BAB III METODE PENELITIAN
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian ini merupakan jenis penelitian eksperimental karena ada subjek uji yang dikenakan manipulasi perlakuan.
B. Variabel-variabel Penelitian
Variabel–variabel yang digunakan dalam penelitian ini meliputi :
1. Variabel bebas
Dalam penelitian ini variabel bebasnya adalah konsentrasi ekstrak etanol dan jenis teh teh hijau dan teh hitam.
2. Variabel tergantung
Dalam penelitian ini variabel tergantungnya adalah persen scavenging dan ES
50
.
3. Variabel pengacau
a Variabel pengacau terkendali
Variabel pengacau terkendali dalam penelitian ini adalah merk teh hijau dan teh hitam, bahan-bahan kimia dan alat-alat yang digunakan selama penelitian,
waktu dan lama penyarian, volume cairan penyari yang digunakan, suhu dan waktu inkubasi larutan uji aktivitas penangkapan radikal hidroksil.
32 PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
b Variabel pengacau tidak terkendali
Jenis dan varietas teh, kondisi iklim, media tanam, ketinggian tempat penanaman teh.
C. Definisi Operasional
1. Ekstrak etanol teh hijau dan teh hitam yang dianalisis dihasilkan melalui
proses remaserasi dengan etanol 70 pada teh hijau dan teh hitam merk X. 2.
Persen scavenging adalah persen yang menyatakan kemampuan suatu senyawa dalam menangkap radikal hidroksil.
Scavenging =
kontrol larutan
sampel larutan
kontrol larutan
Absorbansi Absorbansi
- Absorbansi
x 100 3.
Larutan kontrol merupakan larutan yang terdiri dari reagen Fenton, larutan deoksiribosa, bufer fosfat, asam trikloroasetat, dan asam tiobarbiturat.
4. Larutan sampel merupakan larutan kontrol yang telah diberi ekstrak etanol teh
hijau atau teh hitam. 5.
Effective Scavenging 50 ES
50
menyatakan besarnya konsentrasi sampel yang menghasilkan penangkapan efektif radikal hidroksil sebesar 50.
D. Bahan-Bahan Penelitian
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian adalah teh hijau dan teh hitam Merk X. Bahan-bahan kualitas p.a.E.Merck : dinatrium hidrogen fosfat
Na
2
HPO
4
, kalium dihidrogen fosfat KH
2
PO
4
, asam tiobarbiturat TBA, asam PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
trikloroasetat TCA, ferri klorida heksahidrat FeCl
3
.6H
2
O, Etilendiamintetraasetat garam dinatrium dihidrat C
10
H
14
N
2
Na
2
O
8
.2H
2
O, hidrogen peroksida larutan 30 H
2
O
2
, L + asam askorbat Vitamin C. Bahan- bahan kualitas p.a. Sigma, USA : 2-deoksi-D-ribosa. Bahan-bahan kualitas
farmasetis Brataco : etanol.. Bahan lain : akuades Laboratorium Kimia Organik Universitas Sanata Dharma.
E. Alat-Alat Penelitian
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah Spektrofotometer UV-Vis Perkin Elmer Lamda 20, pH-meter Metrohm 632, vacuum rotary
evaporator Buchi rotavapor, waterbath Labo-Tech; Heraeus, vortex Janke Kunkel, neraca elektrik Scaltec SBC 22, mikropipet 10-100µL dan 100-1000µL
Acura 825, mikropipet 0,5-5,0 ml Socorex, tabung reaksi bertutup Schott- Germany, dan seperangkat alat gelas yang lazim digunakan di laboratorium
analisis.
F. Tata Cara Penelitian 1.