Aquademineralisata 500 ml
Cara pembuatan: Dilarutkan 8,36 g kalium dihydrogen fosfat dalam 500 ml Aquadem. Atur
ph hingga syarat 8,0 ± 0,1 dengan kalium Hidroksida 10 N dan asam fosfat 18 N lalu dikocok hingga homogen.
3.4.9 Pembuatan Larutan Baku Pembanding Kerja
Timbang baku pembanding sesuai dengan potensi yang ada pada etiket setara dengan 100 µgml. Diperoleh larutan baku induk setara dengan potensi
baku pembanding 100 µgml ppm. Masukkan kedalam labu 50 ml, diletakkan diatas ultrasonic selama 15 menit lalu tambahkan pelarut sampai garis tanda.
Untuk larutan standar 1 S1 dipipet sebanyak 0,64 ml, S2 dipipet sebanyak 0,8 ml, S3 dipipet sebanyak 1 ml , S4 dipipet sebanyak 1,25 ml, S5
dipipet sebanyak 1,56 ml larutan diatas, masing-masing dimasukkan kedalam labu tentukur 10 ml cukupkan dengan Larutan Dapar Fosfat LDF III sampai garis
tanda dan dihomogenkan. Dimasukkan kedalam vial yang berbeda setiap larutan
standar. 3.4.10
Pembuatan Larutan Uji
Timbang 1 gr gentamisin salep kulit dalam beker gelas 50 ml. Tambahkan 5 ml larutan dapar fosfat LDF III, panaskan diatas hot plate hingga larut.
Dibuang lapisan atas vaseline, dimasukkan lapisan bawah filtrat kedalam labu 10 ml lalu tambahkan pelarut sampai garis tanda.
3.4.11 Penandaan Cawan
Kelompokkan cawan petri menjadi 5 kelompok, masing-masing terdiri dari 3 cawan petri. Pada bagian bawah bagian luar cawan petri beri tanda titik 6
buah ring dengan 3 titik untuk S1 dan 3 titik untuk S3 secara selang-seling. Pada bagian bawah sebelah luar cawan petri kelompok 2, beri tanda titik 6 buah ring
dengan 3 buah untuk S2 dan 3 buah untuk S3 secara berselang-seling. Seterusnya
sampai S4, S5 dan U. 3.4.12
Pembuatan Inokulum
Bakteri Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 di biakkan kedalam media non selektif. Digoreskan ke dalam tabung reaksi, inkubasi selama 24 jam
pada suhu 35 - 37ºC. Siapkan media antibiotik No.1 sebanyak 250 ml masukkan kedalam botol roux. Pada biakan bakteri ditambahkan 3 ml NaCl 0,9 dikocok
sampai larut lalu masukkan kedalam tabung. Inkubasi selama 1 minggu pada suhu 35-37
o
C. Setelah 1 minggu kedalam botol roux ditambahkan 40 ml larutan NaCl 0,9, kocok sampai semua bakteri terlarut. Pindahkan suspensi bakteri kedalam
erlenmeyer 250 ml. Simpan ke lemari pendingin dengan masa simpan 1 bulan
suhu 2 - 8ºC. 3.4.13
Penyiapan Media
Tuangkan 15 ml larutan antibiotik medium No.1 kedalam cawan petri, ratakan lalu diamkan hingga memadat. Tambahkan 5 ml suspensi bakteri kedalam
cawan petri lalu homogenkan dan diamkan.
