Pembuatan Larutan Baku Pembanding Kerja

3.4.11 Penandaan Cawan

Kelompokkan cawan petri menjadi 5 kelompok, masing-masing terdiri dari 3 cawan petri. Pada bagian bawah bagian luar cawan petri beri tanda titik 6 buah ring dengan 3 titik untuk S1 dan 3 titik untuk S3 secara selang-seling. Pada bagian bawah sebelah luar cawan petri kelompok 2, beri tanda titik 6 buah ring dengan 3 buah untuk S2 dan 3 buah untuk S3 secara berselang-seling. Seterusnya sampai S4, S5 dan U. 3.4.12 Pembuatan Inokulum Bakteri Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 di biakkan kedalam media non selektif. Digoreskan ke dalam tabung reaksi, inkubasi selama 24 jam pada suhu 35 - 37ºC. Siapkan media antibiotik No.1 sebanyak 250 ml masukkan kedalam botol roux. Pada biakan bakteri ditambahkan 3 ml NaCl 0,9 dikocok sampai larut lalu masukkan kedalam tabung. Inkubasi selama 1 minggu pada suhu 35-37 o C. Setelah 1 minggu kedalam botol roux ditambahkan 40 ml larutan NaCl 0,9, kocok sampai semua bakteri terlarut. Pindahkan suspensi bakteri kedalam erlenmeyer 250 ml. Simpan ke lemari pendingin dengan masa simpan 1 bulan suhu 2 - 8ºC. 3.4.13 Penyiapan Media Tuangkan 15 ml larutan antibiotik medium No.1 kedalam cawan petri, ratakan lalu diamkan hingga memadat. Tambahkan 5 ml suspensi bakteri kedalam cawan petri lalu homogenkan dan diamkan.

3.4.14 Penetapan Potensi

Masukkan 6 buah ring kedalam cawan petri secara perlahan sesuai dengan tanda jangan sampai ke dasar lakukan pada 15 buah cawan petri yang sudah diberi tanda, dengan menggunakan mikro pipet teteskan 100 µl larutan S1 S3 kedalam ring sesuai dengan penandaan untuk ketiga cawan petri pada kelompok 1. Begitu seterus nya untuk S2 dan S3 kelompok 2, S4 dan S3 kelompok 3, S5 dan S3 kelompok 4 dan U dan S3 kelompok 5. Inkubasi selama 24 jam pada suhu 35- 37 o C. Lalu ukur zona hambatnya.

3.5 Perhitungan

a = Ʃx² . Ʃy – Ʃx . Ʃxy n. Ʃx² – Ʃx² b = n . Ʃxy Ʃx . Ʃxy n. Ʃx² – Ʃx² x = log S dari S3 y= a + bx Yu= [ y + U-S3u] Xu= Yu - a b Dosis U = 10 Xu Potensi U = Dosis U Dosis S3 � 100 Potensi = Potensi U 100 � Potensi baku pembanding sekunder