27 meninggalkan sisa. Perkolat yang diperoleh kemudian dipekatkan dengan alat
rotary evaporator hingga diperoleh ekstrak kental kulit buah duku.
3.8 Pengujian Kemampuan Antioksidan dengan Spektrofotometer Visibel 3.8.1
Prinsip metode aktivitas pemerangkapan radikal bebas DPPH
Kemampuan sampel uji dalam merangkap 1,1-diphenyl-2-picryhidrazyl DPPH sebagai radikal bebas dalam larutan metanol dengan nilai IC
50
konsentrasi sampel uji yang mampu memerangkap radikal bebas sebesar 50 digunakan sebagai parameter untuk menentukan aktivitas antioksidan sampel uji
tersebut.
3.8.2 Pembuatan larutan blanko
Larutan DPPH 0,5 mM dipipet sebanyak 5 ml, kemudian dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml, dicukupkan volumenya dengan metanol sampai garis
tanda konsentrasi 40 ppm.
3.8.3 Penentuan panjang gelombang serapan maksimum
Larutan DPPH konsentrasi 40 ppm dihomogenkan dan diukur serapannya pada panjang gelombang 400-800 nm.
3.8.4 Pembuatan larutan induk ekstrak etanol kulit buah duku EEKBD
Sebanyak 25 mg sampel uji ditimbang kemudian dilarutkan dalam labu tentukur 25 ml dengan metanol lalu volumenya dicukupkan dengan metanol
sampai garis tanda konsentrasi 1000 ppm.
3.8.5 Pembuatan larutan uji EEKBD
Larutan induk dipipet sebanyak 1,25 ml; 2,5 ml; 3,75 ml; 5 ml kemudian dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml untuk mendapatkan konsentrasi 50
28 ppm, 100 ppm, 150 ppm, 200 ppm, kemudian dalam masing-masing labu
tentukur ditambahkan 5 ml larutan DPPH 0,5 mM konsentrasi 200 ppm lalu volume dicukupkan dengan metanol sampai garis tanda. Didiamkan selama 60
menit, lalu diukur serapannya menggunakan spektrofotometer UV-Visibel pada panjang gelombang 516 nm.
3.8.6 Pembuatan larutan induk vitamin C
Sebanyak 25 mg serbuk vitamin C ditimbang, dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml dilarutkan dengan metanol lalu volumenya dicukupkan dengan
metanol sampai garis tanda konsentrasi 500 ppm.
3.8.7 Pembuatan larutan uji vitamin C
Larutan induk dipipet sebanyak 0,1 ml; 0,2 ml; 0,3 ml; 0,4 ml ke dalam labu ukur 25 ml untuk mendapatkan konsentrasi larutan uji 2 ppm, 4 ppm,
6 ppm, 8 ppm, kedalam masing-masing labu ukur ditambahkan 5 ml larutan DPPH 0,5 mM konsentrasi 200 ppm lalu volumenya dicukupkan dengan
metanol sampai garis tanda. Didiamkan selama 60 menit, lalu diukur serapannya menggunakan spektrofotometer UV-Visibel pada panjang gelombang 516 nm.
3.8.8 Penentuan persen peredaman