Kemampuan untuk mengembangkan ketahanan terinduksi sebagai respon terhadap rizobakteri telah dibuktikan pada beberapa spesies tanaman Van Loon
et al
., 1998 dan tampaknya tergantung pada kekhususan interaksi antara rizobakteri dan tanaman Van Loon, 2007. Kegagalan untuk menginduksi ketahanan pada
inang tertentu mungkin disebabkan karena tidak adanya produksi komponen penginduksi di dalam rizosfer atau ketidak mampuan spesies tanaman tertentu
untuk merespon senyawa tersebut Van Loon, 2007. Fakta menunjukkan bahwa diperlukan pengenalan khusus antara tanaman dan rizobakteri untuk menginduksi
ketahanan. Sebagai contoh,
Pseudomonas putida
WCS358r dan
P. fluorescens
WCS374r bekerja dengan cara berbeda tergantung pada spesies tanaman. Pada tanaman
Arabidopsis
, WCS358r menginduksi ketahanan, tetapi tidak pada lobak dan carnation Van Peer
et al
., 1991; Van Peer and Schippers, 1992; Van Wees
et al
., 1997. Sebaliknya, tanaman lobak responsif terhadap
P. fluorescens
WCS374r, tetapi tanaman
Arabidopsis
tidak responsif Leeman
et al
., 1995; Van Wees
et al
., 1997.
BAB III METODE PENELITIAN
3.1. Koleksi Benih Padi Lokal Bali
Kegiatan pengumpulan benih padi lokal Bali akan dilakukan di seluruh Bali, baik dari pertanaman maupun dari penyimpanan yang dilakukan oleh petani dan Balai Pusat
Sertifikasi Benih BPSB Bali. Beberapa informasi dicatat pada saat melakukan pengumpulan benih yang meliputi nama varietas, lokasi, grup cere atau bulu, umur
genjah atau dalam dan informasi lain yang terkait.
3.2. Uji Ketahanan terhadap Penyakit Blas
Uji ketahanan terhadap penyakit blas dilakukan terhadap semua varietas padi lokal Bali yang berhasil dikumpulkan dan ditumbuhkan. Benih untuk setiap varietas
ditanam pada nampan plastik ukuran 30 x 15 x 5 cm yang diisi media tanah subur dan kompos dengan perbandingan 3:1 ditambahkan pupuk Urea, SP-36 dan KCl masing-
masing sebanyak 6 g, 3 g dan 2 g per nampan. Penambahan pupuk dilakukan sehari sebelum tanam. Benih ditanam pada jarak tanam 3 cm x 4 cm
Inokulasi dengan suspensi spora jamur
Pyricularia oryzae
dilakukan pada tanaman berumur 18 hari sejak tanam. Jamur dibiakan pada media
rice floor agar
dalam 1 liter mengandung 20 gram tepung beras, 2,5 gram yeast extract, 1,5 agar dan air
suling diinkubasi selama 2 minggu pada suhu 28 – 30
o
C. Spora jamur dipanen dengan membasuh cawan Petri dengan 5-7 ml air steril mengandung 0,5 gelatin,
disaring dengan kain kasa 4 lapis, segera ditempatkan pada wadah dengan berisi es untuk mencegah perkecambahan spora. Konsentrasi spora diatur menjadi 10
6
sporaml. Inokulasi jamur dilakukan pada petang hari dengan menyemprotkan suspensi spora sebanyak 50 ml per nampan. Segera setelah inokulasi, nampan
dimasukkan ke dalam ruang lembab selama 48 jam dengan kelembaban lebih dari 90. Selanjutnya nampan dipindahkan ke dalam rumah kaca dengan alasnya kain
goni basah untuk mempertahankan kelembaban. Pengamatan dilakukan setiap hari selama 7 hari untuk menentukan masa
inkubasi yaitu waktu antara waktu inokulasi dengan munculnya gejala penyakit blas. Skala penyakit blas ditentukan pada umur 7 hari setelah inokulasi dengan
mengamati seluruh daun yang sudah membuka sempurna. Penentuan ketahanan terhadap penyakit blas ditentukan berdasarkan sistem evaluasi standar untuk
penyakit blas daun yang dikembangkan IRRI 1996 dengan ketentuan : -
Skala 0-2 = tahan -
Skala 3 = moderat tahan -
Skala 4-6 moderat rentan -
Skala 7-9 = rentan Penentuan intensitas penyakit dilakukan dengan rumus :
IP =
100 x
V x
N v
x ni
Σ
Keterangan: IP: intensitas penyakit
ni : banyak sampel dengan skala i N : banyak semua daun sampel
V : skala keparahan tertinggi v : skala keparahan penyakit 0-9
Tabel.1 Skor penilaian tingkat serangan jamur
P.oryzae
IRRI, 1996 -
Skor Skala Kerusakan
Tidak ada bercak 1
Bercak sebesar ujung daun 2
Bercak lebih besar dari ujung daun 3
Bercak nekrotik, abu-abu, bundar, sedikit memanjang, ukuran 1-2 mm, tepi coklat
4 Bercak khas blas belah ketupat, luas daun terserang kurang 2
5 Bercak khas blas, luas daun terserang 2
– 10 6
Bercak khas blas, luas daun terserang 11 – 25
7 Bercak khas blas, luas daun terserang 26
– 50 8
Bercak khas blas, luas daun terserang 51 – 75 , beberapa daun mulai mati
9 Semua daun mati
3.3. Isolasi Rizobakteri
