30
bersifat polar dan menurut Devehat et a.l, 2002, menyatakan bahwa daun benalu S. ferruginea Jack Danser mengandung senyawa fenolik seperti ikarisid B2, avikulin,
katekin, epikatekin, epikatekin3-O-galat dan epikgalokatekin-3-0-galat.Saat pelarut etil asetat dicampurkan bersama fase air maka yang terlihat bahwa fase etil asetat
berada pada bagian atas dan fase air berada pada bagian bawah dikarenakan air memiliki berat jenis lebih besar dari etil asetat. Fraksinasi dilakukan sebanyak tiga
kali. Fase etil asetat dikumpulkan untuk dilakukan penguapan menggunakan
vacuum rotary evaporator hingga tidak lagi terlihat tetesan etil asetat pada kondensor pendingin yang diembunkan tertampung pada labu alas bulat. Setelah dirotary,
fraksi ditampung pada cawan porselin yang sebelumnya sudah ditimbang agar dapat dihitung berat fraksi tersebut lalu dikeringkan pada waterbath sampai memperoleh
bobot tetap, kemudian ditutup menggunakan alumunium foil agar tidak terpapar sinar uv yang dapat merusak senyawa didalamnya dan disimpan dalam deksikator agar
tidak lembab dan tahan lama sehingga sampel fraksi etil asetat ekstrak etanolikdaun benalu S. ferruginea Jack Danser untuk bisa digunakan pada rentang waktu yang
lama. Bobot total fraksi yang diperoleh 1,8567 g dengan rendemen 1,2378.
F. Hasil Uji Pendahuluan 1. Uji pendahuluan aktivitas antioksidan
Uji ini sebagai uji kualitatif yang bertujuan untuk mengetahui aktivitas antioksidan dari fraksi etil asetat ekstrak etanol benalu S. ferruginea Jack Danser.
Uji ini dilakukan dengan mencampurkan antara larutan DPPH dan larutan fraksi lalu PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
31
diamati perubahan warnanya. Metode DPPH memiliki prinsip yaitu setiap senyawa yang dapat menangkap radikal bebas DPPH akan terlihat dengan mengamati
perubahan warna dari warna ungu menjadi kuning akibat senyawa antioksidan bereaksi dengan DPPH.
Uji aktivitas antioksidan dengan metode DPPH dilakukan berdasarkan senyawa antioksidan mampu menghambat radikal bebas dengan mendonorkan atom-
atom hidrogen kepada DPPH dan DPPH dikenal sebagai radikal bebas yang stabil pada suhu ruangan. Reaksi DPPH dengan antioksidan akan menetralkan radikal bebas
dari DPPH dan membentuk DPPH tereduksi.
Gambar 1. Hasil uji pendahuluan aktivitas antioksidan
A = DPPH + Metanol; B = DPPH+Larutan fraksi etil asetat ekstrak etanol daun benalu S. ferruginea Jack
Danser+ Metanol;
C = DPPH + Kuersetin + Metanol; D = Metanol + Larutan Fraksi etil asetat ekstrak etanolik benalu S. ferruginea Jack
Danser;
E = Kuersetin + Metanol.
32
Pengujian menggunakan fraksi etil asetat benalu ekstrak etanol daun benalu S. ferruginea Jack Danser yang dicampur DPPH, telah menunjukkan perubahan warna
dari ungu menjadi kuning sehingga dapat disimpulkan bahwa fraksi etil asetat benalu ekstrak etanol daun benalu S. ferruginea Jack Danser dari inang tanaman T. aurea
Pohon bunga terompet memiliki aktivitas antioksidan. Gambar 1
2. Uji pendahuluan keberadaan senyawa fenolik
Uji ini merupakan uji kualitatif yang bertujuan untuk mengetahui keberadaansenyawa fenolik dari fraksi etil asetat ekstrak etanol daun benalu S.
ferruginea Jack Danser. Uji ini dilakukan dengan mencampurkan antara larutan fraksi bersama reagen Folin-Ciocalteu dan natrium karbonat. Reagen Folin-Ciocalteu
digunakan karena senyawa fenolik dapat bereaksi dengan Folin yang akan membentuk larutan berwarna biru. Senyawa fenolik bereaksi dengan reagen Folin-
Ciocalteu hanya dalam suasana basa agar terjadi disosiasi proton pada senyawa menjadi ion fenolat. Menurut Susanti et.al., 2012 untuk membuat kondisi basa
digunakan Na
2
CO
3
.Folin-Ciocalteu akan mengoksidasi asam fenolat garam alkali atau gugus fenolik yang terdapat didalam fraksi daun benalu yang mereduksi asam
heteropoli fosfomolibdat-fosfotungstat yang terdapat dalam pereaksi Folin- Ciocalteu menjadi suatu kompleks molybdenum-tungsten.
33
Gambar 2. Hasil Uji pendahuluan keberadaan senyawa fenolik dalam fraksi etil asetat ekstrak etanolik daun benalu S. ferruginea Jack Danser
A = kontrol positif [asam galat + reagen Folin-Ciocalteu+ Na
2
CO
3
+ metanol]; B = larutan uji fraksi + reagen Folin-Ciocalteu + Na
2
CO
3
+metanol; C = Asam galat + Metanol;
D = Larutan blangko [air + metanol + reagen Folin Ciocalteu + Na
2
CO
3
] , E = Fraksi + metanol.
Pengujian dengan mencampurkan antara larutan fraksi dengan reagen Folin- Ciocalteu dan natrium karbonat menunjukkan warna biru muda sehingga dapat
disimpulkan bahwa fraksi etil asetat ekstrak etanol daun benalu S. ferruginea Jack Danser mengandung senyawa fenolik. Semakin tinggi konsentrasi senyawa fenolik
maka semakin banyak ion fenolat yang mereduksi fosfomolibdat-fosfotungstat padareagen Folin-Ciocalteu menjadi kompleks molybdenum-tungsten sehingga
warna biru akan semakin pekat. Gambar 2. Penggunaan metanol dalam penelitian ini dikarenakan metanol merupakan
pelarut yang bersifat universal sehingga dapat melarutkan analit yang bersifat polar dan nonpolar. Metanol dapat menarik alkaloid, steroid, saponin, dan flavonoid dari
tanaman Thompson, 1985. PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
34
G. Hasil Optimasi Metode Uji Fenolik Total