Tes ini digunakan untuk membedakan monosakarida dari disakarida dengan mengontrol pH dan waktu pemanasan. Uji Barfoed adalah tes reduksi yang dilakukan dalam medium asam.
Keasaman membuatnya menjadi agen pengoksidasi yang lemah. Oleh karena itu hanya monosakarida yang akan mereduksi ion tembaga. Namun, jika pemanasan berkepanjangan,
disakarida dapat terhidrolisis oleh asam dan monosakarida yang dihasilkan akan memberikan tes positif Malhotra, 2005.
B. Tinjauan Bahan a. Reagen Molisch
Molisch yang dinamai ahli botani Austria Hans Molisch adalah reagen kimia sensitif untuk mendeteksi karbohidrat, berdasarkan dehidrasi karbohidrat oleh asam
sulfat atau asam klorida untuk menghasilkan aldehida, yang mengembun dengan dua molekul fenol biasanya α- naftol, meskipun fenol lain misalnya resorsinol, timol
juga memberikan produk berwarna, menghasilkan senyawa-merah atau ungu berwarna. Larutan uji dikombinasikan dengan sejumlah kecil Molisch yang reagen α-
naftol dilarutkan dalam etanol dalam tabung reaksi. Setelah pencampuran, sejumlah kecil asam sulfat pekat ditambahkan secara perlahan menuruni sisi miring tabung,
tanpa pencampuran, untuk membentuk lapisan. Reaksi positif ditunjukkan dengan munculnya cincin ungu pada antarmuka antara asam dan uji lapisan. Semua
karbohidrat - monosakarida, disakarida, dan polisakarida - harus memberikan reaksi positif, dan asam nukleat dan glikoprotein juga memberikan reaksi positif, karena
semua senyawa ini akhirnya dihidrolisis menjadi monosakarida oleh asam mineral kuat. Pentosa kemudian dehidrasi untuk furfural, sementara heksosa mengalami
dehidrasi sampai 5-hydroxymethylfurfural Harisha, 2005.
b. H
2
SO
4
Asam sulfat, H2SO4, merupakan asam mineral anorganik yang kuat. Zat ini larut dalam air pada semua perbandingan. Asam sulfat mempunyai banyak kegunaan
dan merupakan salah satu produk utama industri kimia. Massa molar 98, 08 gmol. Cairan bening tak berwarna dan tak berbau. Derajat keasamannya memiliki pH 3.
Kegunaan utamanya termasuk pemrosesan bijih mineral, sintesis kimia, pemrosesan air limbah dan pengilangan minyak Agamanolis, 2005.
c. Larutan Yodium
Yodium bahasa Yunani: Iodes - ungu, adalah unsur kimia pada tabel periodik yang memiliki simbol I dan nomor atom 53. Unsur ini diperlukan oleh hampir semua
mahkluk hidup. Yodium adalah halogen yang reaktivitasnya paling rendah dan paling bersifat elektropositif. Sebagai catatan, seharusnya astatin lebih rendah reaktivitasnya
dan lebih elektropositif dari pada yodium, tapi kelangkaan astatin membuat sulit untuk mengkonfirmasikan hal ini. Yodium terutama digunakan dalam medis,
fotografi, dan sebagai pewarna. Seperti halnya semua unsur halogen lain, yodium ditemukan dalam bentuk molekul diatomik Agamanolis, 2005.
d. Reagen Barfoed
Barfoed adalah reagen kimia yang digunakan untuk mendeteksi adanya monosakarida. Hal ini didasarkan pada pengurangan tembaga II asetat untuk
tembaga I oksida Cu2O, yang membentuk endapan batu bata merah Flinn, 2011. RCHO + 2Cu
2 +
+ 2H
2
O → RCOOH + Cu
2
O ↓ + 4H + Disakarida juga bereaksi, tetapi reaksi jauh lebih lambat. Kelompok aldehid dari
monosakarida yang biasanya membentuk hemiasetal siklik teroksidasi menjadi karboksilat tersebut. Sejumlah zat lain, termasuk natrium klorida, dapat mengganggu.
Hal ini ditemukan oleh kimiawan Denmark Christen Thomsen Barfoed dan terutama digunakan dalam botani. Reagen ini mirip dengan larutan Fehling untuk aldehida
Flinn, 2011.
e. Reagen Benedict
Larutan Benedict digunakan untuk menguji keberadaan gula pereduksi dalam suatu sampel. Prinsip pengujiannya sama dengan uji menggunakan larutan Fehling.
Gula pereduksi yang dapat diuji berupa monosakarida, disakarida kecuali sukrosa. Larutan Benedict akan menguji keberadaan gugus aldehida dan keton pada gula
aldosa dan ketosa. Larutan Benedict mengandung sodium sitrat, natrium karbonat anhidrat, dan tembaga sulfit. 7H
2
O, dan semua garam tersebut dilarutkan dalam air. Hasil positif yang ditunjukkan dari uji ini adalah terbentukan endapan berwarna
merah bata yang tidak larut. Endapan merah bata diakibatkan reaksi dari ion logam tembagaII direduksi menjadi tembaga I Nigam, 2007.
f. Glukosa
