Waktu dan Tempat Alat dan Bahan Metode Penelitian

BAB 3 BAHAN DAN METODE

3.1 Waktu dan Tempat

Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Maret 2014 sampai dengan bulan Oktober 2014, di Laboratorium Kultur Jaringan Tumbuhan Departemen Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sumatera Utara, dan Laboratorium Pengujian Mutu dan Residu Pestisida Unit Pelaksana Teknis Perlindungan Tanaman Pangan dan Hortikultura Medan.

3.2 Alat dan Bahan

Adapun alat yang digunakan antara lain; botol kultur, pisau kultur, pinset, otoklaf, oven, cawan petri, erlenmeyer, gelas ukur, gelas beaker, neraca analitik, jarum ose bengkok, pipet serologi, pro pipet, pipet tetes, tabung reaksi, bunsen, botol vial, corong, corong pisah, statif dan klem, spatula, alu dan mortar, termometer, rotarievaporator, sonikator, kertas saring Whatman 0,2 μm, jarum syringe, hockey stick, vortex, sentrifuge, hot plate, shaker, High Performance Liquid Chromatography HPLC Shimadzu LC-20 AD UV-Visible Detectorkolom C 18 waters μ bondapak 150 L x 4,6 mm STR ODS II. Sedangkan bahan yang digunakan antara lain; aluminium foil, cling wrap, plastik tahan panas, karet gelang, ragi Saccharomyces cerevisiae, medium PCA Plate Count Agar, medium GYE Glucose Yeast Extract, larutan standar katekin konsentrasi 50; 100; 150; 200; 250; 300; 350; 400 mgL, medium MS Murashige Skoog, zat pengatur tumbuh 2,4-D Diklorofenoksi-asetat 1 mgL, kinetin 1 mgL, daun teh Camellia sinensis L., larutan Na-hipoklorit 3, larutan HgCl 2 0,1, akuades steril, alkohol 70, akuabides, etanol, kloroform, etil asetat grade for HPLC.

3.3 Metode Penelitian

Penelitian ini menggunakan metode percobaan dengan Rancangan Acak Lengkap RAL non faktorial yaitu: Medium kultur medium MS + 1 mgL 2,4-D + 1 mgL Universitas Sumatera Utara kinetin ditambahkan elisitor dinding sel Saccharomyces cerevisiae dengan beberapa tingkatan konsentrasi sebagai perlakuan. A= Kontrol tanpa elisitor D = Konsentrasi elisitor 1,00 B= Konsentrasi elisitor 0,25 E = Konsentrasi elisitor 2,00 C= Konsentrasi elisitor 0,50 F = Konsentrasi elisitor 4,00 Berdasarkan rancangan penelitian di atas diperoleh 6 perlakuan dengan masing-masing ulangan sebanyak 3 ulangan sehingga diperoleh jumlah total sebanyak 18 botol. 3.4 Bahan Penelitian 3.4.1 Bahan Tanaman