Alat dan Bahan Pembuatan Reagen

BAB 3 BAHAN DAN METODE PENELITIAN

3.1. Alat dan Bahan

3.1.1. Alat-Alat

- Neraca Analitik Mettler Toledo - Indikator Universal Merck - Spektrofotometer Genesys 20 - Inkubator Fisher - Labu takar Pyrex - Gelas ukur Pyrex - Gelas beaker Pyrex - Gelas erlenmeyer Pyrex - Tabung reaksi Pyrex - Rak tabung reaksi - Corong Pyrex - Penangas air Fisons - Termometer Fisher - Kertas saring - Botol akuades - Hot Plate Stirer Thermolyne - Tanur Gallenkamp - Cawan Crusible - Labu alas Pyrex - Pendingin leibigh Pyrex - Desikator

3.1.2. Bahan-Bahan

- C 6 H 12 O 6 E. Merck - Na 2 CO 3 E. Merck - KnaC 4 H 4 O 6 .4H 2 O E. Merck - NaHCO 3 E.Merck - Na 2 SO 4 E. Merck - CuSO 4 .5H 2 O E. Merck - H 2 SO 4 p E. Merck - NH 4 6 Mo 7 O 24 .4H 2 O E. Merck - Na 2 HasO 4 .7H 2 O E. Merck - Na 2 CO 3 E. Merck - NaOH E. Merck - HCl p E. Merck - Alkohol E. Merck - Akuades - Nira - Ampas kelapa

3.2. Pembuatan Reagen

3.2.1 Larutan Glukosa 20 mg100 ml

Sebanyak 20 mg glukosa anhidrat dilarutkan dengan akuades dalam labu takar 100 ml sampai garis tanda dan dikocok sampai homogen.

3.2.2 Larutan Pereaksi Nelson

1. Nelson A

Sebanyak 12,5001 g Natrium Karbonat anhidrat, 12,5001 g garam Rochelle K-Na-Tartrat, 10 g Natrium Bikarbonat, dan 100 g Natrium Sulfat anhidrat dilarutkan dalam 300 ml akuades dan diencerkan sampai 500 ml.

2. Nelson B

Sebanyak 7,5002 g CuSO 4 .5H 2 O dilarutkan dalam 50 ml akuades dan ditambahkan 1 tetes asam sulfat pekat. Pereaksi Nelson dibuat dengan cara mencampur 25 bagian Nelson A dan 1 bagian Nelson B. Pencampuran dilakukan setiap kali digunakan.

3.2.3 Larutan Arsenomolibdat

Sebanyak 25 g Ammonium Molibdat dilarutkan dalam 450 ml akuades dan ditambahkan 25 ml H 2 SO 4 . Dilarutkan pada tempat yang lain 3 g Na 2 HasO 4 .7H 2 O dalam 25 ml akuades kemudian dituangkan larutan ini kedalam larutan yang pertama. Disimpan dalam botol berwarna cokelat dan diinkubasi pada suhu 37 o C selama 24 jam. Larutan pereaksi ini dapat digunakan setelah masa inkubasi dan berwarna kuning.

3.2.4 Pembuatan Pereaksi Benedict

Dengan bantuan pemanasan, dilarutkan 173 g Na-sitrat dan 100 g Na 2 CO 3 dalam 800 ml air. Disaring lalu diencerkan sampai volume larutan 850 ml larutan I. Dilarutkan 17,3001 g CuSO 4 .5H 2 O dalam 100 ml air dipanaskan bila perlu. Bila larutan diatas sudah dingin maka perlahan-lahan ditambahkan kedalam larutan I, kemudian diencerkan dengan akuades sampai 1 liter.

3.2.5 Pembuatan Larutan NaOH 3

Sebanyak 3 g NaOH dilarutkan dengan akuades dalam labu takar 100 ml sampai garis tanda lalu dikocok hingga homogen.

3.2.6 Pembuatan Larutan HCl 30

Sebanyak 203 ml larutan HCl 37 dimasukkan kedalam labu takar 250 ml, kemudian diencerkan dengan akuades sampai garis tanda lalu dikocok sampai homogen.

3.2.7 Pembuatan Larutan H

2 SO 4 1,25 N Kedalam labu ukur 100 ml, dilarutkan 3,4 ml larutan H 2 SO p dan diencerkan dengan akuades sampai garis tanda.

3.2.8 Pembuatan NaOH 1,25 N

Kedalam labu ukur 100 ml dilarutkan 5,00 g kristal NaOH kemudian diencerkan dengan akuades sampai garis tanda.

3.3 Prosedur Penelitian