11
Gambar 2 Tikus putih Rattus norvegicus galur Sprague Dawley
.
Jika dibandingkan dengan tikus liar, tikus laboratorium lebih cepat menjadi dewasa, tidak memperlihatkan perkawinan musiman, umumnya lebih
mudah berkembang biak, dan lebih ringan dibandingkan berat badan tikus liar. Jika tikus liar dapat hidup selama selama 4 sampai dengan 5 tahun, tikus
laboratorium jarang hidup lebih dari 3 tahun Smith Mangkoewidjojo 1988. Ada dua sifat yang membedakan tikus dari hewan percobaan lainnya, yaitu
bahwa tikus tidak mudah muntah karena struktur anatomi yang tidak lazim di tempat esofagus bermuara ke dalam lambung, dan tikus tidak mempunyai kantung
empedu Bivin et al. 1979. Data biologi dan fisiologis untuk volume darah normal tikus putih berkisar
antara 57-70 mlkg; sel darah merah berkisar antara 7,2-9,6 x 10
6
mm
3
; sel darah putih berkisar antara 5-13 x 10
3
mm
3
; netrofil tikus putih berkisar antara 9-34; limfosit berkisar antara 63-84; monosit berkisar antara 0-5; eosinofil berkisar
antara 0-6; nilai kadar PCV berkisar antara 45-47; sedangkan nilai kadar Hb berkisar antara 15-16 g100 ml Smith Mangkoewidjojo 1988.
2.6. Gambaran Darah Tikus Putih
Darah merupakan media cair yang terdiri dari komponen selular yaitu sel- sel darah dan komponen cairan yang kaya akan protein yaitu plasma darah
Schalm 2010. Darah dianggap sebagai jaringan khusus yang menjalani sirkulasi dan terdiri atas sel-sel yang terendam dalam plasma darah Dellman Brown
1992.
12 Darah mempunyai peranan penting dalam mempertahankan homeostasis
tubuh yang meliputi keseimbangan cairan tubuh, pH maupun suhu tubuh, transportasi enzim dan hormon, pertahanan tubuh terhadap infiltrasi benda-benda
asing dan mikroorganisme Guyton Hall 2008. Fungsi darah juga untuk mengalirkan substansi-substansi yang sangat penting untuk kehidupan dan
kesehatan termasuk oksigen dan nutrisi yang dibutuhkan oleh setiap sel. Darah juga membawa karbondioksida dan produk metabolit lain dari berbagai sel
didalam tubuh dan mengalirkannya ke paru-paru, ginjal, dan hati dimana mereka akan dikeluarkan Cunningham 1997. Darah mempunyai fungsi untuk koagulasi
sehingga akan mencegah kehilangan darah apabila ada kerusakan dalam pembuluh darah. Selain itu, darah berperan penting dalam pengaturan suhu,
menjaga sistem keseimbangan asam basa tubuh, serta mengandung faktor penting untuk pertahanan tubuh terhadap penyakit Schalm 2010.
Pada sumsum tulang terdapat sel-sel yang disebut sel stem hematopoietik pluripoten PHSC yang merupakan asal dari seluruh sel-sel darah dalam sirkulasi.
Pembelahan sel-sel PHSC membentuk bermacam-macam sel darah tepi. Pertumbuhan dan reproduksi berbagai sel stem ini diatur oleh protein yang disebut
penginduksi pertumbuhan. Tetapi, protein penginduksi pertumbuhan ini hanya akan memicu pertumbuhan, tidak mampu untuk membeda-bedakan sel.
Pembedaan sel-sel ini diatur oleh protein lain yaitu penginduksi diferensiasi. Setelah itu, masing-masing dari protein penginduksi diferensiasi akan
menghasilkan satu tipe sel stem untuk berdiferensiasi sampai akhirnya membentuk sel darah merah dewasa. Sel-sel darah ini diproduksi secara terus
menerus sepanjang hidup, oleh sebab itu sebagian dari sel-sel asal ini masih seperti sel-sel pluripoten asal dan disimpan dalam sumsum guna mempertahankan
pasokannya Guyton Hall 2008. Pembentukan penginduksi pertumbuhan dan penginduksi diferensiasi
dikendalikan oleh faktor-faktor diluar sumsum tulang. Pada eritrosit, pembentukan penginduksi pertumbuhan dan penginduksi diferensiasi dipengaruhi
oleh tinggi rendahnya kadar oksigen di lingkungan. Pada keadaan dimana kontak tubuh dengan oksigen rendah dalam waktu yang lama akan menyebabkan induksi
pertumbuhan, diferensiasi dan produksi eritrosit dalam jumlah yang sangat
13 meningkat. Pada leukosit, penyakit infeksi akan menyebabkan pertumbuhan,
diferensiasi, dan akhirnya pembentukan leukosit tipe spesifik yang diperlukan untuk memberantas infeksi Guyton Hall 2008. Pembentukan berbagai sel
darah tepi yang berbeda-beda dari sel stem hematopoietik pluripoten asal PHSC dalam sumsum tulang disajikan pada Gambar 3.
Gambar 3 Pembentukan berbagai sel darah tepi yang berbeda-beda dari sel stem hematopoietik pluripoten asal PHSC dalam sumsum tulang
www.thefullwiki.orgHaematopoiesis.
Unsur seluler dari darah terdiri dari leukosit sel darah putih, eritrosit sel darah merah, dan platelet trombosit yang tersuspensi di dalam plasma Ganong
2008. Jika tubuh hewan mengalami perubahan fisiologis maka gambaran darah juga akan mengalami perubahan. Perubahan fisiologis ini dapat disebabkan secara
internal dan eksternal. Secara internal seperti pertambahan umur, status gizi, latihan, kesehatan, stres, siklus estrus dan suhu tubuh, sedangkan secara eksternal
14 akibat infeksi kuman, fraktura, dan perubahan suhu lingkungan Guyton Hall
2008. Fungsi utama eritrosit adalah mengangkut hemoglobin, dan seterusnya
mengangkut oksigen dari paru-paru ke jaringan. Eritrosit juga banyak mengandung karbonik anhidrase, yang berfungsi untuk mengkatalisis reaksi
antara karbondioksida CO
2
dan air, sehingga akan meningkatkan kecepatan reaksi bolak-balik beberapa ribu kali lipat Guyton Hall 2008.
Proses diferensiasi eritrosit melewati berbagai tahapan. Sel-sel pertama yang dapat dikenali sebagai rangkaian eritrosit adalah proeritroblas, dimana
dengan rangsangan yang sempurna maka dari sel stem CFU-E dapat dibentuk banyak sekali proeritroblast. Kemudian proeritroblast ini akan membelah
beberapa kali sampai akhirnya akan terbentuk banyak sekali eritrosit yang matang. Sel-sel generasi pertama ini disebut basofil eritroblas, dimana pada saat ini sel
akan mengumpulkan sedikit sekali hemoglobin. Kemudian pada perkembangan selanjutnya akan menjadi polikromatik eritroblas lalu menjadi ortokromatik
eritroblas dimana sel-sel tersebut sudah dipenuhi oleh hemoglobin dengan konsentrasi 34 dan nukleus terlihat memadat dan mengecil. Setelah itu,
retikulum endoplasma akan direabsorbsi, dan tahap ini disebut retikulosit karena masih mengandung bahan basofilik. Bahan basofilik yang tersisa tersebut akan
menghilang dalam waktu 1 sampai dengan 2 hari dan sel tersebut selanjutnya menjadi eritrosit matang Guyton Hall 2008.
Proses pembentukan eritrosit diatur oleh suatu hormon glikoprotein yaitu eritropoietin Ganong 2008. Pada hewan dewasa kira-kira 85 eritropoetin
berasal dari ginjal dan 15 berasal dari hati Guyton Hall 2008. Pembentukan eritropoietin di ginjal, dipengaruhi oleh adanya peningkatan prostaglandin di
medula Jain 1993. Eritropoietin terdapat di dalam darah pada keadaan hipoksia, dan selanjutnya bekerja pada sumsum tulang untuk meningkatkan kecepatan
pembentukan eritrosit Guyton Hall 2008. Beberapa bahan penting yang dibutuhkan dalam pembentukan eritrosit
antara lain protein asam amino, vitamin vitamin B
2
, B
6
, B
12
, folat, tiamin, vitamin C, dan E, dan mineral Fe, Cu, Mn, dan Co. Bila tubuh mengalami
defisiensi salah satu bahan-bahan penting tersebut, maka proses pembentukan
15 eritrosit akan terganggu dan dapat menyebabkan terjadinya anemia Darmawan
1996. Hemoglobin adalah substansi pembawa oksigen dalam eritrosit Ganong
2008. Menurut Cunnigham 1997 hemoglobin adalah pigmen merah protein dalam eritrosit. Hemoglobin terdiri atas protein 96 globin dan 4 hem Hartono
1988. Hem adalah suatu derifat protein yang mengandung besi, sedangkan Globin adalah suatu polipeptida yang didapatkan dari pembentukan hemoglobin
yang disintesis oleh sitoplasma eritrosit Ganong 2008. Hemoglobin mampu berikatan dengan oksigen yang di bawa dari paru-
paru menuju jaringan tubuh dan sebaliknya juga dapat berikatan dengan karbondioksida yang diangkut dari jaringan ke paru-paru di bawah pengaturan
enzim karbonik anhidrase Hartono 1988. Pembentukan hemoglobin dimulai dalam eritroblas dalam stadium retikulosit kemudian diteruskan sampai eritosit
matang. Jika eritrosit meninggalkan sumsum tulang dan masuk ke aliran darah maka akan tetap melanjutkan pembentukan sedikit hemoglobin selama beberapa
hari atau sesudahnya Schalm 2010. Hematokrit atau Packed Corpuscular Volume PCV adalah suatu ukuran
yang mewakili eritrosit di dalam 100 ml darah, sehingga dilaporkan dalam bentuk persentase. Nilai hematokrit sangat berhubungan dengan proses pembentukan
eritrosit. Dimana nilai hematokrit dipengaruhi oleh faktor-faktor yang mempengaruhi jumlah eritrosit dan ukuran eritrosit Schalm 2010.
Pada saat perdarahan jumlah eritrosit yang hilang berbanding lurus dengan plasma darah sehingga nilai hematokrit tidak berubah. Namun anemia
menyebabkan nilai hematokrit turun Duncan Prase 1977. Nilai hematokrit sangat bervariasi pada setiap individu. Angka ini bergantung derajat aktivitas
tubuh, anemia, dan ketinggian dimana individu tersebut berada Guyton Hall 2008.
Fungsi leukosit adalah untuk menyediakan pertahanan yang cepat dan kuat terhadap setiap agen infeksi. Mekanisme pertahanan yang dilakukan adalah
dengan cara menghancurkan agen infeksi melalui proses fagositosis atau dengan membentuk antibodi dan limfosit yang disensitifkan Dellmann Brown 1992.
Leukosit digolongkan menjadi dua, yaitu granulosit dan agranulosit. Leukosit
16 granulosit terdiri atas netrofil, basofil, dan eosinofil, sedangkan leukosit
agranulosit terdiri atas monosit dan limfosit Frandson 1992 Leukosit sebagian dibentuk di sumsum tulang dan sebagian lagi di jaringan
limfe. Granulosit dan monosit dibentuk dalam sumsum tulang kemudian di simpan dan dikeluarkan ke dalam sistem sirkulasi bila diperlukan. Limfosit dan
sel plasma diproduksi dalam berbagai organ limfogen termasuk kelenjar limfe, limpatik, timus, tonsil, dan berbagai kantong jaringan limfoid di dalam tubuh
Guyton Hall 2008. Jumlah seluruh leukosit jauh di bawah eritrosit dan bervariasi tergantung
dari jenis hewan Dellmann dan Brown 1992. Peningkatan jumlah leukosit pada umumnya merupakan pertanda adanya infeksi. Selain itu, suatu kanker jaringan
yang menghasilkan leukosit akan menghasilkan juga jumlah leukosit yang berlebihan, yang disebut dengan leukemia Frandson 1992.
Netrofil merupakan leukosit darah perifer yang paling banyak Hoffbrand 2006. Netrofil dewasa memiliki nukleus yang bersegmen. Sementara itu, netrofil
muda disebut juga band cell memiliki nuklues yang menggulung, seperti batang tanpa segmentasi Swenson 1984. Sel netrofil berukuran antara 12-15 mikron,
inti memiliki gelambir sebanyak 2 sampai dengan 5. Sitoplasma bergranul eosinofilik dan basofilik. Setelah 6 sampai dengan 10 jam di dalam darah, netrofil
memasuki jaringan dan tahan 1 sampai dengan 2 hari. Waktu paruh rata-rata sel neutrofil di dalam sirkulasi adalah 6 jam. Kadar normal netrofil di dalam
peredaran darah diperlukan pembentukan lebih dari 100 miliar sel netrofil per hari Ganong 2008.
Jumlah netrofil di dalam darah akan meningkat pada kasus penyakit bakteri. Netrofil memiliki butir-butir spesifik yang mengandung lisozime,
laktoferin dan mieloperoksidase yang merupakan bakterisida Dellmann Brown 1992. Sel netrofil merupakan sel pertahanan pertama terhadap kontaminasi
mikroba pada peradangan. Netrofil bertugas membunuh dan memfagosit partikel- partikel asing yang terdapat pada luka dengan cara fagositosis. Setelah
memfagosit partikel asing termasuk sisa nekrosa sel inang, netrofil akan mati dan akan digantikan oleh makrofag sebagai sel pertahanan kedua Vegad 1995.
17 Sel netrofil dapat memfagositosis 5 sampai dengan 20 bakteri sebelum sel netrofil
itu sendiri menjadi inaktif dan mati Guyton Hall 2008. Eosinofil memiliki nukleus bergelambir dua, dikelilingi butir-butir asidofil
yang cukup besar berukuran antara 0,5-1,0 µm. Diameter eosinofil berkisar antara 10-15 µm dan jangka waktu hidup dalam sirkulasi darah selama 3 sampai dengan
5 hari Dellman Brown 1989. Eosinofil sangat penting dalam respon terhadap penyakit parasitik dan alergi. Pelepasan isi granulnya ke patogen yang lebih besar
membantu dekstruksinya dan fagositosis berikutnya Hoffbrand 2006. Pada penyakit alergi, seperti asma pada saluran pernapasan, jumlah eosinofil yang
beredar dalam sirkulasi akan meningkat. Eosinofil melepaskan protein, sitokin, dan kemokin yang mengakibatkan reaksi peradangan tetapi mampu membunuh
mikroorganisme yang menyusup ke dalam tubuh Ganong 2008. Eosinofil mampu membunuh bakteri tapi kurang efisien dibandingkan dengan neutrofil
Jubb et al. 1993. Fungsi utama eosinofil ialah detoksikasi baik terhadap protein asing yang masuk ke dalam tubuh melalui paru-paru ataupun saluran pencernaan
maupun racun yang dihasilkan oleh bakteri dan parasit Frandson 1992. Basofil memiliki diameter antara 10-12 µm dengan inti bergelambir dua
atau tidak teratur. Butirnya berkisar antara 0,5-1,5 µm berwarna biru tua sampai ungu sering menutupi inti yang berwarna agak cerah. Butir-butir tersebut
mengandung heparin, histamin, asam hialuronat, kondroitin sulfat, serotonin, dan beberapa faktor kemotaktik Dellmann Brown 1992. Jumlah basofil di dalam
sirkulasi darah relatif sedikit. Di dalam sel basofil terkandung histamin dan heparin antikoagulan. Heparin ini dilepaskan di daerah peradangan guna
mencegah timbulnya pembekuan serta statis darah dan limfe, sehingga sel basofil diduga merupakan prekursor bagi mast cell Frandson 1992. Basofil memiliki
fungsi utama dalam membangun reaksi hipersensitif dan sekresi mediator yang bersifat vasoaktif Dellmann Brown 1992.
Sel limfosit memiliki dua bentuk, yaitu limfosit besar yang merupakan bentuk belum dewasa, berdiameter antara 12-15 µm, memiliki lebih banyak
sitoplasma, nukleus lebih besar dan sedikit pucat dibandingkan limfosit kecil. Sementara limfosit kecil merupakan bentuk dewasa berdiameter antara 6-9 µm,
nukleus besar dan kuat mengambil zat warna, serta memiliki sedikit sitoplasma
18 berwarna biru pucat. Umumnya inti limfosit memiliki sedikit lekuk pada satu sisi
Dellmann Brown 1992. Limfosit merupakan unsur kunci pada proses kekebalan tubuh sistem imunitas. Limfosit merupakan sel yang memiliki inti
bulat besar dan sitoplasma sedikit. Limfosit dibentuk di sumsum tulang pasca kelahiran, tetapi sebagian besar dibentuk dalam kelenjar limfe, timus, dan limpa
dari sel prekursor yang berasal dari sumsum tulang. Setelah diproses di dalam timus atau bursa ekivalen menjadi prekursor sel T atau sel B. Pada umumnya
limfosit memasuki sistem peredaran darah melalui pembuluh limfe lebih dari satu kali resirkulasi Ganong 2008.
Monosit adalah leukosit terbesar berdiameter antara 15-20 µm. Sitoplasma lebih banyak daripada sitoplasma sel limfosit. Nukleus seperti ginjal atau mirip
tapal kuda. Monosit darah tidak pernah mencapai dewasa penuh sampai bermigrasi ke dalam jaringan menjadi makrofag tetap pada sinusoid hati, sumsum
tulang, alveoli paru-paru, dan jaringan limfoid Dellmann Brown 1992. Monosit berfungsi melindungi tubuh tehadap organisme penyerang dengan cara
fagositosis. Setelah masuk ke dalam jaringan, sel-sel ini membengkak dengan ukuran yang sangat besar untuk membentuk makrofag jaringan, dan dalam bentuk
ini, sel-sel tersebut dapat hidup berbulan-bulan atau bahkan bertahun-tahun kecuali bila mereka dimusnahkan karena melakukan fungsi fagositik Guyton
Hall 2008. Makrofag atau monosit sering memakan partikel yang sama atau lebih besar darinya. Saat benda asing terlalu besar untuk dicerna, beberapa makrofag
bergabung menjadi satu yang dikenal dengan nama phagocytic giant cell sampai cukup besar untuk melakukan tugasnya Martini et al. 1992.
19
3. BAHAN DAN METODE
