18 gelas piala, tabung reaksi, pipet tetes, tabung reaksi, sendok, rotari evaporator,
botol, aluminium foil, dan kandang mencit.
3.3 Tahapan Penelitian
Penelitian ini terdiri dari beberapa tahap. Tahap pertama yaitu pengolahan rumput laut coklat Sargassum sp. kering. Tahap kedua yaitu pembuatan ekstrak
dari rumput laut coklat Sargassum sp. kering tersebut. Terhadap rumput laut coklat Sargassum sp. kering dilakukan uji proksimat, sedangkan terhadap
ekstraknya dilakukan uji fitokimia. Tahap selanjutnya yaitu proses pembuatan serbuk minuman ekstrak
rumput laut coklat Sargassum sp. yang diuji kadar flavonoidnya secara kuantitatif. Tahap yang terakhir yaitu pengujian efektivitasnya dalam menurunkan
bobot badan yang diujikan pada mencit. Pengujian yang dilakukan yaitu bobot badan mencit, berat feses mencit dan kadar lemak dalam feses mencit.
3.3.1 Proses pengolahan rumput laut coklat Sargassum sp. kering
Rumput laut coklat jenis Sargassum sp. yang digunakan untuk penelitian diambil dari Pantai Sukahujan, Kecamatan Cihara, Kabupaten Lebak, Provinsi
Banten. Proses pengolahan rumput laut coklat Sargassum sp. kering dimulai dengan proses pencucian, pengeringan, penggilingan, dan produk jadi. Rumput
laut segar dicuci dengan menggunakan air tawar untuk menghilangkan kotoran, lumut, lumpur, dan pasir. Rumput laut kemudian dibagi menjadi dua bagian untuk
dibedakan dalam proses pengeringan, yaitu satu bagian menggunakan sinar matahari dan satu bagian lagi menggunakan oven dengan suhu 60
o
C. Masing- masing bagian rumput laut yang telah kering kemudian digiling menggunakan
blender hingga berukuran kecil menyerupai bentuk teh. Produk yang telah jadi selanjutnya dikemas menggunakan plastik untuk mempertahankan mutunya.
Selanjutnya terhadap masing-masing produk dilakukan analisis proksimat yang meliputi kadar air, abu, lemak, protein, dan karbohidrat secara by difference.
Diagram alir proses pengolahan rumput laut coklat Sargassum sp. kering dapat dilihat pada Gambar 2.
19 Gambar 2 Diagram alir proses pembuatan rumput laut coklat Sargassum sp.
kering = modifikasi dari Nurdayat 2005
3.3.2 Proses pembuatan ekstrak rumput laut coklat Sargassum sp. kering
Pada proses pembuatan ekstrak ini menggunakan rumput laut yang telah kering dan telah digiling. Ekstraksi dilakukan untuk menghasilkan ekstrak kasar
dari Sargassum sp. kering dengan menggunakan pelarut. Pelarut yang digunakan adalah pelarut polar yaitu akuabides. Metode ekstraksi yang dilakukan
berdasarkan Lemhadri et. al. 2007 yang dimodifikasi dengan menggunakan ekstraksi tunggal.
Ekstraksi dilakukan dengan memanaskan akuabides sebanyak 375 ml dalam gelas piala hingga suhu 100
o
C. Sargassum sp. kering yang telah digiling dimasukkan ke dalam gelas piala sebanyak 25 gr sehingga diperoleh perbandingan
bahan dan pelarut 1:15 wv. Sampel dan pelarut dipanaskan selama 20 menit dengan selalu diaduk. Setelah dingin, sampel disaring menggunakan kain blacu
yang dilanjutkan dengan kertas saring untuk memisahkan filtrat dan ampasnya. Pencucian
Matahari Rumput laut coklat
Sargassum sp. segar
Produk rumput laut coklat Sargassum sp. kering
Oven 60
o
C Pengeringan
Penggilingan Pengemasan
20 Filtrat yang diperoleh dimasukkan ke dalam botol yang dilapisi aluminium foil
dan disimpan dalam lemari es sampai waktu evaporasi. Evaporasi dilakukan pada suhu 54
o
C sehingga diperoleh ekstrak kasar. Ekstrak kasar ini selanjutnya dimasukkan dalam botol untuk dilakukan uji fitokimia secara kualitatif dengan
metode Harbone 1987. Proses ekstraksi dapat dilihat pada Gambar 3.
Gambar 3 Diagram alir proses ekstraksi rumput laut coklat sargassum sp. kering dengan pelarut akuabides = modifikasi dari Lemhadri et al. 2007
3.3.3 Proses pembuatan serbuk minuman ekstrak rumput laut coklat Sargassum sp.
Proses pembuatan serbuk minuman ekstrak rumput laut coklat Sargassum sp. mengacu pada proses pembuatan ekstrak dari rumput laut coklat Sargassum
sp. kering dengan beberapa modifikasi. Proses pengolahan dimulai dengan Rumput laut coklat
Sargassum sp. kering
Penimbangan 25 gr
Pemanasan selama 20 menit dalam pelarut akuabides 375 ml mv
suhu 100
o
C
Residu
Evaporasi
Ekstrak kasar Filtrat
Penyaringan
21 memasak rumput laut coklat Sargassum sp. kering dalam pelarut akuades
dengan perbandingan 1:15 wv. Akuades di dalam panci dipanaskan hingga suhunya mencapai 100
o
C, kemudian rumput laut coklat Sargassum sp. kering dimasukkan ke dalam panci dan dimasak selama 20 menit dengan selalu diaduk.
Setelah dingin, disaring menggunakan saringan dan dilanjutkan dengan menggunakan kain blacu. Hal ini dimaksudkan untuk memisahkan filtrat dengan
ampasnya. Setelah itu, filtrat yang diperoleh dikeringkan dengan spray dryer sehingga diperoleh serbuk minuman rumput laut coklat Sargassum sp.. Serbuk
yang diperoleh selanjutnya diuji kadar flavonoid totalnya. Diagram alir proses pembuatan serbuk minuman rumput laut coklat Sargassum sp. dapat dilihat pada
Gambar 4.
Gambar 4 Diagram alir proses pembuatan serbuk minuman ekstrak rumput laut coklat sargassum sp. = modifikasi dari Lemhadri et al. 2007
Rumput laut coklat Sargassum sp. kering
Penimbangan Pemasakan Sargassum selama 20
menit dalam pelarut akuades 1:15, suhu 100
o
C
Ampas
Pengeringan dengan spray dryer
Serbuk minuman ekstrak rumput laut coklat
Sargassum sp. Filtrat
Penyaringan
22
3.3.4 Proses pengujian efektivitas serbuk minuman ekstrak rumput laut coklat Sargassum sp. sebagai minuman pelangsing tubuh
Proses pengujian efektivitas serbuk minuman ekstrak rumput laut coklat Sargassum sp. sebagai minuman pelangsing tubuh dilakukan secara in vivo pada
mencit. Metode yang digunakan mengacu pada penelitian Xia et al. 2010 dan
Lemhadri
et al. 2007 dengan beberapa modifikasi. Hewan coba yang digunakan pada penelitian ini adalah mencit Mus musculus jantan dengan umur ± 25 hari
sebanyak 20 ekor. Hewan coba ini diperoleh dari Kandang Hewan Coba, Fakultas Kedokteran Hewan, Institut Pertanian Bogor. Pemeliharaan mencit sebagai hewan
coba dilakukan selama 3 minggu. Mencit-mencit tersebut dibagi secara acak ke dalam 5 kelompok yaitu kelompok perlakuan A, B, C, D, dan E, masing-masing
berjumlah 4 ekor. Sebelum dikelompokkan hewan coba tersebut ditimbang bobot badannya terlebih dahulu. Masa adaptasi dilakukan selama 1 minggu dan masa
perlakuan selama 2 minggu. Selama masa adaptasi kelompok A diberikan pakan standar, sedangkan kelompok B, C, D, dan E diberikan pakan berlemak.
Pada masa adaptasi semua kelompok diberikan minuman yang sama yaitu air putih yang bersumber dari air PDAM. Selama masa perlakuan kelompok A
tetap diberikan pakan standar dan minum air putih, sedangkan kelompok B, C, D, dan E diberikan pakan berlemak dan minuman ekstrak rumput laut coklat
Sargassum sp. dengan konsentrasi di dalamnya masing-masing 0, 1, 2, dan 3. Pembuatan minuman ekstrak rumput laut coklat sargassum sp.
dilakukan dengan menyeduh serbuk minuman ekstrak rumput laut coklat sargassum sp. menggunakan air mendidih sebanyak 30 ml. Pakan dan minum
diberikan setiap hari secara ad libitum. Pengujian meliputi penimbangan bobot badan mencit yang dilakukan setiap 3 hari sekali, sedangkan penimbangan feses
dilakukan setiap hari dan analisis kadar lemak dalam feses mencit dilakukan di akhir masa perlakuan. Diagram alir proses pengujian efektivitas serbuk minuman
ekstrak rumput laut coklat Sargassum sp. sebagai minuman pelangsing tubuh dapat dilihat pada Gambar 5.
23 Gambar 5 Diagram alir proses pengujian efektivitas serbuk minuman ekstrak
rumput laut coklat Sargassum sp. sebagai minuman pelangsing tubuh = modifikasi dari Xia et al. 2010 dan = modifikasi dari
Lemhadri
et al. 2007
Masa perlakuan selama 15 hari Kelompok A :
Pakan standar
Kelompok B : Pakan berlemak
Kelompok C : Pakan berlemak
Kelompok D : Pakan berlemak
Kelompok E : Pakan berlemak
Penimbangan awal
Masa adaptasi 6 hari
Mencit
Pengelompokan perlakuan
Kelompok A Kelompok B
Kelompok C Kelompok D
Kelompok E
Kelompok A : Air putih
Kelompok B : Minuman ekstrak
rumput laut Sargassum 0
Kelompok C : Minuman ekstrak
rumput laut Sargassum 1
Kelompok D : Minuman ekstrak
rumput laut Sargassum 2
Kelompok E : Minuman ekstrak
rumput laut Sargassum 3
Pengujian : penimbangan bobot badan, penimbangan
berat feses dan kadar lemak feses
24
3.4 Prosedur Analisis
