c. Variasi waktu
Yang dimaksud variasi waktu pemberian adalah pemberian ekstrak metanol-air biji P.americana pada hewan uji secara berturut-turut
dengan selang waktu 1,4 dan 6jam sebelum penginduksian hepatotoksin karbon tetraklorida.
C. Subjek dan Bahan Penelitian
1. Subjek penelitian
Subjek uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah tikus jantan galur Wistar dengan berat badan 150 – 250 gram dan berumur 2 – 3
bulan yang diperoleh dari Laboratorium Hayati Imono Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
2. Bahan utama
Bahan uji yang digunakan adalah biji P.americana yang diperoleh dari Padang, Sumatera Barat pada bulan Januari 2013.
3. Bahan Kimia
a. Senyawa hepatotoksin yang digunakan adalah karbon tetraklorida E.
Merck®, Darmstadt, Germany yang diperoleh dari Laboratorium Kimia Analisis Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma
Yogyakarta. Konsentrasi karbon tetraklorida yang digunakan adalah 50 dengan dosis 2mlkg BB.
b. Pelarut senyawa hepatotoksin yang digunakan adalah olive oil
Bertolli®.
c. Kontrol negatif yang digunakan adalah olive oil Bertolli®
d. Bahan pengektrak serbuk biji alpukat yaitu metanol teknis PT.
Brataco dengan konsentrasi 99 yang diencerkan hingga konsentrasi 70 menggunakan pengencer aquadest.
e. Bahan pelarut aquadest diperoleh dari Laboratorium Farmakologi
Toksikologi Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma. f.
Natrium-Carboxymethyl Cellulosa CMC-Na sebagai pelarut ekstrak kental dari biji P.americana berupa serbuk, berwarna putih yang
diperoleh dari Laboratorium Biofarmasetika Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
g. Blanko pengukuran aktivitas ALT dan AST serum yang digunakan
adalah aqua bidestilata yang diperoleh dari Laboratorium Kimia Analisis dan Instrumental Fakultas Farmasi Universitas Sanata
Dharma. h.
Reagen DyaSyss untuk mengukur aktivitas serum ALT dan AST berupa reagen SGPT dan SGOT
i. Serum ALT
Reagen serum yang digunakan adalah reagen serum ALT DyaSyss. Komposisi dan konsentrasi dari reagen serum ALT adalah sebagai
berikut: R1: TRIS pH 7,15 140 mmolL
L-Alanine 700 mmolL LDH lactatedehydrogenase 2300 UL
R2: 2-Oxoglutarate 85 mmolL NADH 1 mmolL
Pyridoxal-5-phosphate FS: Good’s buffer pH 9,6 100 mmolL
Pyridoxal-5-phosphate 13 mmolL j.
Serum AST Reagen serum yang digunakan adalah reagen serum AST DyaSyss.
Komposisi dan konsentrasi dari reagen serum AST adalah sebagai berikut:
R1: TRIS pH 7,65 110 mmolL L-Aspartate 320 mmolL
MDHmalatedehydrogenase 800 UL LDHlactatedehydrogenase 1200 UL
R2: 2-Oxoglutarate 65 mmolL NADH 1mmolL
Pyridoxal-5-phosphate FS: Good’s buffer pH 9,6 100 mmolL
Pyridoxal-5-phosphate 13mmolL
D. Alat Penelitian
