan ekstrak etanol daun sembukan adalah flavonoid, glikosida, tanin, steroid/triterpenoid dan saponin.

c. Ekstrak etanol daun sembukan dosis 300 mg/kg bb, 400 mg/kg bb memiliki efek antiinflamasi dan dosis 500 mg/kg bb memiliki efek antiinflamasi yang mirip dengan natrium diklofenak terhadap radang telapak kaki tikus yang

diinduksi dengan larutan λ-karagenan 1% secara intraplantar.

5.2 Saran

Disarankan kepada peneliti selanjutnya untuk menguji efek antiinflamasi dengan menggunakan metode yang lain dari ekstrak etanol daun sembukan

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Uraian Tumbuhan 2.1.1 Morfologi tumbuhan

Daun sembukan (kentutan) termasuk herba tahunan berbatang memanjang, berkayu pada bagian pangkal, tumbuh liar di lapangan terbuka atau tepi sungai, dan melilit di pagar rumah. Daun sembukan memiliki daun tunggal, bertangkai sekitar 1-5 cm, letaknya berhadapan, dan bentuknya bulat telur atau lonjong. Pangkal daun berbentuk jantung, ujung runcing tetapi rata, panjang daun 3-12 cm dan lebar 2-5 cm dan tulang daun menyirip (Mangoting, dkk., 2005). Tumbuhan sembukan memiliki bunga yang tersusun dalam malai sepanjang 2-12 cm, bentuk bunga corong, mahkota bunga putih hingga kuning pucat dengan semburat ungu kemerahan gelap di bagian tengah, panjang mahkota 1 cm dan berbentuk silinder.

2.1.2Klasifikasitumbuhan

Klasifikasi tumbuhan sembukan adalah sebagai berikut:

Kerajaan : Planta

Subdivisi : Angiospermae

Divisi : Spermatophyta

Kelas : Dicotyledonae

Bangsa : Rubiales

Suku : Rubiaceae

Marga : Paederia

Nama daerah dari daun sembukan adalah sekentut, daun kentut, sembukan (Jawa), dandang king, (Melayu), kahitutan, kasembukan (Madura), gumisiki (Ternate) (Mangoting, dkk., 2005). Nama asing dari daun sembukan adalah Chinese fevervine (Inggris), Ji shi Teng (Cina) (Hariana, 2011).

2.1.3 Kandungan kimia tumbuhan

Kandungan kimia dari tumbuhan sembukan adalah asperulosida, skandosida, paederosida, deasetilasperulosida, asam paederosida, arbutin, asam oleonik, dan gama sitosterol. Daun sembukan memiliki bau yang tidak enak dan tidak bersifat permanen, karena apabila daun direbus atau dikukus aromanya akan berkurang. Bau yang tidak enak dari daun sembukan disebabkan oleh kandungan kimia metil merkaptan yang terdapat di daun dan batang (Trubus, 2013).

2.1.4 Kegunaan tumbuhan

Daun sembukan dapat digunakan sebagai obat tradisional yaitu digunakan sebagai antispasmodik (pengurang kejang otot di usus), diare, rematik dan antiradang. Daun sembukan selain digunakan sebagai obat tradisional digunakan juga sebagai sayur, antara lain sebagai bahan untuk membuat pepes oncom, botok, trancam, dan pelas (Trubus, 2013).

2.2 Simplisia dan Ekstrak 2.2.1 Simplisia

dan simplisia pelikan (mineral). Simplisia nabati adalah simplisia(Depkes, RI., 2000).

2.2.2 Ekstrak

Ekstrak adalah sediaan yang dapat berupa sediaan kental, kering dan cair yang diperoleh dengan mengekstraksi senyawa aktif dari simplisia nabati atau simplisia hewani menggunakan pelarut yang sesuai (Depkes, RI., 2000).

Ekstraksi adalah kegiatan penarikan kandungan kimia yang dapat larut sehingga terpisah dari bahan yang tidak dapat larut dengan menggunakan suatu pelarut cair. Senyawa aktif yang terdapat dalam simplisia dapat digolongkan kedalam golongan minyak atsiri, alkaloid, flavonoid dan lain-lain. Diketahui senyawa aktif yang dikandung simplisia akan mempermudah pemilihan pelarut dan cara ekstraksi yang tepat(Depkes, RI., 2000).

2.2.3 Metode ekstraksi

Metode ekstraksi dengan menggunakan pelarut dapat dibagi ke dalam dua cara yaitu :

1. Cara dingin a. Maserasi

Maserasi adalah proses pengekstraksian simplisia dengan menggunakan pelarut dengan beberapa kali pengocokan atau pengadukan pada temperatur ruangan (kamar). Secara teknologi termasuk ekstraksi dengan prinsip metode pencapaian konsentrasi pada keseimbangan. Maserasi kinetik bearti dilakukan pengadukan yang kontinu (terus-menerus). Remaserasi bearti dilakukan pengulangan penambahan pelarut setelah dilakukan penyaringan maserat pertama dan seterusnya (Depkes, RI., 2000).

b. Perkolasi

Perkolasi adalah proses pengekstraksian dengan pelarut yang selalu baru

sampai sempurna (exhaustive extraction) yang umumnya dilakukan pada

temperature ruangan. Proses terdiri dari tahapan pengembangan bahan, tahap maserasi antara, tahap perkolasi sebenarnya (penetasan/penampungan ekstrak) terus-menerus sampai diperoleh ekstrak (perkolat) yang jumlahnya 1-5 kali bahan (Depkes, RI., 2000).

Cara panas a. Refluks

Refluks adalah proses pengekstraksian dengan pelarut pada temperatur titik didihnya, selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang relatif konstan dengan adanya pendingin balik. Umumnya dilakukan pengulangan proses pada residu pertama sampai 3-5 kali sehingga dapat termasuk proses ekstraksi sempurna (Depkes, RI., 2000).

b. Soxletasi

Soxletasi adalah prosespengekstraksian menggunakan pelarut yang selalu baru yang umumnya dilakukan dengan alat yang disebut Soxhlet sehingga terjadi ekstraksi kontinu dengan jumlah pelarut relatif konstan dengan adanya pendingin balik (Depkes, RI., 2000).

d. Infundasi

Infundasi adalah proses penyarian dengan pemanasaan menggunakan pelarut air pada temperatur 900C selama 15 menit (Depkes, RI., 2000).

e. Dekoktasi

Dekoktasi adalah proses penyarian dengan pemanasan menggunakan pelarut air pada temperatur 900C selama 30 menit (Depkes,RI., 2000).

2.3 Inflamasi

2.3.1 Definisi inflamasi

Inflamasi adalah respon protektif setempat yang ditimbulkan oleh cedera atau kerusakan jaringan, yang berfungsi menghancurkan, mengurangi, atau mengurung suatu agen pencedera maupun jaringan yang cedera itu. Pada bentuk akut ditandai oleh tanda klasik yaitu: nyeri (dolor), panas (kalor), kemerahan (rubor), bengkak (tumor), dan hilangnya fungsi (fungsiolesa). Secara histologis, menyangkut rangkaian kejadian yang rumit, yaitu mencakup dilatasi arteri, kapiler dan venula, disertai peningkatan permeabilitas aliran darah, eksudasi cairan, termasuk protein plasma dan migrasi leukosit kedalam fokus peradangan. Respon ini disebabkan oleh pembebasan mediator (histamin, serotonin, prostaglandin, kinin) yang berperan mengatur, mengaktifkan sel-sel, baik dari darah maupun jaringan dan kemudian dapat timbul gejala dari jaringan yang cidera (Soenarto, 2007).

2.3.2 Mediator inflamasi a. Histamin

Histamin merupakan mediator pertama yang dilepaskan dan segera muncul dalam beberapa detik setelah diinduksi dan berperan meningkatkan permeabilitas kapiler. Histamin merupakan produk dekarboksilase asam amino histidin yang terdapat dalam semua jaringan tubuh. Konsentrasi tertinggi terdapat dalam paru, kulit dan saluran cerna terutama pada sel mast, sedangkan leukosit dan basofil adalah dalam bentuk tak aktif secara biologik tersimpan dan terikat pada heparin dan protein basa. Histamin akan dibebaskan dari sel tersebut pada reaksi hipersensitivitas, kerusakan sel (misalnya pada luka) serta akibat senyawa kimia pembebas histamin (Mutschler, 1999).

b. Bradikinin

Bradikinin bekerja pada pembuluh darah dengan merangsang pelepasan prostaksiklin, nitrit oksida ataupun faktor hiperpolarisasi turunan endothelium. Bradikinin menyebabkan kontraksi otot polos, meningkatkan permeabilitas vaskuler dan merupakan mediator penting dalam nyeri (Nugroho, 2012).

c. Serotonin

serotonin (5-hidroksitriptamin) berasal dari asam amino esensial triptamin yang dihasilkan melalui reaksi hidroksilasi dan dekarboksilasi. Serotonin terdapat dalam platelet darah, mukosa usus dan di beberapa bagian otak dengan konsentrasi

d. Prostaglandin

Prostaglandin hanya berperan pada nyeri yang berkaitan dengan kerusakan jaringan atau radang. Prostaglandin sebagai penyebab radang bekerja lemah, namun berpotensi kuat setelah bergabung dengan mediator atau substansi lainnya yang dibebaskan secara lokal, seperti histamin, serotonin dan leukotrin. Prostaglandin dapat menimbulkan vasodilatasi dan meningkatkan aliran darah lokal (Ganiswarna, 1995).

e. Leukotrien

Leukotrien dihasilkan dari subtrat asam arakidonat melalui jalur lipoksigenase yang terdapat di paru-paru, sel mast platelet, dan sel darah putih (Nugroho, 2012).

2.3.3 Gejala-gejala terjadinya respon inflamasi

a. Kemerahan (rubor)

Kemerahan (rubor) merupakan hal pertama yang terlihat di daerah yang mengalami inflamasi akut. Waktu reaksi inflamasi mulai timbul maka arteri yang mensuplai darah ke daerah tersebut bedilatasi, dengan demikian lebih banyak darah mengalir ke dalam mikrosirkulasi lokal. Pembuluh-pembuluh darah yang sebelumnya kosong atau sebagian saja meregang dengan cepat dan terisi penuh oleh darah. Keadaan ini dinamakan hiperemia dan menyebabkan warna merah lokal karena inflamasi akut. Timbulnya hiperemia pada permulaan reaksi inflamasi diatur oleh tubuh melalui pengeluaran mediator, seperti histamin (Price dan Wilson, 1995).

2.1.3 Kandungan Kimia Tumbuhan ... 7

2.1.4 Kegunaan Tumbuhan ... 7

2.2 Simplisia dan Ekstrak ... 7

2.2.1 Simplisia ... 8

2.2.2 Ekstrak ... 8

2.2.3 Metode Ekstraksi ... 8

2.3 Inflamasi ... 10

2.3.1 Definisi Inflamasi ... 10

2.3.2 Mediator-mediator Inflamasi ... 10

2.3.3 Gejala-gejala Terjadinya Respon Inflamasi ... 12

2.3.4 Mekanisme Terjadinya Inflamasi ... 13

2.4 Obat Antiinflamasi ... 15

2.4.1 Obat Antiinflamasi Golongan Steroid ... 16

2.4.2 Obat Antiinflamasi Golongan Non Steroid ... 16

2.4.2.1 Natrium Diklofenak ... 16

2.5 Metode Uji Antiinflamasi ... 17

2.6 Karagenan ... 19

BAB III METODE PENELITIAN ... 21

3.1 Alat-alat dan Bahan ... 21

3.1.1 Alat-alat ... . 21

3.1.2 Bahan ... 21

3.2 Penyiapan Sampel ... 22

3.2.1 Pengumpulan Sampel ... 22

3.2.3 pembuatan simplisia Daun Sembukan ... 22

3.2.4 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Sembukan ... 22

3.3 Pemeriksaan Karakterisasi Simplisia Daun Sembukan ... 23

3.3.1 Pemeriksaan Maksroskopik ... 23

3.3.2 Pemeriksaan Mikroskopik ... 23

3.3.3 Penetapan Kadar Air ... 24

3.3.4 Penetapan Kadar Sari Larut Dalam Air ... 25

3.3.5 Penetapan Kadar Sari Larut Dalam Etanol ... 25

3.3.6 Penetapan Kadar Abu Total ... 25

3.3.7 Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Dalam Asam ... 26

3.4 Skrining Fitokimia ... 26

3.4.1 Pemeriksaan Alkaloida ... 26

3.4.2 Pemeriksaan Flavanoid ... 27

3.4.3 Pemeriksaan Tanin ... 27

3.4.4 Pemeriksaan Glikosida ... 27

3.4.5 Pemeriksaan Saponin ... 28

3.4.6 Pemeriksaan Steroid/triterpenoid ... 28

3.5 Uji Efek Antiinflamasi ... 28

3.5.1 Pembuatan Suspensi Na-CMC 0,5% ... 28

3.5.2 Pembuatan Suspensi Natrium diklofenak ... 29

3.5.3 Pembuatan Suspensi (EEDS) ... 29

3.5.4 Pembuatan Larutan λ-Karagenan 1% ... 29

3.5.7 Pengujian Efek Antiinflamasi ... 30

3.6 Perhitungan % Radang dan % Inhibisi ... 31

3.6.1 % Radang ... 31

3.6.2 % Inhibisi ... 31

3.7 Analisis Data ... 32

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 33

4.1 Hasil Identifikasi Sampel ... 33

4.2 Hasil Karakteristik Simplisia... 33

4.2.1 Hasil Pemeriksaan Makroskopik ... 33

4.2.2 Hasil Pemeriksaan Mikroskopik ... 33

4.2.3 Hasil Pemeriksaan Karakteristik Serbuk Simplisia ... 34

4.3 Hasil Skrining Fitokimia ... 35

4.4 Hasil Pengujian Efek Antiinflamasi ... 36

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 45

5.1 Kesimpulan ... 45

5.2 Saran ... 45

DAFTAR PUSTAKA ... 46

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

4.1 Hasil pemeriksaan karakteristik serbuk simplisia ... 34 4.2 Hasil skrining fitokimia simplisia ... 35

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

1.1 Kerangka Pikir Penelitian………. ... 5 4.1 Grafik Persen Radang Rata-rata Telapak Kaki Tikus ... 38 4.2 Grafik Inhibisi Radang Rata-rata Telapak Kaki Tikus ... 39

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1 Hasil Identifikasi Sampel ... 46

2 Surat Persetujuan Etik Penelitian ... 47

3 Gambar Tumbuhan Daun Sembukan ... 48

4 Simplisia dan Serbuk Simplisia Daun Sembukan ... 49

5 Hasil Mikroskopik Daun Sembukan ... 50

6 Perhitungan Hasil Karakteristik Simplisia Daun Sembukan ... 51

7 Bagan Alur Uji Pendahuluan ... 55

8 Bagan Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Sembukan ... 56

9 Bagan Kerja Antiinflamasi ... 57

10 Alat Pletismometer ... 58

11 Hewan Percobaan ... 59

12 Telapak Kaki Tikus ... 60

13 Contoh Perhitungan Dosis ... 61

14 Contoh Perhitungan % Radang Dan % Inhibisi ... 63

15 Tabel Data Penelitian... 64

16 Tabel Data Persen Radang ... 66

17 Tabel Data Inhibisi ... 68

18 Hasil Analisis Deskriptif Persen Radang ... 66

19 Hasil Uji Analisis Variansi (ANOVA) One Way ... 69