23
3.7. Pemeriksaan bakteri patogen pada susu
3.7.1. Isolasi agar darah
Susu pasteurisasi diambil dengan jarum ose steril dan dioleskan diatas media agar darah. Setelah itu diinkubasi selama 24 jam pada suhu
37 C, dan diamati apakah terdapat koloni bakteri atau tidak.
3.7.2. Isolasi Endo Agar
Susu pasteurisasi diambil dengan jarum ose steril, lalu dioleskan diatas media endo agar. Setelah itu diinkubasi selama 24 jam pada suhu
37 C, dan diamati koloni bakteri yang terbentuk.
3.7.3. Isolasi Mac.Conkey
Susu pasteurisasi diambil dengan jarum ose steril dan dioleskan diatas Mac Conkey agar. setelah itu diinkubasi selama 24 jam pada suhu
27 C, dan diamati apakah terdapat koloni bakteri atau tidak.
3.7.4. Pemeriksaan pewarnaan Gram
Bakteri yang dibiakkan di media agar, dioleskan di kaca objek untuk dilakukan pewarnaan Gram dan dilihat dibawah mikroskop dengan
cara kaca objek dilewat kan diatas api Bunsen, lalu teteskan sedikit NaCl selama 5 menit dengan ose steril, oleskan kuman di atas kaca, keringkan di
udara sampai terbentuk kerak putih, lalu difiksasi di atas api Bunsen sebanyak 10 kali, dikeringkan di udara. Setelah kering dan dingin, teteskan
sedikit Gentian violet sebagai pewarna pertama dan diamkan selama 3 menit lalu dicuci, setelah itu teteskan lugol selama 1 menit lalu dicuci
dengan air, teteskan alkohol selama 30 detik, lalu dicuci. Setelah itu teteskan Safranin sebagai pewana kedua dan didiamkan selama 3 menit
lalu dicuci, keringkan dengan tissue atau kertas saring. Setelah kering, lihat dibawah mikroskop dengan pembesaran 100x, kaca objek harus
diteteskan minyak imersi terlebih dahulu agar lebih jelas, lalu amati morfologi dari bakteri tersebut.
3.7.5. Pemeriksaan uji biokimia bakteri.
Uji biokimia ini bersifat uji kualitatif, cara melakukan pemeriksaan ini yaitu bakteri yang telah diisolasi dari susu pasteurisasi pada media agar
darah dilarutkan dengan NaCl 0,95 steril, lalu diteteskan pada kit khusus
24
tes biokimiawi untuk identifikasi jenis bakteri dengan metode API, tunggu selama 15 menit, kemudian baca hasil nya secara kualitatif yaitu dengan
hasil -n dan +p.
3.8. Uji sensitivitas madu terhadap bakteri
Kategori